2017—2021 年湖南省规模养禽场高致病性禽流感免疫抗体监测

邓国强，范仲鑫，唐小明，刘道新

（湖南省动物疫病预防控制中心，湖南长沙 410027）

流感是由A 型流感病毒引起的，可导致多种禽类、鸟类、人类感染的一种重要传染病[1]。高致病性禽流感主要由H5和H7亚型禽流感病毒引起，其发病率和死亡率都很高（50%～89%），在有些鸡群中可达100%。世界动物卫生组织将其列为必须报告的动物疫病，我国将其列为一类动物疫病。用禽流感疫苗对家禽进行免疫预防是防控该病的有效措施。为了解湖南省规模养禽场高致病性禽流感免疫抗体情况，评估免疫效果，2017—2021 年，分别于每年春季（5 月）和秋季（11 月）在湖南省14 个市州随机抽取规模养禽场采集血清样品，进行高致病性禽流感免疫抗体检测，并对检测数据进行统计和分析，以期为高致病性禽流感防控提供数据支撑。

1 材料和方法

1.1 样品来源

2017—2021 年，每年5 月和11 月分别从湖南省14 市州各随机抽取1～2 个县，共抽取26 个县（不重复抽样）进行采样。每县随机抽查3 个规模禽场（2 个养鸡场、1 个水禽场，无规模水禽场的用规模鸡场代替），每个规模鸡场随机采集血清15 份，每个规模水禽场随机采集血清20 份，每个县共采集血清样本50 份（鸡血清30 份、水禽血清20 份）。2017—2021 年，共抽查养禽场785 个、血清样品12 957 份，样品采集详情见表1。

表1 样品情况统计

1.2 试验方法

采用《高致病性禽流感诊断技术》（GB/T 18936—2020）规定的血凝（HA）和血凝抑制试验（HI）方法，检测H5 和H7 亚型禽流感抗体[2]。HI 抗体效价不低于1:16（4log2），判定为免疫抗体个体合格；场免疫个体总合格率不低于70%，判定为免疫抗体场合格。

采用卡方（χ2）检验分析H5 和H7 亚型高致病性禽流感免疫抗体个体合格率和场合格率在不同禽种、不同季节和不同地区间的差异。

采用公式（1）（2）比较H5 和H7 亚型高致病性禽流感免疫抗体个体合格率和场合格率的依存关系，建立个体免疫合格率为X，场免疫合格率为Y的线性回归方程，并用F检验方法验证两者的线性回归关系[3]。

式中：a代表截距或常数项，b代表回归系数，n代表调查对象数。

2 结果与分析

2.1 H5 亚型禽流感免疫抗体

2.1.1 个体合格率

2.1.1.1 不同禽种 2017—2021 年，湖南省家禽H5 亚型禽流感免疫抗体个体合格率为93.75%。其中，2018 年春季合格率最高，为99.22%，2019年秋季最低，为87.52%；鸡、鸭、鹅样本的H5亚型禽流感免疫抗体个体合格率分别为95.90%、85.95%、76.70%（表2）。随着时间变化，鸡的个体合格率波动不大，鹅波动最大（图1）。经查卡方分布临界值表，按α=0.016 6 检验水准，比较不同禽种间H5 亚型禽流感免疫抗体个体合格率差异，得到自由度V=1 的临界值为5.02～6.63，经差值法得到χ20.0166约等于5.97。任意2 种禽种间的P值比较，结果（表3）显示，H5 亚型禽流感免疫抗体个体合格率在鸡中最高，其次是鸭，鹅最低，不同禽种间H5 亚型禽流感免疫抗体个体合格率差异具有统计学意义（P＜0.01）。

表3 不同禽种间H5 亚型禽流感免疫抗体个体合格率比较

表2 H5 亚型免疫抗体个体合格率情况

2.1.1.2 不同采样季节 春季H5 亚型禽流感免疫抗体个体合格率为93.27%，秋季为94.22%。比较春、秋两季免疫抗体个体合格率，经卡方检验，χ2=5.034，以V=1 查卡方分布临界值表，按α=0.05 的水准，P＜0.05。结果显示：秋季H5亚型禽流感免疫抗体个体合格率明显高于春季，春、秋两季H5 亚型禽流感免疫抗体个体合格率存在显著差异。

