静脉窦血栓患者血管内皮生长因子水平与预后的关系

温 清 刘人恺 杨春水

广东医学院附属南山医院神经内科 深圳 518052

静脉窦血栓患者血管内皮生长因子水平与预后的关系

温 清 刘人恺△杨春水

广东医学院附属南山医院神经内科 深圳 518052

目的 探讨血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）在静脉窦血栓患者中的表达水平及其与近期预后的关系。方法 采用ELISA法检测静脉窦血栓患者（84例）和健康对照人群（70例）血浆VEGF水平，随访12个月评估静脉窦血栓患者不良终点事件发生情况。结果 静脉窦血栓患者血浆VEGF水平较正常对照组明显升高［（195.15±24.62）μg/mL vs.（165.66±20.60）μg/mL（P＜0.01）］。随访结束后，高VEGF组（31例，VEGF≥200μg/mL）发生不良事件12例，低VEGF组（53例，VEGF＜200μg/mL）发生不良事件11例，Kaplan-Meier生存曲线显示2组差异有统计学意义（P ＝0.03）。另外，不良终点事件发生者（23例）血浆VEGF水平较无不良终点事件发生者（51例）明显增高（P＜0.01）。结论静脉窦血栓形成可诱导VEGF表达增强，VEGF水平升高越明显近期预后越差，可能与血管源性脑水肿有关。

静脉窦血栓；血管内皮生长因子；预后

颅内静脉窦血栓形成（cerebral venous sinus thrombosis，CVST）是一种特殊类型的脑静脉系统缺血性脑血管病，发病率占所有卒中的0.5％～1.0％［1-2］，多见于儿童及青壮年［3］。由于其病因多样性、发病机制复杂性及临床症状各异，易与其他颅内疾病混淆而被漏诊和误诊［4］。静脉窦血栓如不能及时治疗，病死率可高达5％～10％，因此，早期诊断和规范化治疗可显著降低并发症和后遗症的发生，改善患者预后。近年来，多项研究提示血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）可导致血管源性脑水肿［5］，而静脉窦血栓形成又与静脉性缺血、脑水肿及静脉高压相关，故本实验的研究目的是观察静脉窦血栓患者血浆VEGF水平变化，并探讨其与近期预后的关系。

1 对象与方法

1.1 研究对象 选取2010-01—2013-01深圳南山医院和中南大学湘雅医院就诊并确诊为CVST患者84例，男48例，女36例；年龄22～55岁，平均（34.6±11.9）岁；病程2～24 d，平均8.5d。另选取我院体检健康人群70例作为正常对照组，男40例，女30例；年龄20～60岁，平均（35.3±12.3）岁。

1.2 诊断标准 根据起病形式、诱因、既往病史、临床表现、实验室及影像学检查结果，确诊需具备磁共振（MRI）及磁共振静脉成像（MRV）、CT静脉成像（CTV）、数字减影血管造影（DSA）3项检查中至少1项支持诊断。

1.3 血浆标本采集 CVST组及正常对照组分别于清晨空腹抽取静脉血4～5mL（EDTA抗凝），以3 000r/min离心15min，微量移液器取上清，-80℃保存待测。实验过程中血标本采集经医院伦理委员会审批，所有入选研究对象均签署知情同意书。

1.4 血管内皮生长因子检测方法 血浆VEGF测定使用人ELISA试剂盒（购自北京晶美试剂公司），实验操作严格按照试剂盒说明书进行，每份标本检测2孔，取平均值。吸光度采用双波长450/570nm进行检测，根据标准曲线计算出血浆VEGF水平，敏感度为15pg/mL，批内及批间变异均＜9.5％。

1.5 预后随访 通过门诊或电话随访静脉窦血栓患者不良终点事件发生情况，包括静脉窦血栓再发、脑血管疾病、不同程度偏瘫或智力语言障碍、重残或死亡等，死亡患者记录死亡时间及原因。

1.6 统计分析 所有数据用SPSS 16.0统计学软件处理，计量资料采用均数±标准差（¯x±s）表示，2组间比较采用t检验；血浆VEGF水平与生存率关系采用Kaplan-Meier法，应用Log-Rank检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 2组血浆VEGF水平比较 CVST组血浆VEGF水平为（195.15±24.62）μg/mL，较正常对照组（165.66±20.60）μg/mL明显升高，差异具有统计学意义（P＜0.01）。见图1。

图1 2组血浆VEGF水平比较

2.2 静脉窦血栓患者VEGF水平与近期预后关系 根据VEGF水平将所有患者分为高VEGF组（VEGF≥200μg/mL）31例和低VEGF组（VEGF＜200μg/mL）53例，随访12个月，平均（11.9±0.16）个月，记录患者不良事件。结果显示，高VEGF组不良事件发生12例（38.71％），低VEGF组不良事件发生11例（20.75％），差异有统计学意义（P＝0.03）。见图2。84例CVST患者共发生不良事件23例，与无不良事件发生患者（51例）相比，血浆PEDF水平明显增高［（213.45±31.31）μg/mL vs.（188.22±17.38）μg/mL，P＜0.01］。

