鼻腔喷雾给药防治猪萎缩性鼻炎的效果研究

李虹瑾，李国江，沙万里，牛 伟，张秀峰，姜 成

（1.吉林农业大学，长春 130033；2.吉林农业科技学院动物科技学院/预防兽医学吉林省重点实验室，吉林 132101）

鼻腔喷雾给药防治猪萎缩性鼻炎的效果研究

李虹瑾1，李国江2※，沙万里2，牛 伟2，张秀峰2，姜 成2

（1.吉林农业大学，长春 130033；2.吉林农业科技学院动物科技学院/预防兽医学吉林省重点实验室，吉林 132101）

从猪萎缩性鼻炎的病猪鼻腔内分离和纯化病原菌，通过药敏试验筛选出对猪萎缩性鼻炎病原菌敏感的药物，并通过鼻腔喷雾给药、肌肉注射给药和拌料给药的方法防治猪萎缩性鼻炎。结果表明：通过鼻腔喷雾给药的猪平均日增重显著高于拌料组和肌肉注射组（P＜0.01）。说明鼻腔给药，药物可直接作用于患部，疗效迅速，方便快捷，是防治猪萎缩性鼻炎的最佳给药途径。

猪萎缩性鼻炎；肌肉注射；拌料给药；鼻腔喷雾给药；防治

猪萎缩性鼻炎是由支气管败血波氏杆菌和产毒素巴氏杆菌引起的慢性接触性呼吸道传染病。它以鼻炎、鼻中隔扭曲、鼻甲骨萎缩和病猪生长缓慢为特征，临床表现为喷嚏、流鼻涕、鼻塞、鼻出血、颜面部的变形或歪斜。哺乳仔猪感染本病后不但导致严重的鼻甲骨损害和萎缩性病变，还能引起全身钙代谢障碍，导致仔猪生长发育缓慢，饲料利用率降低，料肉比升高[1]。同时还增加感染其它呼吸道疾病的可能性，引起呼吸道疾病的爆发流行，给养猪业造成巨大的经济损失。

猪萎缩性鼻炎的传染源主要是患病猪和带菌猪，传播方式主要通过空气传播。萎缩性鼻炎在猪群中以水平方式传播，一般呈地方性流行或散发，任何年龄的猪都可以感染本病，但以仔猪和保育猪最易感。诱发本病发生的因素很多，如圈舍通风不良，阴冷潮湿，空气污浊，饲养密度过大，饲料中的营养缺乏，特别是饲料中的蛋白质、维生素（主要是VA和VD）、微量元素（特别是钙和磷）缺乏，容易诱导本病的发生。

对猪萎缩性鼻炎的防控目前主要通过加强饲养管理、疫苗接种和药物防治三方面。加强饲养管理主要通过制定科学合理的饲养管理措施，提供全价的营养供给、舒适的环境卫生条件等，从而使猪萎缩性鼻炎得到确实而有效的控制[2-3]；疫苗接种主要是根据猪场的实际情况选择一种合适的疫苗进行接种；药物防治主要通过药敏试验选出一种最敏感的药物，制定合理的抗生素防治方案。本试验主要进行鼻腔喷雾给药防治猪萎缩性鼻炎的效果研究。

1 材料及方法

1.1 试验材料

1.1.1 试验动物 随机抽取英白品种30头健康无萎缩性鼻炎症状的英白哺乳仔猪和40头有泪斑的英白保育猪作试验猪，均由吉林农业科技学院畜牧场提供。

1.1.2 培养基及试剂 本试验采用的培养基为实验室自制。新生牛血清（北京燕生政博生物科技有限责任公司，批号（Lot.No）100419）；细菌微量生化反应管（杭州天和微生物试剂有限公司，批号为120213）。

1.1.3 试验药品 痢特灵（批号为20110802），磺胺嘧啶钠（批号为110604），硫酸庆大霉素注射液（批号为20111012），硫酸庆大霉素（批号为2011050101），土霉素原粉（批号为110708），注射用硫酸链霉素（批号为20120103），卡那霉素（批号为20110819），诺氟沙星（批号为20111011），四环素（批号为20111102）。

1.2 试验方法

1.2.1 药敏纸片的制作 按照纸片法药敏试验抑菌环判断标准中的药物浓度来制作土霉素、磺胺嘧啶钠、庆大霉素、卡那霉素等7种药物的药敏纸片，然后置于干燥箱内37℃低温干燥，干燥后密封置4℃冰箱保存备用。

1.2.2 病料提取 将猪保定后，用75%的酒精棉将猪的鼻镜彻底消毒。用无菌棉签插入病猪的两侧鼻腔深部采取鼻腔分泌物，然后立即将鼻拭子装入内有改良马丁肉汤培养基的小试管中，送往实验室做细菌分离鉴定。

