哈密市家畜口蹄疫免疫抗体检测与分析

文│李彦芳（新疆维吾尔自治区哈密市动物疫病预防控制中心）

玉努斯·沙旦（新疆维吾尔自治区哈密市天山乡畜牧兽医站）

阿吾提·苏莱曼（新疆维吾尔自治区哈密市二堡镇畜牧兽医站）

哈密市家畜口蹄疫免疫抗体检测与分析

文│李彦芳（新疆维吾尔自治区哈密市动物疫病预防控制中心）

玉努斯·沙旦（新疆维吾尔自治区哈密市天山乡畜牧兽医站）

阿吾提·苏莱曼（新疆维吾尔自治区哈密市二堡镇畜牧兽医站）

口蹄疫是由口蹄疫病毒引起的一种急性、热性、高度接触性传染病，主要侵害偶蹄兽（牛、羊、猪），临床上以口腔黏膜、蹄部及乳房皮肤发生水疱和溃烂为特征。口蹄疫病毒已知有7个血清型，分别为A、O、C型，南非1、2、3型和亚洲I型（以下简称亚I型），而我国流行的血清型主要为A、O和亚I型。口蹄疫病毒各血清型之间无交叉免疫性，给该病的防控工作带来很大困难。目前，国内外主要采取对易感动物进行疫苗免疫的措施来预防和控制该病，疫苗免疫效果的好坏直接关系到口蹄疫的防控效果。本研究利用液相阻断ELISA试验对哈密市14个乡镇的存栏家畜进行了口蹄疫疫苗免疫抗体监测与分析，以评估哈密市的口蹄疫疫苗免疫效果，为本地区的口蹄疫防控工作提供技术指导。

一、材料与方法

1.疫苗及主要诊断试剂。牛羊口蹄疫O、A、亚I型三价灭活苗由金宇保灵生物药品有限公司生产，批号为4235014。猪口蹄疫O型灭活苗由中农威特生物科技股份有限公司生产，批号为H140319J。口蹄疫O、A和亚I型抗体液相阻断ELISA检测试剂盒均由中国农业科学院兰州兽医研究所提供，批号分别为2014052003、2014092301、2014100902。

2.血清。2014年哈密市秋季口蹄疫免疫时间为9月17日～10月20日，免疫后1个月左右，哈密市动物疫控中心组织乡镇兽医站在全市14个乡镇开展免疫家畜采血工作，共计采集955份血清样品。其中，牛血清315份，羊血清480份，猪血清160份。

3.检测方法。应用口蹄疫O、A、亚I型抗体液相阻断ELISA检测试剂盒分别对牛、羊血清样品进行口蹄疫各亚型免疫抗体水平检测；应用口蹄疫O型抗体液相阻断ELISA检测试剂盒对猪血清样品进行口蹄疫O型免疫抗体水平检测。具体操作步骤按照试剂盒说明书进行。

◎图1 哈密市各乡镇牛口蹄疫A、O、亚I型抗体检测结果

图2 哈密市各乡镇羊口蹄疫A、O、亚I型抗体检测结果

4.结果判定。以病毒抗原对照平均OD492值的50%为临界值，被检血清稀释孔OD492值大于临界值的孔判为阴性，小于临界值的孔判为阳性。孔的OD492值等于临界值时所对应的稀释度为该份血清的抗体滴度。

当待检牛、羊血清样品的抗体滴度≥1∶128时，猪血清样品的抗体滴度≥1∶64时，判定该血清样品为×型口蹄疫抗体效价合格。

二、结果与分析

1.牛羊口蹄疫O、A、亚I型抗体检测结果与分析。利用口蹄疫抗体液相阻断ELISA检测试剂盒对13个乡镇送检的795份血清（其中，牛血清315份，羊血清480份）分别进行了口蹄疫O、A、亚I型抗体检测，具体检测结果见图1和图2。哈密市各乡镇牛、羊口蹄疫A型抗体合格率处于60%～95%，O型抗体合格率处于69.2%～95%，亚I型抗体合格率处于61.5%～100%。由图1和图2可知，2014年哈密市牛、羊口蹄疫抗体水平整体较好，13个乡镇的口蹄疫平均抗体合格率均能达到农业部规定的70%标准。

50%以上的乡镇口蹄疫O型和亚I型的抗体合格率均明显地高于A型抗体合格率。这表明，与O型和亚I型相比，全市各乡镇牛、羊A型口蹄疫抗体合格率普遍较低。

2.猪口蹄疫O型抗体检测结果与分析。利用口蹄疫O型抗体液相阻断ELISA检测试剂盒对2个乡镇及1个生猪屠宰场送检的160份猪血清样品进行了口蹄疫O型抗体水平检测，具体检测结果见图3。由图3可知，陶家宫镇猪口蹄疫免疫抗体水平最好，其次是西河区，市生猪屠宰场最差。市生猪屠宰场猪口蹄疫抗体合格率未达到农业部规定的70%标准。经调查发现，陶家宫镇和西河区在国家强制免疫的3种猪的重大动物疫病免疫程序上有所不同，且差别较大；市生猪屠宰场猪的来源复杂，50%以上的猪是从外省、外市调入，免疫程序执行情况无从得知。

图3 哈密市各乡镇猪口蹄疫O型抗体检测结果

三、讨论

世界动物卫生组织（OIE）数据显示，近两年A型血清型感染率呈迅速上升趋势，2011年全球A型感染率是2010年的3倍，而O型则呈现递减趋势。有学者研究发现，A型口蹄疫的流行范围和毒株的复杂程度仅次于O型口蹄疫；并且A型口蹄疫致病性和抗原变异性普遍强于O型。

本研究发现，与O型和亚洲I型相比，哈密市A型口蹄疫免疫抗体水平较低。这表明，牛羊口蹄疫O、A、亚I型三价灭活苗中A型的免疫效果较差，有待于进一步优化和完善。口蹄疫疫苗研发机构应该充分考虑病毒的变异性和流行性，及时更新疫苗毒株，优化各亚型病毒的配比，有效地提高口蹄疫疫苗的免疫效果，最大限度地降低口蹄疫的发生概率。

疫苗免疫一直是我国控制重大动物疫病发生、流行的一个关键措施。当前，我国对猪群实施强制免疫的重大动物疫病有猪瘟、猪口蹄疫、高致病性猪蓝耳病。目前，国内学者对这三种疫苗免疫相互干扰的研究较多，但研究结果差别很大。

本研究发现，哈密市某些乡镇猪的免疫程序不适合该地区猪场，还有待于进一步优化。从流行病学角度来看，绵羊是口蹄疫的“贮存器”，猪是“扩大器”，牛是“指示器”，由此可见，猪对于口蹄疫的传播起着相当重要的作用。哈密市50%以上的屠宰生猪是由外省、外市调入，并且屠宰生猪的口蹄疫抗体水平较低，哈密市生猪输入性口蹄疫疫病的风险较高。相关部门应加大对生猪流通环节的监管力度，有效降低猪口蹄疫的传入风险。