黄芩的抑菌作用及有效化学成分的探讨

王传娟 (山东省临沂市兰山区人民医院，山东临沂276000)

0 引言

黄芩也称山茶根、黄芩茶，为唇形科植物，多年生草本，主根长大，略呈圆锥状，外皮褐色，用作药物时具有清热燥湿、泻火解毒、止血、安胎等作用.常用于湿温、暑温胸闷呕恶、湿热痞满、泻痢、黄疸、肺热咳嗽、高热烦渴、血热吐衄、痈肿疮毒、胎动不安等［1］.用作中药时具有抗菌、抗真菌、抗病毒、抗炎抗变态反应、抗血小板聚集及抗凝、降血脂的作用.本研究以超声法和水煮法对黄芩抑菌作用及有效化学成分的提取展开分析.

1 材料和方法

1.1 仪器与试剂 选用上海予华仪器设备有限公司生产的旋转蒸发器RE-501，成都艾普瑞实验设备有限公司生产的APR-GM-ZYT-5超净工作台，上海一恒科学仪器有限公司的DHP-9012电热恒温培养箱，深圳市力斯特超声波设备有限公司的LST-M1超声波发生器，按照20、800 及1100 kHz发生频率［2］.

1.2 药品和试剂 选用宝芝堂购入的黄芩中药材料，经过检测具有黄芩的所有作用和功效，符合研究条件.选用广东环凯生产的MH肉汤、琼脂批样机，其他试剂均为分析纯.

1.3 菌种 选用中国食品药品检验所提供的实验用肠炎沙门氏菌ATCC13076.

1.4 提取方法

1.4.1 超声法 取50 g以上黄芩饮片，置于60℃的容器中进行烘干，取出并粉碎后使用10目筛过滤.用天平精确称取50 g黄芩粗粉，加入10倍量的水，选用20 kHz频率的超声发生器进行超声处理，在处理过程中要随时补充水分，保证其溶液液面在同一高度，超声处理1h后过滤.以盐酸调节滤液 pH至1～2，并置入80℃热水中预热，将提取出的黄色结晶物过滤，向沉淀物中加入蒸馏水并搅拌，最后向溶液中加入40%的氢氧化钠，溶解黄芩素后将溶液pH调节至6～7.待溶液pH达到要求后加入等量95%浓度的乙醇，加热至50℃后再次过滤，用10%盐酸调节滤液pH至2～3，静置于50℃水浴中30 min，待完全析出结晶物后，过滤得到结晶物，并用清水冲洗至中性，置入60℃烘干机中干燥至恒重，以此获取黄芩结晶物，最后配置为10 mg/mL的溶液［3］.

1.4.2 水煮法 取50 g以上黄芩，经碾压制成粉末，通过系统提取法，获得黄芩提取物，称取50 g黄芩粉末后加入1 kg蒸馏水并加热，经过煎煮、过滤等操作，获取溶液后加入浓盐酸调节溶液pH至中性，最后加入等体积的95%乙醇，加热至50℃后再次过滤，用10%盐酸调节滤液pH至2～3，静置于50℃水浴中30 min，待完全析出结晶物后，过滤得到结晶物，并用清水冲洗至中性，置入60℃烘干机中干燥至恒重，以此获取黄芩结晶物，最后配置为10 mg/mL的溶液.

1.5 评价指标 将3 mL实验用肠炎沙门氏菌接种于MH肉汤中，并置于37℃环境下培养，18 h后将菌液稀释至浊度105FU/mL，然后使用二倍稀释法进行体外抑菌实验，每个浓度的实验均重复进行3次.

2 结果

2.1 最低抑菌浓度MIC比较 经过实验操作研究，验证了黄芩当中的结晶物所融合的提取液存在抑菌作用，而超声法提取的黄芩抑菌效果明显高于水煮法，差异有统计学意义(P ＜0.05，表1).

