多台不同品牌血细胞分析仪的校准与比对分析

刘媛，但刚，江忠勇，胡莉娜，谢静，熊杰

·临床论著·

多台不同品牌血细胞分析仪的校准与比对分析

刘媛，但刚，江忠勇，胡莉娜，谢静，熊杰

目的对多台血细胞分析仪进行校准和比对，以确保本实验室内不同品牌血细胞分析仪对同一标本的检测结果具有可比性。方法以Sysmex2100血细胞分析仪对新鲜血定值，然后对另外3台血细胞分析仪进行校准，按照美国国家临床实验室标准化委员会（NCCLS）的要求，每日随机选取高、中、低值临床标本8份，分别用以上3台血细胞分析仪测定WBC、RBC、HGB、PLT、MCV、HCT，各仪器均采用手动模式对每份标本连续测定2次，连续测定5 d，共40份样本，进行偏差评估，并作散点图、建立回归方程和计算相关系数。结果Sysmex XE-2100、2台HORIBA ABX-DX120、迈瑞BC-5800测定结果偏差均在可接受范围内，相关性好（r2≥0.95）。结论通过校准和比对，本实验室4台不同品牌的血细胞分析仪检测结果具有可比性，均可为临床提供准确可靠的结果。

血细胞分析仪；校准；偏差；品牌

血细胞分析仪操作简便、快速，准确度、精密度高，是现代临床检验最常用的仪器之一，是血常规检查的主要仪器。我院检验科为满足大量临床血常规标本检测需要，已购置多台不同厂家或不同型号、系列的血细胞分析仪，因各仪器的检测系统和原理有所不同，所以同一份标本在不同仪器上的检测结果可能会有一定的偏差。ISO15189[1]对检测结果的可比性提出了明确要求，实现同一实验指标不同检测系统检测结果的可比性是质量管理的基本目标。本研究以Sysmex XE-2100为基准仪器，按照美国国家临床实验室标准化委员会（NCCLS）批准的《用患者样本进行方法比对及偏倚评估-批准指南（EP9-A2）》文件的要求[2]，通过对Sysmex XE-2100、HORIBA ABX-DX120、BC-58003三类仪器进行比对实验和分析，探讨检测结果是否具有可比性及偏差是否在允许范围内，评估不同仪器间检测结果的准确性和一致性，为质量控制提供依据，为临床提供准确的诊断和疗效评价依据。

1 材料与方法

1.1 实验标本选自本院门诊患者EDTA-K2抗凝静脉全血标本，采集时间在2 h内。每日随机选取8份标本（含高、中、低值），每份标本连续测定2次，连续测定5 d，共40份标本（考虑待测物的异常情况，分析物浓度应尽可能在测定范围内均匀分布）。

1.2 仪器与试剂日本Sysmex XE-2100血细胞分析仪，法国HORIBA ABX-DX120（2台）血细胞分析仪，中国迈瑞BC-5800血细胞分析仪，均使用各公司原装配套试剂、校准品及质控品。

1.3 校准

1.3.1 Sysmex XE-2100的校准和样品定值使用原装配套校准品SCS-1000，批号50610525，取校准品在Sysmex XE-2100上采用手动进样模式连续测定6次，取2~6次结果计算均值，计算测定均值与靶值间的偏差，偏差=（均值-靶值）×100/靶值。按照校准手册上列的CV%判断标准进行判断，决定是否进行校准系数修改。

然后取正常成人新鲜静脉血，在校准后的Sysmex XE-2100上，采用手动进样模式连续重复测定11次，计算2~11次结果的均值、变异系数（CV）、标准偏差（SD），所测得的均值为靶值。

1.3.2 用已定值得新鲜血校准另外3台血细胞分析仪各仪器均严格定期维护、保养，每日用高、中值室内质控品进行质控测定，保证3台仪器均在控。用已赋值的新鲜血采用手动进样模式，分别在另外3台血球仪上连续测定6次，取2-6次结果计算均值，计算测定均值与靶值间的偏差，判断标准与校准Sysmex XE-2100血细胞分析仪相同。

