40例TPPA“可疑”结果的分析

陈波，王小明，廖洁

(萍乡市人民医院检验科，江西 萍乡337055)

梅毒螺旋体(Treponema pallidum，TP)是严重危害人类健康的性传播疾病-梅毒(syphilis)的病原体[1]。TP感染人体后病程漫长，早期侵犯生殖器官和皮肤，晚期几乎累及全身所有脏器并产生多种多样的症状，给机体造成严重危害。TP的早期诊断对于梅毒的预防和控制具有重要的意义。

现阶段，国内实验室常用的梅毒螺旋体确证试验方法为TPPA(Treponema pallidum particle agglutination test)。虽然TPPA具有较高的特异性及敏感性，但是实际工作中仍然会出现一些“可疑”反应(注：参照赛乐迪亚TPPA说明书，粒子形成小环状，呈现出外周边缘均匀且平滑的圆形，判定为“可疑”)，从而对临床诊断造成一定的困扰。所以，本文将对造成TPPA结果呈“可疑”的相关因素进行一个初步的探讨。

1 材料与方法

1.1 标本来源 收集2011年1月1日至2013年8月30日我院门、急诊和住院临床可疑梅毒患者血清样本3403份。临床可疑梅毒患者包括有梅毒可疑临床表现、或有高危行为、或母亲患有梅毒的婴幼儿、或既往有梅毒病史、梅毒暴露史等。

1.2 仪器与试剂 TPPA法试剂由日本富士瑞必欧株式会社提供，均在有效期内使用。

1.3 方法 严格按照试剂盒说明书操作。室温条件下在U型板上用稀释液将血清依次稀释，然后分别加入未致敏和致敏粒子，震荡数秒，静置2h后观察结果(以1:80稀释倍数为准)。为减少实验操作的偶然误差，所有结果均由两位检验人员共同判读；所有“可疑”结果均用不同批次试剂重复2遍实验，由两位检验人员最终判读。判读标准：粒子形成小环状，呈现出外周边缘均匀且平滑的圆形，判定为“可疑”。阴性及阳性判读严格按操作说明书判读。

1.4 统计学处理 应用SPSS 19.0软件处理，采用χ2检验分析结果,以P<0.05为差异，具有统计学意义。

2 结果

通过对2011年1月1日至2013年8月30日我院门、急诊和住院临床可疑梅毒患者样本3403份进行TPPA检测，其中结果判读为“阳性”或“阴性”标本为3363例，判读为“可疑”标本为40例。具体统计见表1~表3。分析，χ2=21.257，ν=2，P<0.05(双侧)，差异有统计学意义。年龄≤1岁及≥60岁的患者血清TPPA检测更易出现可疑结果。

表1 不同年龄组的TPPA检测结果

表2 HSV、TPPA联合检测结果

表2的结果经χ2检验分析及风险评估，结果显示HSV阳性与TPPA结果呈“可疑”的发生存在显著相关 (P<0.05)；并且风险评估显示，“可疑”的OR值为13.234，OR值的95%可信区间为4.414~39.675，不包含1，提示HSV可能是导致TPPA结果呈“可疑”的影响因素。

表3 HIV、TPPA联合检测结果

表3的结果经χ2检验分析及风险评估，结果显示HIV阳性与TPPA结果呈“可疑”的发生存在显著相关 (P<0.05)；并且风险评估显示，“可疑”的OR值为5.266，OR值的95%可信区间为 1.572~17.634，不包含1，提示HIV可能是导致TPPA结果呈“可疑”的影响因素。

3 讨论

梅毒的血清学检测一直是梅毒诊断的主要方法，目前常用的主要为酶联免疫吸附试验(ELISA)、TPPA及TRUST等等[2]。由于TPPA具有相对较高的敏感性(85%~100%)及特异性(98%~100%)[3]，通常被视为梅毒的确证实验[4]。但是在临床工作中，还是会遇见TPPA结果不易判读，即呈“可疑”的情况。

通过本实验的结果分析，年龄≤1岁及≥60岁的患者血清TPPA检测更易出现“可疑”结果。这可能是与这部分人的自身免疫环境的改变有关。有报道称，老年人常伴有心脑血管疾病、糖尿病、肿瘤及白血病等慢性疾病，产生交叉性梅毒抗体成分而发生交叉反应以及其他原因导致TPPA血清学结果不易判读[5]。TPPA主要是检测血清中TP-IgG，通常新生儿感染TP后需要4~12周甚至更久才能明确检出[6]，而梅毒孕妇体内的TP-IgG可穿透胎盘滋养层进入胎儿血液循环，在15%未感染的婴儿体内存留12~15个月[7]，这可能是导致婴幼儿血清TPPA检测易出现“可疑”结果的原因。

另外本实验发现，有HSV或HIV感染的患者的TPPA结果也较容易出现“可疑”结果。这可能是HSV的抗体与TP抗体有交叉的缘故，不过有待进一步证实。当然，有报道称，有些合并感染HSV的梅毒患者，梅毒的Real-time PCR结果反而会呈现阴性[8]。同时，也有一些HIV感染影响梅毒检测结果的报道，如Turbadkar D等[9]研究发现HIV感染可使患者血清中产生抗心磷脂抗体和抗卵磷脂抗体，从而影响梅毒初筛实验的结果，导致HIV感染患者性病研究实验室玻片试验或RPR假阳性率高于非HIV感染者。孔雷等[10]报道，合并HIV感染的梅毒患者血清学检查可呈假阴性或阳性结果的延迟出现。Maple PA等[11]报道了26例TPPA呈假阴性的梅毒患者，其中有14例合并有HIV感染，其分析可能因为HIV阳性患者体内免疫功能受损，梅毒抗体滴度过低所致。

总之，TPPA检测结果可作为样本中是否含有TP抗体的判断依据，但由于各种干扰因素的影响，实际工作中仍然存在“可疑”结果，还需要结合其他检测结果和临床症状进行综合评价。

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