表1 两种方法黄芩提取液最低抑菌浓度MIC比较(mg/mL)

2.2 两组提取结晶物的抑菌浓度比较 通过两种不同提取方法所获得的提取液对肠炎沙门氏菌的抑菌效果也有所不同，在具有抑菌效果的同时，超声法提取黄芩结晶物的抑菌效果明显高于水煮法，差异有统计学意义(P ＜0.05，表2).

表2 两组提取结晶物的抑菌浓度比较 (mg/mL)

3 讨论

黄芩根含黄芩甙元、黄芩甙、汉黄芩素、汉黄芩甙和黄芩新素，其药理作用有抗炎抗变态反应、抗微生物、解热、降压、利尿等.《纲目》中提到:“治风热湿热头疼，奔豚热痛，火咳，肺痿喉腥，诸失血.”说明，黄芩的抑菌作用是其最有价值的.黄芩甙元能抑制离体气管及回肠之Sehultz-Dale反应，对豚鼠被动性皮肤过敏反应、组织胺皮肤反应亦表现抑制，在抗变态反应方面，甙元较甙作用强.黄芩有较广的抗菌谱，在试管内对痢疾杆菌、白喉杆菌、绿脓杆菌、葡萄球菌、链球菌、肺炎双球菌以及脑膜炎球菌等均有抑制作用，煎剂作喉头喷雾，对脑膜炎带菌者亦有效.黄芩煎剂100%浓度，平板实验法对痢疾杆菌、伤害杆菌、副伤寒杆菌、霍乱弧菌等有明显的抑制作用.采用黄芩煎剂试管法试验，1∶1280浓度可抑制伤寒杆菌、溶血性链球菌，1∶80浓度可抑制宋内氏痢疾杆菌.黄芩煎液，试管斜面法试验，4%浓度抑制狗小牙胞菌及堇色毛癣菌.黄芩煎剂25%～100%浓度，体外试验可抑制乙型肝炎病毒DNA复制.因此，其抑菌作用显而易见.

在临床或实验的过程中，物质的相互作用存在一定的制约因素，尤其对于植物自身所包含的多种多样的制约因素，植物有效成分的提取方法不同，对其自身造成的破坏及影响也是不同的.黄芩当中的有效成分为抑菌成分，近年来如何有效提取出黄芩的有效抑菌成分成为人们关注的焦点.传统提取黄芩中黄芩苷的方法为水煮法，通过水煎煮、烘干等方式，但这种方法的提取时间较长且提取效率较低.为了提高黄芩苷的提取率，超声法是目前比较受关注的方法［4］.

本研究结果显示，超声法提取黄芩的抑菌效果显著高于水煮法，且提取结晶物的抑菌效果明显高于水煮法，差异有统计学意义(P＜0.05).表明，超声法提取黄芩抑菌效果优于水煮法，更利于分离黄芩的有效成分.含多种黄酮类化合物，主要为黄芩甙(baicalin)，黄芩素(baicalein)，汉黄芩甙(wogonoside)，汉黄芩素(wogonin)，7-甲氧基黄芩素，7-甲氧基去甲基汉黄芩素，黄芩黄酮Ⅰ，黄芩黄酮Ⅱ.近年来，黄芩的有效成分中，无论是单用还是联合使用都表现出极强的抗菌功效，因此对其抗菌作用的研究进入了深入阶段，对黄芩药效物质基础及作用机制的研究更是为研究新型抗菌药物开辟了新方向.

综上所述，黄芩具有良好的抑菌作用，通过超声法可以有效提取出黄芩中的抑菌成分，值得临床推广.

［1］郭京华.浅析黄芩有效化学成分及抑菌作用［J］.中国实用医药，2012，7(16):195-196.

［2］董 毅.正品黄芩与甘肃黄芩有效化学成分及抑菌作用的比较研究［J］.中国中医药科技，2010，17(3):226-228.

［3］刘国华，张延敏.黄芩有效化学成分及抑菌作用分析［J］.中国实用医药，2012，7(6):168-169.

［4］黄爱萍.黄芩有效化学成分及抑菌作用的研究分析［J］.光明中医，2011，26(7):1356-1357.