用GC法测定一品康牌珍美软胶囊中天然维生素E的含量

秦迎春

（湖南省张家界市食品药品检验所，湖南 张家界 427000）

用GC法测定一品康牌珍美软胶囊中天然维生素E的含量

秦迎春

（湖南省张家界市食品药品检验所，湖南 张家界 427000）

旨在用建立气相色谱法检测一品康牌珍美软胶囊中天然维生素E的含量。本品原标准采用HPLC法测定产品中天然维生素E的含量。样品需要经皂化提取处理一系列操作后，再进行测定。本文为简化操作、减少复杂操作过各程对检验结果的影响，将原标准中的HPLC改为GC法，经方法学研究，维生素E的线性范围0.781208～3.840072 mg/mL，精密度的RSD=0.61%，加样回收率为97.34%，结果表明该法简便、结果准确、精密度良好，可作为该产品中天然维生素E的含量测定法，进行质量控制。

气相色谱法；天然维生素E；一品康牌珍美软胶囊；含量测定

一品康牌珍美软胶囊是G保健食品，配方中含有天然维生素E为其标志性成分，维生素E是一类具有生育酚结构化合物的总称［1-2］，该类化合物一类良好的抗氧剂，天然维生素E的生物活性及安全性较合成品高，而其中生物活性最高的是d-α-生育酚，具有祛黄褐斑的功效［3-4］。为实现产品质量控制，本文建立了用GC法测定天然维生素E的含量。通过多次试验，结果证明该法简便、快速，测定结果准确可靠。

1 仪器与试样

1.1 仪器：GC-2010气相色谱仪、FID检测器（日本岛津）、AOC-5000自动进样器、GCSoltuion色谱工作站、AUW220D电子分析天平。

1.2 试剂及试样：正已烷（色谱纯，天津化学试剂研究院）；一品康牌珍美软胶囊（广东长兴科技保健品有限公司，批号：20130601）；维生素E对照品（中国食品药品检定研究院，批号：100062-201110）；三十二烷（Standard for GC≥98.6%；Aladdin industral corporation；Lot#1325045）。

2 方法与结果

2.1 方法的建立

2.1.1 色谱条件及系统适用实验。色谱柱：HP-1毛细管柱（30 m× 0.320 mm×0.25 µm，Agilent Technologies），柱温：265 ℃，进样口温度290 ℃，FIP为检测器，检测器温度300 ℃，分流进样，进样比45∶1。维生素E峰与内标物三十二烷峰的分离度＞1.5。

2.1.2 校正因子测定：取内标物三十二烷约0.2 g，精密称定，置200 mL棕色容量瓶中，加正已烷适量使溶解，再加正已烷稀释至刻度，摇匀，即得。另取对照品维生素E约20 mg，精密称定，置20 mL棕色量瓶中，精密加入内标溶液“mL”的棕色量瓶中，精密，摇匀，即得。取样1 µL注入气相色谱仪，测定，计算校正因子。

2.1.3 测定法：取样品10粒的内容物，搅匀，适量精密称定，置20 mL棕色量瓶中，精密加入内标溶液10 mL，充分振摇，使维生素E溶解，用膜孔为0.45 µm的有机滤膜过滤，取续滤液，即得。吸取续滤液1 µL注入气相色谱仪，测定，即得。

2.2 试液制备。①内标溶液的制备：精密称取三十二烷0.4790 g，置500 mL棕色容量瓶中，加正已烷适量使溶解，再加正已烷置刻度，摇匀，即得。②对照品溶液的制备和校正因子的测定：精密称取对照品两份［对照品1：0.01925 g；对照品2：0.01917（对照品的纯度为98.6%）］，置20 mL棕色容量瓶中，分别精密加入内标溶液10 mL，摇匀。吸取1 µL注入气相色谱仪，计算校正因子1与校正因子2，并求平均校正因子（即校正因子）。③供试品溶液的制备：取供试品10粒的内容物，搅匀，精密称定，置20 mL的棕色容量瓶中，精密加入内标溶液10 mL，充分振摇使维生素E溶解。取样品溶液经有机滤膜（膜孔0.45 µm）过滤，取续滤液置棕色进样瓶中。

2.3 样品含量测定：取样品两份（因抽样受限，只做了一批试样。批号：20130601），按供试品溶液制备方法制成供试液，精密吸取供试液1 µL，注入气相色谱仪，测定维生素E与内标物的峰面积，根据色谱结果，按内标法计算含量。结果见表1。