2.1.1.3 不同采样地区 14 个市州H5 亚型禽流感免疫抗体个体合格率由低到高分别是怀化（89.40%）、湘西州（89.85%）、湘潭（90.51%）、益阳（90.57%）、株洲（91.04%）、永州（92.09%）、衡阳（92.29%）、郴州（93.03%）、娄底（94.47%）、邵阳（96.87%）、岳阳（97.02%）、长沙（97.90%）、张家界（98.00%）、常德（98.89%）（图2）。经卡方检验，P＜0.05，说明H5 亚型禽流感免疫抗体个体合格率在不同地区间存在显著差异。

2.1.2 场合格率

2.1.2.1 不同禽种 2017—2021 年，湖南省H5亚型禽流感免疫抗体场合格率为93.25%。其中，2018 年春季合格率最高，为100%，2019 年秋季最低，为80.77%；鸡、鸭、鹅样本的H5 亚型禽流感免疫抗体场合格率分别为95.41%、82.61%、81.25%（表4）。随着时间推移，场合格率的变化规律与个体合格率的变化规律基本一致（图3）。H5 亚型禽流感免疫抗体场合格率在鸡中最高，其次是鸭，鹅最低。经卡方检验，不同禽种间H5 亚型禽流感免疫抗体场合格率差异具有统计学意义（P＜0.01）。

表4 H5 亚型免疫抗体场合格率情况

2.1.2.2 不同采样季节 春季H5 亚型禽流感免疫抗体场合格率为93.32%，秋季为93.18%。比较春、秋两季H5 亚型禽流感免疫抗体场合格率，经卡方检验，按α=0.05 的水准，P＞0.05，说明春、秋两季H5亚型禽流感免疫抗体场合格率差异不显著。

2.1.3 个体合格率与场合格率依存关系 利用1.2中的公式（1）（2）建立以H5 亚型禽流感个体免疫合格率为X，场合格率为Y的回归方程：Y=1.224 1X-0.216 5。经卡方检验，P＞0.01，说明H5 亚型禽流感免疫抗体个体合格率与场合格率之间不存在线性回归关系。

2.2 H7 亚型禽流感免疫抗体

2.2.1 个体合格率

2.2.1.1 不同禽种 2017—2021 年，湖南省家禽H7 亚型禽流感免疫抗体个体合格率为80.62%。其中，2021 年秋季合格率最高，为98.15%，2017年春季最低，为5.93%；鸡、鸭、鹅样本的H7 亚型禽流感免疫抗体个体合格率分别为82.45%、78.26%、45.45%（表5）。随着时间推移，鸡、鸭、鹅样的个体合格率整体呈升高趋势（图4）。H7 亚型禽流感免疫抗体个体合格率在鸡中最高，其次是鸭，鹅最低。经卡方检验，不同禽种间H7亚型禽流感免疫抗体个体合格率差异具有统计学意义（P＜0.01）。

表5 H7 亚型免疫抗体个体合格率情况

2.2.1.2 不同采样季节 春季H7 亚型禽流感免疫抗体个体合格率为70.91%，秋季为90.34%。比较春、秋两季免疫抗体个体合格率，经卡方检验，P＜0.05，说明免疫抗体合格率秋季明显高于春季。

2.2.1.3 不同采样地区 14 个市州H7 亚型禽流感免疫抗体个体合格率由低到高分别是湘潭（71.72%）、益阳（73.02%）、湘西州（75.01%）、怀化（75.42%）、株洲（75.48%）、永州（75.84%）、岳阳（79.82%）、衡阳（84.59%）、郴州（85.17%）、张家界（85.50%）、娄底（85.83%）、长沙（86.50%）、邵阳（86.67%）、常德（87.83%）（图5）。经卡方检验，P＜0.05，说明H7 亚型禽流感免疫抗体个体合格率在不同地区间存在显著差异，其差异情况与H5 亚型相似。