1.2.3 细菌分离鉴定 （1）病原菌分离培养：将含有病料的改良马丁肉汤培养基置于震荡恒温箱中37℃震荡培养24h后，在无菌的条件下用铂金耳取上述培养液将其划线接种在血琼脂培养基上[4]，37℃恒温箱中培养24h。然后分别挑取可疑菌落接种在血清培养基、麦康凯培养基和痢特灵麦康凯培养基进行纯培养[5]。一种细菌在血琼脂培养基上培养24h后，生长成淡灰白色、边缘整齐、表面光滑、闪光的露珠样的小菌落。在麦康凯培养基上不生长。另一种细菌在血琼脂培养基上培养24h后，出现溶血现象，在血清培养基上生长成圆形隆起，光滑闪光的奶样的小菌落，在麦康凯培养基上菌落无色或微红，周围有红圈，在含有痢特灵的麦康凯培养基上菌落呈茶色，中心较厚，呈茶黄色[6-7]。挑取两种疑似菌落，分别做美兰染色和革兰氏染色。镜下观察，美兰染色二者均为两极浓染的小杆菌，革兰氏染色二者均是呈两极浓染的革兰氏阴性的小杆菌。（2）生化试验：将以上纯化的病原菌分别接种于细菌微量反应管中[8-9]，进行生化鉴别试验。结果显示:一种细菌能分解葡萄糖、甘露醇、蔗糖，产酸不产气，不能分解乳糖和麦芽糖，触酶、氧化酶、鸟氨酸脱羧酶、吲哚为阳性，尿素酶、甲基红、V-P为阴性，鉴定为巴氏杆菌；另一种细菌不能分解碳水化合物，触酶、尿素酶、谷氨酸脱羧酶、硝酸盐还原、柠檬酸盐利用为阳性，氧化酶为弱阳性，吲哚为阴性，鉴定为支气管败血波氏杆菌。见表1、表2。

表1 细菌生化试验鉴定结果

表2 细菌生化试验鉴定结果

1.2.4 药敏试验 选出7种常用于治疗猪萎缩性鼻炎的药物[10]，分别是庆大霉素、卡那霉素、四环素、土霉素、磺胺嘧啶钠、诺氟沙星、链霉素，通过药敏试验选出一种最敏感的药物。见表3。

表3 巴氏杆菌和支气管败血波氏杆菌药敏试验结果

由表3可知，该场猪萎缩性鼻炎的病原菌对庆大霉素最为敏感，所以，选用庆大霉素作为该场防治猪萎缩性鼻炎的药物。

1.2.5 预防试验 （1）试验动物分组：随机选取7日龄、体重接近、无猪萎缩性鼻炎症状的英白仔猪30头，按照仔猪的耳号顺次平均分为三组，每组10头。Ⅰ组、Ⅱ组为试验组，Ⅲ组为空白对照组。（2）给药方法：应用筛选出的最敏感药物庆大霉素进行预防试验，Ⅰ组通过鼻腔喷雾给药，首先将猪的头部固定，鼻镜消毒后将100mL喷雾器的喷头对准仔猪的鼻孔，稍稍与鼻中隔呈一定角度喷雾给药，每侧鼻孔喷2次（喷雾器每喷6次约为1mL，20mg）。喷药后将仔猪的头稍稍抬高约1min，连用7d。Ⅱ组肌肉注射给药，一次剂量10mg/kg体重，每天2次，连续用药7d。Ⅲ组不给药，作对照组。（3）观测指标：①试验期间观察试验仔猪有无泪斑，并作好记录。②仔猪试验前后分别称体重，同时观测各组饲料消耗量，并作好记录。

1.2.6 治疗试验 （1）试验分组：选取30日龄，体重接近，有泪斑的英白仔猪40头。随机分成四组，每组10头，Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ组为试验组，Ⅶ组为对照组，分栏饲养。（2）给药方法：应用筛选出的最敏感药物庆大霉素进行治疗试验，Ⅳ组通过鼻腔喷雾给药，方法与Ⅰ组相同，给药剂量增至每侧鼻孔喷4次。Ⅴ组通过肌肉注射给药，方法与Ⅱ组相同，给药剂量增至一次剂量20mg/kg体重，每天2次，连续用药7d。Ⅵ组通过拌料给药，按0.05%的比例添加。Ⅶ组不给药，作对照组。（3）观测指标：仔猪试验前、后分别称体重，同时观测各组饲料消耗量，并做好记录。

2 结果

2.1 预防试验结果

7d后观察到鼻腔喷雾给药组有1头仔猪发现有泪斑。肌肉注射组有3头仔猪发现有泪斑，对照组有6头仔猪发现有泪斑。各组饲料消耗无显著差异（P＞0.05）。预防试验各组仔猪饲料消耗无显著差异，增重结果见表4。

