食品和公共场所从业人员致泻性大肠埃希菌携带情况分析

邓艳华

(新建县疾病预防控制中心检验科，江西 南昌330100)

大肠埃希菌(Escherichia coli)，是肠道正常菌群的重要成员之一，主要寄居于人和动物的肠道内。少数大肠埃希菌具有致病性，可引起机体肠道感染和肠道外感染两大类疾病，并可以通过食物、水源等方式传播，从而暴发疫情[1]。自1982年大肠埃希菌在美国感染暴发以来，包括中国等许多国家都发现致泻性大肠埃希菌(Enterovirulent E.coli)，欧洲、加拿大及日本等国家近年来也暴发数起因食物污染该菌导致的疫情[2]，如1991年加拿大西北部地区的O157:H7型大肠埃希菌的暴发流行[3]和2011年德国发生的O104:H4型大肠埃希菌的暴发流行[4]。致泻性大肠埃希菌主要分为5类，即肠侵袭性大肠埃希菌(Enteroinvasive E.coli，EIEC)、肠致病性大肠埃希菌 (Enteropathogenic E.coli EPEC)、肠产毒性大肠杆菌(Enterotoxigenic E.coli，ETEC)、肠聚集性大肠杆菌 (Enteroaggregative E.coli，EAEC)、肠出血性大肠埃希菌(Enterohemorrhagic E.coli，EHEC)[5]。为了解新建县食品和公共场所从业人员致泻性大肠埃希菌的携带情况，2013年4月至2014年12月对新建县食品和公共场所从业人员的肛拭子标本在做常规预防性健康体检项目同时进行致泻性大肠埃希菌的检测和分析。

1 材料与方法

1.1 标本来源 2013年4月至2014年12月新建县食品和公共场所从业人员的常规预防性健康体检项目的肛拭子标本，共收集到标本3032例。

1.2 仪器和试剂

1.2.1 仪器 LRH-150型生化培养箱 (上海一恒科技有限公司)；E200 型生物显微镜(日本 NIKON)；BHC-130ⅡA/B型生物洁净安全柜 (江苏苏州净化设备有限公司)；ATB全自动微生物鉴定系统 (法国梅里埃)；ABI7300实时荧光PCR系统(美国应用生物系统)。

1.2.2 试剂 培养基由青岛高科园海博生物制品有限公司提供。ID32E生化鉴定反应板由法国梅里埃提供。诊断血清为宁波天润生物有限公司生产，均在有效期内使用。荧光PCR试剂盒由深圳市生科源技术有限公司提供。

1.3 检测方法 按照GB17012-1997感染性腹泻诊断标准和处理原则[6]、GB4789.6－2003致泻性大肠埃希菌检测方法[7]将采集的肛拭子标本放入GN肉汤中，立即送达实验室进行36℃±1℃培养过夜。将GN肉汤培养物接种到EMB和SS平板培养基，36℃±1℃培养18～24h，挑取可疑致泻性大肠埃希菌菌落接种三糖铁琼脂斜面，然后再选择可疑的菌落进行玻片血清凝集鉴定、接种至ID32E生化鉴定反应板进行生物化学鉴定。将上述检测出的疑似阳性菌株保存到BHI甘油肉汤中送至南昌市疾病预防控制中心进行复核鉴定(血清学鉴定和分子生物学鉴定)。1.4统计学分析 采用SPSS19.0统计分析软件，定性资料率的比较用χ2检验，结果分析以P＜0.05有统计学意义。

2 结果

2.1 食品从业人员和公共场所从业人员的致泻性大肠埃希菌的检出结果 见表1。

表1 食品从业人员和公共场所从业人员的致泻性大肠埃希菌的检出率

2.2 食品和公共场所从业人员的沙门菌、志贺菌与致泻性大肠埃希菌的检出率 见表2。

表2 沙门菌、志贺菌及致泻性大肠埃希菌的检出率

2.3 致泻性大肠埃希菌的血清型 从3032例标本中共检出致泻性大肠埃希菌12株，检出率为3.96‰。其中肠侵袭性大肠埃希菌(EIEC)7株，占2.30‰，检出血清型别有O112:K66 4株,O144:K?2株,O143:K?1株;肠致病性大肠埃希菌 (EPEC)5株，占1.65‰，检出血清型别有055:K59 2株，O44:K74、O125:K70、O26:K60各1株。检出的致泻性大肠埃希菌有肠侵袭性大肠埃希菌和肠致病性大肠埃希菌，而未检出其他致泻性大肠埃希菌。

2.4 致泻性大肠埃希菌的毒力基因检测 对12株致泻性的大肠埃希菌用荧光PCR进行致病性大肠埃希菌(eae和bfp基因)和侵袭性大肠埃希菌(ipaH基因)的测定[8]，其中1株致病性大肠埃希菌检出eae基因，1株致病性大肠埃希菌检出bfp基因，1株侵袭性大肠埃希菌ipaH基因。

3 讨论

大肠埃希菌是国际公认的卫生监测指示菌，以食物传播为主要传播途径，且致泻性埃希菌可以通过传播而暴发疫情[9]。近年来由该菌引起的食源性疾病在世界范围内呈上升趋势[10],在中国各类致泻性大肠埃希菌在食物中毒中也占有重要比例,其引起的散发病例亦有发生[11]。我市也发生过由于厨师携带侵袭性大肠埃希菌而引起的食物中毒事件[12]。调查结果显示，致泻性大肠埃希菌的携带人群中食品从业人员高于公共场所从业人员,并且携带毒力基因的3株致泻性大肠埃希菌都来源于食品从业人员，这些人可能对所接触的食品造成污染,因此加强对食品从业人员的监管是防止引起食源性食物中毒事件的必要手段。掌握食品和公共场所从业人员的致泻性大肠埃希菌的携带情况，对预防和控制腹泻病病原，尤其是食源性食物中毒方面起到重要的预警作用。按照《中华人民共和国食品安全法》、《公共场所卫生管理条例》、《预防性健康检查管理办法》规定，食品和公共场所从业人员预防性健康体检中主要检查病毒性肝炎、痢疾、伤寒、活动性肺结核和皮肤病等，肠道致病菌做沙门菌和志贺菌检测，而没有致泻性大肠埃希菌检测。调查结果显示致泻性大肠埃希菌的检出率(3.96‰)明显高于沙门菌的检出率(0.99‰)及志贺菌的检出率(0.66‰)，且有显著统计学意义。此结果表明在食品从业人员的健康检查项目肠道致病菌检测中增加致泻性大肠埃希菌的检测具有一定的可行性，为预防和控制腹泻病病原及食源性食物中毒等有重要意义。

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