表1 样品含量测定结果

2.4 线性关系考查：精密称取对照品0.07932 g（纯度98.6%），置25 mL棕色容量瓶中，精密加入内标物溶液10 mL，摇匀，作为对照品贮备溶液。精密量取对照品溶液1、2、2.5、3、3.5、5 mL置10 mL棕色容量瓶中，再分别加入内标溶液，使最终体积成5 mL，摇匀。进样1 µL测定，记录色谱。根据测定结果，以维生素E的峰面积与内标物峰面积的比值作为纵坐标Y，以对照品溶液的浓度作为横坐标X，绘制标准曲线。得线性方程Y=0.9759X+0.0288，r=0.9999，线性范围0.781208～3.840072 mg/mL，标准曲线图见图1。

图1 标准曲线图

2.5 精密度试验：精密称取对照品0.01875 g（纯度为98.6%），置20 mL棕色容量瓶中，分别精密加入内标溶液10 mL，摇匀。吸取1 µL注入气相色谱仪，重复测定6次，按测定结果计算维生素E对照品峰面积与内标物面积的比值。计算结果的RSD=0.62%（n=6），表明仪器精密度良好。如果见表2。

表2 精密度试验结果

2.6 重复性试验：精密称取供试品0.2801 g，置20 mL棕色容量瓶中，精密加入内标物溶液10 mL，充分振摇，使溶解。溶液经膜孔为0.45 µm有机滤膜过滤，取续滤液至棕色进样瓶。精密吸取1 µL，注入气相色谱仪，重复运行6次，测定维生素E含量。结果RSD=0.61%，表明方法精密度高，重现性良好。结果见表3。

表3 重复性试验结果

2.7 稳定性试验：取图5供试品溶液，按含量测定的色谱条件，分别在0、2、24 h时，进样1 µL，测定维生素E峰面积与内标物峰面积，计算峰面积比值。结果RSD=0.33%（n=3），结果表明供试品在24 h内基本稳定。见表4。

表4 稳定性试验结果

2.8 加样回收试验：精密称取对照品0.04353 g（纯度98.6%），置50 mL棕色容量瓶中，精密加入内标物溶液25 mL，摇匀，作为对照品贮备液。取20 mL的棕色容量瓶3个，分别编为1、2、3号。再取已知含量的样品10粒的内容物，搅匀，精密称取3份，分置3个编号的棕色量瓶中，再精密量取对照品贮备液3 mL、5 mL、7 mL依次加入已称取样品上述编号的1、2、3号容量瓶中，再加入内标液，使最终体积为10 mL，充分振摇，将溶液经有机滤膜（膜孔0.45 µm）过滤，取续滤液置棕色进样瓶中。精密进样1 µL进行测定，每一浓度重复运行3次。以维生素E与内标物峰面积的比值，用图4的曲线方程测定维生素E的浓度，根据浓度算出含量及回收率，并求RSD值，结果见表5。

表5 维生素E加样回收试验结果（n=9）

3 计 算

校正因子f=（A内标×C对照）/（A对照×C内标）

C样品=f×（C内标×A样品）/A内标

样品中维生素E的量（g/100 g）=（C样品×稀释倍数×100 g）/取样量（g）

式中：f：为校正因子；A：为峰面积；C：为浓度（mg/mL）。

4 排除干扰

天然维生素E对氧十分敏感，遇光及空气可被氧化而变质，为排除干扰，在配制及检测过程中采用棕色容量瓶及棕色进样瓶并避光操作。

5 色谱图

空白溶剂、内标物溶液、内标物+样品、内标物+对照品色谱图见图2～5。

图2 空白溶剂色谱图

图3 内标物溶液色谱图

图4 内标物+样品色谱图

图5 内标物+对照品色谱图

6 验证结果评价

经方法学验证，结果表明该法适用于以天然维生素E、珍珠粉、紫苏叶油、红花、食用植物、明胶、纯化水为主要原料，经提取、浓缩、干燥、包装等主要工艺加工制成的一品康珍美软胶囊中天然维生素E的含量测定。具有简便、快速、灵敏、专属性强的特点，测定结果准确可靠。

［1］ 国家药典委员会.中国药典（二部）［M］.2010年版.北京:中国医药科技出版社，2010.

［2］ 李培阳.药物分析化学［M］.5版.北京:人民卫生出版社，2002.

［3］ 国家药典委员会.中国药典（二部）［M］.2010年版.北京:中国医药科技出版社，2010:B附录194.

［4］ 吴立军.天然药物化学［M］.5版.北京:人民卫生出版社，2007.

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B

1671-8194（2015）13-0056-02