儿童神经元特异性烯醇化酶测定标本影响因素的分析

葛丽丽　杨俊梅　李进香

【摘要】 目的 探讨神经元特异性烯醇化酶（NSE）测定标本影响因素。方法 采用全自动电化学发光法， 取50例健康体质儿童的血样6 ml进行研究， 分成六组， 每组1 ml放于监测试管中， 按顺序进行编号， 1、2、3、4号试管在室温25℃的环境中分别放置30 min、1 h、3 h、5 h后分离血清， 测定NSE水平， 5号试管在室温下放置30 min后离心， 6号试管放置于-20℃的冰箱中24 h后离心， 测定血清中的NSE水平。结果 血清标本放置3 h组和5 h组与30 min组NSE水平比较， 差异具有统计学意义（P<0.05）， 放置1 h组与30 min组NSE水平比较， 差异无统计学意义（P>0.05）， 未冰冻30 min组与冰冻组NSE水平比较差异无统计学意义（P>0.05）。结论 血清中NSE的含量与标本放置时间长短有关， 与是否经过冰冻处理无关。

【关键词】 神经元特异性烯醇化酶；标本；影响因素

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2016.02.023

神经元特异性烯醇化酶（NSE）是临床上很有价值的分子学标记物[1， 2]。一方面NSE可以作为肺癌和儿童神经母细胞瘤的标记物， 用于肺小细胞癌和非小细胞癌的鉴别诊断， 另一方面NSE活性改变同神经损伤所致的许多神经性疾病关系密切。由于NSE可以同时存在红细胞和血小板中， 所以在NSE的测定中， 应避免溶血， 血液标本放置时间太长， 血液中血细胞会进行一定的代谢活动， 会导致血清中的成分发生变化， 影响实验结果[3]。本文着重探讨不同放置时间对血液中NSE的影响情况， 以及放置条件冰冻与未冰冻对NSE含量的影响， 现报告如下。

1 资料与方法

1. 1 一般资料 随机选取2013年6月～2014年6月本院体检50例体质健康儿童， 年龄5～15岁的血样6 ml进行研究， 分成六组， 每组1 ml放于监测试管中， 按顺序进行编号， 1号试管在室温25℃下放置30 min后离心、2号试管1 h后离心、3号试管3 h后离心、4号试管5 h后离心， 5号试管在室温下放置30 min后离心， 6号试管放置于-20℃的冰箱中24 h后离心。观测血清中NSE的含量情况。

1. 2 方法 按Elscsys全制动电化学发光仪说明书进行严格、规范的操作， 采用双抗体夹心法检测血清中的NSE含量， 及用生物素化的抗单克隆抗体和用钌记的抗单克隆抗体与标本中的NSE结合形成夹心复合物， 通过电化学仪进行测定。

1. 3 统计学方法 采用SPSS18.0统计学软件对研究数据进行统计分析。计量资料以均数 ± 标准差（ x-±s）表示， 采用t检验。P<0.05表示差异具有统计学意义。

2 结果

血清标本放置3 h组和5 h组与30 min组NSE比较， 差异具有统计学意义（P<0.05）， 放置1 h组与30 min组NSE比较， 差异无统计学意义（P>0.05）， 未冰冻30 min组与冰冻组NSE比较差异无统计学意义（P>0.05）。见表1。

3 讨论

NSE是参与糖酵解途径的烯醇化酶中的一种， 存在于神经组织和神经内分泌组织中[4， 5]。由于NSE可以同时存在红细胞和血小板中， 所以在NSE的测定中， 应避免溶血， 血液标本放置时间太长。血液中血细胞会进行一定的代谢活动， 会导致血清中的成分发生变化[6]。在本实验中提取出来的血清， 在不同放置时间下， NSE的含量明显不同， 放置30 min组与1 h组差异不明显， 而与3 h、5 h组有明显差异， 说明NSE的含量与放置时间的长短有密切的关系， 进而说明血液标本在久置未及时分离的情况下， 会导致血液中血小板及红细胞内的烯醇化酶进入血清， 使血清中NSE的水平上升， 就容易造成误诊。在冰冻与未冰冻两种条件下血清中的对比中， NSE水平无显著差异， 说明冰冻对此酶活性无影响。

实际工作中， 在做检验实践中， 检验结果的准确性除了受到检验方法、仪器灵敏度、精密程度的影响外， 对源自标本自身的影响也是一个不容忽视的因素。尤其是病房血液标本在采集后往往不能立即送到检测中心而导致血清放置时间过长， 就会导致NSE的含量在测定结果中偏高[7， 8]。

综上所述， 血清中的NSE含量与放置时间有关。随着放置时间的增加而有明显的上升趋势。因此临床医师在检测血样标本， 应尽快从病理区送到实验室对血样立即离心处理， 这样就可以缩短标本的放置时间， 减少了细胞的破坏， 以便提高检测的准确性与可靠性。

参考文献

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[2] 姜艳红， 刘冰， 吕晓娴， 等.电化学发光法检测神经元特异性烯醇化酶影响因素的分析.现代肿瘤医学， 2012， 20（9）：1944-1945.

[3] 仇彩霞， 江崇才， 王盛楠， 等.影响神经元特异性烯醇化酶检测的新因素.青岛医药卫生， 2013， 45（1）：19-21.

[4] 鄂蒙， 王淑娥， 耿岩， 等.丙烯酰胺接触工人血清神经元特异性烯醇化酶活力及影响因素.环境与健康杂志， 2013， 30（5）： 414-416.

[5] 佟素香， 王小芳， 曾轶， 等.神经元特异性烯醇化酶测定影响因素的研究及在肺癌检测中的应用.四川医学， 2005， 26（12）： 1400-1402.

[6] 邵美娟， 曾义锋， 倪莉， 等.神经元特异性烯醇化酶测定影响因素的探讨.江西医学检验， 2004， 22（6）：531-532.

[7] 廖琳， 姬芳， 邵宏斌， 等.神经元特异性烯醇化酶测定标本影响因素的研究.中原医刊， 2007， 34（9）：封4.

[8] 于传亭， 鹿理友， 由红蕾， 等. NSE测定影响因素探讨.齐鲁医学检验， 2005， 16（2）：61.

[收稿日期：2015-08-06]