1.4 比对以Sysmex XE-2100为基准仪器，HORIBA ABX-DX120、迈瑞BC-5800为比对仪器。各仪器对当日选取的8份标本（保证每份标本有足够量：能够用基准仪器作2次测定；能够用比对仪器作2次测定；如果需要应能继续进行追踪实验）分别开始检测，测定各项参数，仪器均采用手动模式对每份标本连续测定2次。两次测定中，样本排列顺序为1、2、3、4、5、6、7、8和8、7、6、5、4、3、2、1，顺序中的分析物浓度应尽可能随机排列，以减少交叉污染及漂移对重复测定标本平均值的影响。连续测定5 d，共40份样本。

1.5 数据统计与分析设基准仪器测定结果为靶值x，比对仪器测定结果为测定值y。用SPSS16.0统计软件计算各仪器40份样本6个项目两次测定的平均值，求基准仪器与比对仪器的相对偏差进行偏差分析，相对偏差=（测定值-靶值）/靶值×100%。

相关性分析：以Yi对Xi作Yi散点图（Yi，比对仪器双份测定的均值；Xi，基准仪器双份测定的均值；i,样本数），求得其相关系数r和回归方程Y= b X+a，P＜0.05为差异有统计学意义。

1.6 判断标准相对偏差判断标准：以1988年美国临床实验室改进修正案(CLIA'88)允许误差范围（TEa）的1/2作为偏倚界限：白细胞(WBC)为7.5%，红细胞(RBC)为3%，血红蛋白(HGB)为3.5%，血小板(PLT)为12.5%，红细胞平均体积(MCV)为3.5%，红细胞比容（HCT）为3%[3]。医学决定水平（X c）范围内仪器间相对偏差（SE%）＜1/2TEa，80%标本数结果满足上述条件，则认为偏差在可接受范围内。

相关性判断标准：r2≥0.95则分析物浓度范围合适，方法间具有可比性，比对通过。

2 结果

2.1 线性测定以Sysmex XE-2100检测结果为x轴，以HORIBA ABX-DX120和迈瑞BC-5800检测结果为y轴，对各项指标40个样本均值分别作x、y散点图(图1)，目测无离群点，散点图分布初步确定各指标在HORIBA ABX-DX120、迈瑞BC-5800上检测结果与Sysmex XE-2100检测结果呈直线正相关。

图1 ABX-DX120A、ABX-DX120B和BC-5800与XE-2100各检测指标均值散点图

2.2 相对偏差分析比对仪器HORIBA ABXDX120、迈瑞BC-5800与基准仪器Sysmex XE-2100间各指标的相对偏差，满足SE%＜CLIA'88 1/2TEa的样本数已超过40份样本的4/5（表1），各指标均达到偏差可接受要求。

2.3 线性相关性分析WBC、RBC、HGB、PLT、MCV和HCT 6项指标r2值均＞0.95，直线斜率b值均接近1，截距a值除PLT、MCV外，均接近0，见表2。

表2 ABX -DX120A、ABX-DX120B和BC-5800与XE-2100检测项目的相关性分析

3 讨论

随着医学检验学的发展，同一检验项目不同检测系统的仪器多种多样，现代血液分析仪主要应用电学和光学两大原理，电学原理有阻抗法和射频电导法，光学原理包括光散射法和分光光度法。各种类型血液分析仪检测各种参数的原理不尽相同[4-5]，各仪器都有独立的质控系统和试剂系统。我院检验科有3种不同品牌的血细胞分析仪，既担负着大量急诊和门诊、住院标本的检测，又根据本实验室设定的复检规则及时对异常结果做仪器复检，其中Sysmex XE-2100参加卫计委室间质评并取得优秀成绩。因此，我们在对HORIBA ABX-DX120、迈瑞BC-5800进行室内质控、定期校准的基础上，又与Sysmex XE-2100进行比对，来判断不同仪器检测结果是否具有良好可比性，偏差是否在允许范围内，以确保各仪器间结果一致，从而为临床提供准确和稳定的报告结果。