图2 高VEGF组与低VEGF组静脉窦血拴生成曲线

3 讨论

静脉窦血栓的发病机制与静脉血流高凝状态、淤滞、血管壁损伤及血管内血栓物质沉积有关［6］。静脉窦血栓形成后，静脉阻塞导致局部脑组织水肿及静脉性梗死，缺血、缺氧导致细胞膜能量依赖性离子泵损害，出现细胞内水肿，静脉扩张、膨胀，通透性增高及缺血性神经损害等病理生理改变；脑灌注压和脑血流下降，又进一步导致颅内压增高、缺血、缺氧等改变，形成恶性循环。

血管内皮生长因子（VEGF）是一种特异性作用于血管内皮细胞的分泌性细胞因子，在中枢神经系统中具有促进内皮细胞增殖、转移和抑制细胞凋亡，诱导血管形成，改善血管渗透性等生物学特性［7-8］。Kimura等［9］大鼠静脉缺血模型观察显示，静脉血栓形成急性期VEGF表达增高主要与血管源性水肿有关。国内亦有研究显示CVST急性期VEGF无论在蛋白水平还是mRNA水平均有显著表达［10］，其病理机制可能是由于脑缺血缺氧时，刺激局部组织释放VEGF，VEGF作用于血管内皮细胞，破坏内皮细胞间紧密连接结构，增加血管通透性，导致病变组织微血管结构破坏至血浆外渗，加重脑水肿形成。

本实验首次在人群中研究VEGF水平与CVST的相关性，结果显示，CVST患者血浆VEGF水平较正常对照人群明显升高，差异具有统计学意义（P＜0.01），与上述实验报道及病理机制一致。此外，我们进一步对所有入选CVST患者进行随访观察，结果发现急性期VEGF水平越高，近期预后越差（P＝0.03），表明VEGF有可能成为预测CVST患者脑缺血程度和判断预后的一个外周血指标。

综上所述，CVST急性期血浆VEGF水平升高可能与脑细胞缺血、缺氧所致脑水肿有关，VEGF水平变化对判断病情轻重及预后有一定指导意义。然而，由于本研究样本量较小，血样本收集及随访时间有限，可能影响结果的论证能力，故有待于进行大样本随机对照的多中心研究。

［1］Bousser MG，Ferro JM.Cerebral venous thrombosis：an update［J］.Lancet Neurol，2007，6（2）：162-170.

［2］Saposnik G，Barinagarrementeria F，Brown RJ，et al.Diagnosis and management of cerebral venous thrombosis：a statement for healthcare professional from the American Heart Association/American Stroke Association［J］.Stroke，2011，42（4）：1 158-1 192.

［3］Piazza G.Cerebral venous thrombosis［J］.Circulation，2012，125（13）：1 704-1 709.

［4］Tanislav C，Siekmann R，Sieweke N，et al.Cerebral vein thrombosis：clinical manifestation and diagnosis［J］.BMC Neurol，2011，11：69.

［5］Cobbs CS，Chen J，Greenberg DA，et al.Vascular endothelial growth factor expression in transient cerebral ischemia in the rat［J］.Neurosci Lett，1998，249（2/3）：79-82.

［6］Jonas Kimchi T，Lee SK，Agid R，et al.Sinovenous thrombosis in children［J］.Neuriomaging Clinic N Am，2007，17（2）：239-244.

［7］Campanella C，Mottolese M，Cianciulli A，et al.Epidermal growth factor receptor gene copy number in 101advanced colorectal cancer patients treated with chemotherapy plus cetuximab［J］.J Transl Med，2010，16（8）：36-43.

［8］Vargo JA，Snelling BM，Ghareeb ER，et al.Dural venous sinus thrombosis in anaplastic astrocytoma following concurrent temozolomide and focal brain radiotherapy plus bevacizumab［J］.J Neurooncol，2011，104（2）：595-598.

［9］Kimura R，Nakase H，Sakaki T，et al.Vasogenic edema and VEGF expression in a rat two-vein occlusion model［J］.Acta Neurochir Suppl，2003，86：213-217.

［10］闫文浩，吴军.大鼠静脉窦血栓形成后VEGF和VEGF mRNA的表达及意义［J］.中风与神经疾病杂志，2012，29（3）：248-251 .

（收稿2014-05-24）

The relationship between plasma levels of vascular endothelial growth factor and prognosis in patients with cerebral venous sinus thrombosis

Wen Qing，Liu Renkai，Yang Chunshui
Department of Neurology，the Affiliated Nanshan Hospital of Guangdong Medical College，Shenzhen518052，China

Objective To investigate the relationship between plasma levels of vascular endothelial growth factor（VEGF）and prognosis in patients with cerebral venous sinus thrombosis（CVST）.Methods The plasma VEGF levels of 84patients with CVST and 70healthy people were detected with ELISA，and then the short-term major adverse events（MAE）of patients were observed after followed up for 12months.Results The plasma VEFG level of patients with CVST was higher than that of control group［（195.15±24.62）μg/mL vs.（165.66±20.60）μg/mL］.The occurrence rate of high VEGF group was higher than that of lower VEGF group.Conclusion Cerebral venous sinus thrombosis can induce the enhanced expression of VEGF，and the more the VEGF expression is，the worse the prognosis is.

Venous sinus thrombosis；Vascular endothelial growth factor；Prognosis

R743.32

A

1673-5110（2015）04-0041-02

△通讯作者：刘人恺，E-mail：kay678＠139.com