混合生物物证DNA检验鉴定2例

马晓颖 伊 鹏 穆勇民

1.山东省临沂市公安局罗庄分局刑警大队，山东 临沂 276017；2.山东省临沂市公安局刑科所，山东 临沂 276000



混合生物物证DNA检验鉴定2例

马晓颖1伊 鹏2穆勇民1

1.山东省临沂市公安局罗庄分局刑警大队，山东 临沂 276017；2.山东省临沂市公安局刑科所，山东 临沂 276000

随着社会经济发展、科学技术手段的发达，越来越多的刑事案件加入对混合物物证中DNA检验定检的使用。医务人员通过受害人身上可以混合物物证的提取，通过专业的技术手段进行深入，主要通过生物检材的提取、检验和分析三和步骤，取得物证的DNA分型，并最终确定犯罪嫌疑人。本文选取近年来发生的强奸案件，分别介绍生物物证DNA检验鉴定的案件中发挥的作用，和混合生物物证检材的处理以及应用过程中的相关注意事项，细述混合生物物证DNA检验鉴定在案件中的使用及最终结果，从技术的角度阐述其在此类案件中的重要性。

强奸案；混合生物无证；提取；检验

公安案件中，现场物证常出现两个以上个体的样本源，即混合生物物证。混合物证会出现在任何案件中，并以强奸案和碎尸案居多。通常，警务人员在案发现场会寻到可疑的皮屑或体液证物，而这类证物又往往来源于两个以上个体身上。因此，混合物物证中DNA的判定技术对于案件侦破至关重要。对混合生物物证进行DNA检测鉴定，通过生物样本的提取、检验和进一步分析，将促进案件的有效侦破，是当前此类案件中使用较广泛的技术手法之一。

一、案件资料

(一)案件

2014年5月8日，XX城区派出所接到报案，一名环卫工人在西郊的一片废弃厂房发现一名死尸。公安人员到达案发现场发现，这是一名女性尸体，年龄在20-25岁之间，尸体衣物凌乱，被遗弃的背包中未发现其他重要资料。经鉴定，死者死因为颈部强力扼压致使的机械性窒息死亡。现场有死者与嫌疑人搏斗的痕迹，且现场很像强奸杀人案。法医的进一步检测发现，死者阴道外侧有残留精液，且指甲内检测出不属于死者的皮屑物和血迹。死者指甲内提取的生物物证需要进行多类型体液的确证试验，因为血迹与皮屑尚不能确定属于个体。皮屑物与血液经进一步检测，结果显示部分属于死者本人，部分与精液和血液属于同一男性。检验结果确定后，公安人员立即进行下一步嫌疑人搜查活动，并于案发后两天抓捕犯罪嫌疑人。在对死者身上混合物物证的分析与嫌疑人进行对比，通过相同的DNA分型最终确定罪犯。

(二)DNA检验

两起案件均出现混合物物证：一是死者指甲内部残留皮屑物和血迹，且阴道提取出男性精液。DNA的提取主要采用棉签类易于沾取或附着证物且不会致使其遭到破坏的工具进行。在证物提取过将其放置在密封的材料袋或材料盒中，并禁止不关人等的随意触碰。证物带至研究所后小心取出，将棉签沾取物证的部分棉纤维取出，加入200μL的骨骼孵育液、15μL的蛋白酶K在56度的环境下进行孵育。随后，用硅珠法进行DNA的提取，提取模板浓缩成10μl的DNA溶液。接下来，扩增和电泳检测方面，国内常规方式是通过Identifile试剂盒，来扩增各提取模板的DNA。随后，用3130基因分析仪进行扩增物的检测。当扩增物的检测结果出现时，将检测结果放置到GeneMspperID V3.2软件中，进行分型结果的比对。

二、讨论

上述案件中，提取的死者指甲内混合血液、皮脂屑这类生物检材，不能简单将其是为死者个体，相关检案人员必须对存在可以性的载体进行取样，尽可能将死者的贴身衣服、指甲附着皮屑、用过的卫生纸团等容易沾染罪犯精斑或皮脂的载体进行逐一排查，并进行多类型体液确证试验。另外，DNA工作者在样本提取前应根据实际情况设计实验方案。强奸案件中，当嫌疑人射精量偏少或本身为少精患者时，就会出现女子上皮细胞远远超过男子精子细胞的状态，此时应采用差异裂解法且两步均涂片镜检，再经精子数量与上皮细胞数量的对比，来选取合适的检材用量、酶用量以及消化时间和需要洗涤的次数。其中，热循环参数和模板DNA量等因素都将影响PCR反映的结果。另外，混合生物物证的结果扩增还应重视每一个个体DNA在检材中的实际比例，当混合DNA分型男性成分偏多时应进一步稀释、浓缩DNA提取液，及成梯度扩增等方法。

混合DNA结果分析：第一，仔细观察案发现场，并积极询问受害者或知情者，通过现场侦查和信息提示，推断案件中作案人数；第二，混合DNA的提取时应尽可能纯洁，排除污染物。检测时更要注意污染物、牵涉锋、Stutter锋、非特异性扩增或染色体畸变等特殊情况的发生。第三，判断样本是否为混合物物证，通过等位基因的基因数目较多的基因座来判断，原理是个体间的重复率偏小。一般来说，两个体混合斑图谱中，Amelegen基因座中X、Y等位基因锋面积表现出不同的平衡关系和峰值高低，能够提示样本的性别成分。另外，单一男性DNA分型结果与多部位提取、梯度扩增获取的混合DNA分型对比分析，能够进行另一DNA分型结果的获取。

当前，越来越多的刑事案件加入对混合物物证中DNA检验定检的使用。要求相关法医人员在受害者身上，仔细寻找相关易于检测且易于解释单一检材的样本。因此，混合物物证DNA检验鉴定的发展任重而道远，需要相关人员进一步提高认识并加以重视。硅珠法提取DNA，能够有效地去除PCR，从而得到更加纯净的样本信息。纯净样本后通过Microcon100浓缩提高模板的质量水平，确保擦拭物的混合物物证获取清晰的DNA分型谱带。基础研究上，医务人员应进行深入探析，不断探索新型区分不同个体的排他性片段，以研发更新颖的选择性提取试剂盒。当前，我国进行单细胞DNA检测所使用的技术，在之前的面别混合检材领域取得不小的进步，并即将在不远的将来实现轻松进行混合生物物证DNA检验的鉴定。

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[2]谷建立，杨军，曹和招.碎尸案中混合生物物证的DNA检验1例[J].中国法医学杂志，2013，01：86-87.

[3]张璐.微量DNA检验技术及展望[J].警察技术，2012，02：4-6.

[4]申琴，杨红旗，袁朝晖，胡国瑜.DNA鉴定技术在法医物证学中的现状和展望[J].生物技术世界，2015，10：252-253.

D

A

马晓颖(1974-)，女，回族，山东青州人，四川大学华西医学院本科，山东省临沂市公安局罗庄分局刑警大队，法医师，研究方向：物证检验；伊鹏，男，汉族，山东蒙阴人，山东省临沂市公安局刑科所；穆勇民，男，汉族，山东德州人，山东省临沂市公安局罗庄分局刑警大队。