表1 ABX-DX120A、ABX-DX120B和BC-5800与XE-2100各检测项目的相对偏差分析

通过比对HORIBA ABX-DX120和迈瑞BC-5800与基准仪器Sysmex XE-2100间6项指标的比较，r2﹥0.95，可认为WBC、RBC、HGB、PLT、MCV、HCT这6项指标在这3类设备的检测结果一致性很好；而比对仪器HORIBA ABX-DX120的MCV参数r2=0.9621，BC-5800的MCV参数r2= 0.9562，说明这两种仪器MCV分析结果与Sysmex XE-2100的一致性欠佳，但仍然合格。从各仪器的检测数据发现，PLT检测值不够稳定，主要是因影响PLT自动分析的因素比较多，建议在临床应用中，同一台血细胞分析仪室内质控PLT的CV值控制在4%左右。为保证检测结果有更严格的准确性和一致性，应更全面规范地实现质量保证、仪器校准和性能评价，除偏差和比对分析外，实施对精密度、携带污染率、准确性、标本老化、仪器对异常标本和干扰物的灵敏度、空白读数、试剂稳定性等的性能验证[6-7]。

目前同一实验室拥有多台血液分析仪已属普遍现象，如何加强同一实验室内多台血液分析仪间全血细胞计数准确性和可比性是质量控制工作的重点。当前“检验结果互认”已成为社会关注的焦点问题之一,而互认的前提是检验结果必须有可比性。最好的方法是用配套校准品定期对血细胞分析仪进行校准，但配套校准品不但价格昂贵，而且有效期较短，基层医院难以对每台仪器购置配套的校准品。而新鲜血作为校准品的替代物校准血细胞分析仪不但结果准确、可比性好,而且来源方便、经济实惠。通过此次比对试验不难看出，比对仪器和基准仪器的线性相关性良好，偏差小，在工作中可配合相互使用。

[1]中国合格评定国家认可委员会.医学实验室质量和能力认可准则在临床血液学检验领域的应用说明[S].CNAS-CL43,2012: 2-4.

[2]叶应妩,王毓三,申子瑜.全国临床检验操作规程[M].4版.南京:东南大学出版社,2006:62.

[3]Allison FS.An historical review of quality control in hematology [J].Am JMed Technol,1993,49(9):625-632.

[4]张志强，王新锋.两种血细胞分析仪的实验室内比对结果分析[J].中国卫生检验杂志，2014，24(19):2818-2820.

[5]何平.同一品牌相同类型血液分析仪检测结果的可比性研究[J].中国实验诊断学，2013，17(2):337-338.

[6]陈丽芳，林淑仪，姚淑雯，等.多台血细胞分析仪检测结果可比性分析[J].广东医药，2013，44(1):39-40.

[7]熊立凡,刘成玉.临床检验基础[M].4版.北京:人民卫生出版社, 2009:127-128.

Calibration of differentbrands of blood cell analyzers and comparative analysis

Liu Yuan,Dan Gang,Jiang Zhongyong,Hu Lina,Xie Jing,Xiong Jie Department of Laboratory,Center of Laboratory Medicine/PLA Key Laboratory of High Humidity Medicine,General Hospital of Chengdu Military Command,Chengdu,Sichuan,610083,China

Objective To calibrate a number of blood cell analyzers and make comparison among them in order to ensure the comparability of the testing results for the same sample detected by the different brands of analyzers.Methods Sysmex2100 blood cell analyzer was used to evaluate the fresh blood.The other three blood cell analyzerswere calibrated.According to the requirements of the USCommittee for Clinical Laboratory Standards(NCCLS),8 sampleswith high,medium,and low value were random ly selected daily to detect WBC,RBC,HGB,PLT,MCV,and HCT by the three blood cell analyzers.Those machines were manipulated in manual mode to test every sample twice for continuous 5 days.Totally 40 samples were tested

the deviation evaluation. Scatterplotwas drawn,and regression equation was established.Correlation coefficientwas calculated.Results The deviation of the testing results by Sysmex XE-2100,two HORIBA ABX-DX120,and Mindray BC-5800 was within the tolerance interval,and the correlation was good(r2≥0.95).Conclusion Through the calibration and comparison,there is certain comparability of the testing results by the four analyzers of differentbrands.All provide accurate and reliable results for the clinic.

blood cell analyzer;calibration;deviation;brand

R 446

A

1004-0188（2015）08-0873-03

10.3969/j.issn.1004-0188.2015.08.021

2015-07-13）

四川省卫计委科研课题（140007）

610083成都，成都军区总医院实验医学中心检验科、高湿医学全军重点实验室

熊杰，电话：028-86570452