2.2.2 场合格率

2.2.2.1 不同禽种 2017—2021 年，湖南省H7亚型禽流感免疫抗体场合格率为79.49%。其中，2021 年秋季合格率最高，为97.50%，2017 年春季最低，为1.28%；鸡、鸭、鹅样本的H7 亚型禽流感免疫抗体场合格率分别为81.19%、75.65%、37.50%（表6）。随时间变化，H7 亚型禽流感免疫抗体场合格率有整体升高趋势（图6）。H7 亚型禽流感免疫抗体场合格率在鸡中最高，其次是鸭，鹅最低。经卡方检验，不同禽种间H7 亚型禽流感免疫抗体场合格率差异具有统计学意义（P＜0.01）。

2.2.2.2 不同采样季节 春季H7 亚型禽流感免疫抗体场合格率为68.38%，秋季为90.40%。比较春、秋两季H7 亚型禽流感免疫抗体场合格率，经卡方检验，P＜0.05，说明春、秋两季H7 亚型禽流感免疫抗体场合格率差异显著。

2.2.3 个体合格率与场合格率依存关系 利用1.2中的公式（1）（2）建立以H7 亚型禽流感个体免疫合格率为X，场合格率为Y的回归方程：Y=1.038 7X-0.041 9。用F检验验证回归系数，P＜0.01，说明H7 亚型禽流感免疫抗体个体合格率与场合格率之间存在线性回归关系。R2=0.99，说明99%H7 亚型禽流感场合格率可以由个体合格率解释。

3 讨论

禽流感免疫抗体个体合格率在鸡中最高，其次是鸭，鹅最低，与石芳等[4]研究结果一致。不同禽群间高致病性禽流感免疫抗体个体合格率差异大，可能是因为与接受相同疫苗免疫的鸡相比，水禽的抗体滴度更低，维持时间短，抗体水平下降速度更快[5]。秋季禽流感免疫抗体个体合格率高于春季，可能与湖南省2017 年春季有些养禽场设有免疫H7 亚型禽流感疫苗，拉低了春季的平均合格率有关；且有些抽样场在春季免疫1 次，秋季未出栏时实行再次免疫，加强免疫也提高了禽流感免疫抗体合格率。

湖南省规模养禽场H5 亚型禽流感免疫抗体个体合格率和场合格率相对较高，常年比较稳定，H7 亚型禽流感免疫抗体个体合格率和场合格率呈整体上升趋势，与湖南省对高致病性禽流感采取强制免疫有关，且H5 亚型禽流感疫苗比H7 亚型使用时间更早，所以抗体水平表现更加稳定。不管是H5 亚型禽流感免疫抗体还是H7 亚型免疫抗体，在不同地区、不同场群间存在较大差异的原因：一是有些地区的养禽场主对高致病性禽流感的防疫意识不强，认为所养家禽存栏时间短，出栏快，不会发生高致病性禽流感，从而放弃了免疫；二是有些地区对禽流感疫苗的运送、保存管理不到位，造成疫苗失效；三是个别县（区）使用了不同厂家生产的针对不同毒株的禽流感疫苗，且存在去年未使用完的疫苗，在今年已换新的情况下，仍继续使用的现象。因此，各地职能部门需要加大宣传力度，提高养禽场主对高致病性禽流感防控的认识，加强对禽流感疫苗运送、保存的管理，强化冷链措施，选择合适的疫苗，并进一步加强对高致病性禽流感免疫抗体的监测。

H5 亚型禽流感免疫个体合格率与场合格率之间不存在线性回归关系，可能与H5 亚型禽流感免疫抗体合格率近年来波动不明显，并且抽样场数、每场抽样数量偏少，导致X离均差平方和（Lxx）小，从而F值偏小有关。这提示在免疫抗体比较稳定时，仍要做好免疫抗体监测和评估工作，增加抽样场数和每场抽样数量，为以后高致病性禽流感免疫抗体监测和效果评估提供参考。H7 亚型禽流感免疫抗体个体合格率与场合格率之间存在线性回归关系，因此可以利用H7 亚型禽流感免疫抗体个体合格率与场合格率的线性回归方程，估算湖南省规模养禽场H7 亚型禽流感免疫抗体场合格率情况，为湖南省防控H7 亚型禽流感提供数据支持。