表4 7～28日龄仔猪增重情况

2.2 治疗试验结果

治疗试验各组仔猪饲料消耗无显著差异，增重情况见表5。

表5 30～61日龄仔猪增重情况

2.3 数据分析

根据表4、表5的结果，通过方差分析，表明预防试验和治疗试验中鼻腔喷雾给药组的平均增重显著高于其他试验组（P＜0.01）。

3 讨论与分析

3.1 滥用抗菌素会产生严重的耐药现象

本研究中，对分离到的产毒素巴氏杆菌和支气管败血波氏杆菌[11-12]，用庆大霉素、卡那霉素、四环素、土霉素、磺胺嘧啶钠、诺氟沙星、链霉素等7种抗菌素进行药敏试验。结果发现土霉素、磺胺嘧啶钠、诺氟沙星、链霉素表现明显耐药。经调查得知，该猪场平时经常使用这几种抗菌素，造成了致病菌的耐药。因此，猪场要根据药敏试验有针对性地选用抗生素防治疾病。

3.2 科学的给药方法决定防治效果

试验结果表明，鼻腔喷雾给药组仔猪平均增重明显高于对照组及其他给药组（P＜0.01）。分析认为，鼻腔喷雾给药，药物直接到达病变部位发挥作用，确保了到达患部的药物浓度，药效迅速确实。而注射及拌料给药，要经过消化吸收入血液并输送至患部的过程，降低了药物的效果。

3.3 猪传染性萎缩性鼻炎是危害养猪业的“隐形”杀手

猪萎缩性鼻炎很少引起猪的死亡，但却能明显影响猪的生长发育，降低饲料的利用率，造成巨大经济损失。然而这种“隐形”的损失往往被养殖者忽视，导致经济效益下降。因此，必须加强对猪萎缩性鼻炎的防控工作。

[1]蔡宝祥.家畜传染病学（第三版）[M].北京:中国农业出版社，2001：23-25.

[2]余 腾.湖北规模化猪场猪萎缩性鼻炎流行病学调查与净化研究[D].华中农业大学硕士学位论文，2011.

[3]方 英.猪萎缩性鼻炎的诊断与污染场净化措施[D].贵州大学硕士学位论文，2008.

[4]文 明，袁翠霞，徐 景，等.猪萎缩性鼻炎的调查与防治研究[J].兽医临床，2008（2）:70-72.

[5]陆承平.兽医微生物学[M].中国农业出版社，2007:134-135.

[6]鲍 娟，李永明，周碧君，等.猪源多杀巴氏杆菌的生物学特性与ToxA基因鉴定[J].畜牧与兽医，2009，41(6):53-56.

[7]范 莉，郝玉兰，史秋梅.猪源支气管败血波氏杆菌感染症及病菌检验[J].中国畜牧兽医，2007，34(8):92-93.

[8]康立超，田 亮，张晓宇，等.新疆牦牛多杀性巴氏杆菌的分离鉴定及药物敏感实验[J].石河子大学学报，2010，28(4):436-440.

[9]詹发茂，韩庆彦.甘肃省集约化养猪场传染性萎缩性鼻炎的调查[J].中国动物检疫，2002(3):30

[10]张栋梁，尚 言，屈红丽，等.猪支气管败血波氏杆菌病的微生物学诊断与综合防治[J].畜牧兽医杂志，2008，27(5):101-102.

[11]王晓丽，王永明，龙 东，等.一例兔支气管败血波氏杆菌的分离鉴定[J].上海畜牧兽医通讯，2009（7）:32.

[12]王彩敏，李彦芬，刘 星，等.巴氏杆菌病原分离及鉴定[J].河南畜牧兽医，2006，27(11):29-30.

责任编辑：吴艳玲

Effective Research of Prevention and Treatment of Swine Atrophic Rhinitis with Nasal Spray

LI Hongjin1,LI Guojiang2,SHA Wanli2,NIU Wei2,ZHANG Xiufeng2,JIANG Cheng2
(1.Jilin Agriculture University,Changchun 130033;2.Jilin Agricultural Science and Technology University School of Animal Science and Technology/Key Lab of Preventive Veterinary Medicine in Jilin Province,Jilin 132101)

Pathogens were separated and purified from nasal cavity of the sick pigs from swine atrophic rhinitis.The methods of nasal spray,muscle injection,mixing materials with drugs were explored in this study. The results showed that average daily gain was significantly higher than others by nasal spray(P＜0.01).Nasal spray was the best method for the prevention and control of swine atrophic rhinitis.

pig atrophic rhinitis;muscle injection;mixing materials with drugs;nasal spray;prevention and treatment

S858.28

A

2016-08-13

吉林省教育厅重点项目资助（2010243）；吉林省科技厅发展计划项目（20150623004TC）

李虹瑾（1989-），男，吉林省榆树市人，吉林农业大学2016级预防兽医学硕士研究生，研究方向：预防兽医学。

※为本文通讯作者