503例尿培养阳性标本病原菌分布及耐药性分析

孔昌盛，陈 俊，邹晓艳，张 义，朱玲娜

（1.宜昌市夷陵医院检验科，湖北宜昌 443100;2.三峡大学仁和医院手足显微外科）

503例尿培养阳性标本病原菌分布及耐药性分析

孔昌盛1，陈 俊2，邹晓艳1，张 义1，朱玲娜1

（1.宜昌市夷陵医院检验科，湖北宜昌 443100;2.三峡大学仁和医院手足显微外科）

目的:分析我院尿培养阳性标本的细菌分布及耐药情况，为临床合理选用抗菌药物提供依据。方法:回顾性分析我院2013年1月-2014年12月尿培养阳性标本病原菌分布情况和耐药性。结果:共分离菌株503株，其中革兰阴性细菌377株(75.0%）、革兰阳性细菌85株(16.9%）、真菌41株(8.1%）;检出率最高的前3位病原菌依次为大肠埃希菌(62.0%）、肠球菌属(10.5%）和肺炎克雷伯菌(9.3%）。药敏结果显示大肠埃希菌对头孢噻肟、头孢曲松、喹诺酮类的耐药率超过50%;肺炎克雷伯菌对阿莫西林/克拉维酸、头孢噻肟、头孢曲松的耐药率超过42%，对呋喃妥因的耐药率超过40%;屎肠球菌对各种抗菌药物的耐药率明显高于粪肠球菌，对喹诺酮的耐药率为100%。结论:我院尿路感染病原菌种类复杂多样、耐药程度严重，应及时监测病原菌的菌群种类分布和耐药变迁，以指导临床合理、规范地使用抗菌药物。

尿培养;菌群分布;耐药性

有学者报道[1]，尿路感染在医院感染中仅次于呼吸道感染，位居第2位，占16.3%。由于反复感染与长期应用抗菌药物所导致的细菌耐药是治疗失败的主要原因之一，监测尿路感染细菌的构成和耐药性，对临床选择药物具有重要价值[2-3]。本研究回顾分析了我院2013-2014年尿培养阳性标本的细菌分布和耐药性，旨在为临床合理使用抗生素提供依据。

1 材料与方法

1.1 标本来源 按照尿培养阳性的标准，2013年1月-2014年12月从宜昌市夷陵医院患者中筛选出尿培养阳性的菌株503例(多次尿培养阳性的只纳入第一次结果）。

1.2 方法 ⑴按照《全国临床检验操作规程》（第3版）的要求进行标本采集和培养。⑵采用ATB细菌鉴定仪及其配套的板条、试剂（法国生物梅里埃公司）进行菌种鉴定。⑶采用K-B法进行药物敏感性试验，判定标准按美国临床实验室标准化协会(CLSI）2013年版的规定[4]。质控菌株为金黄色葡萄球菌ATCC29213、大肠埃希菌ATCC25922、铜绿假单胞菌ATCC27853，购自卫生部临床检验中心。⑷检测超广谱β-内酰胺酶(ESBLs):按CLSI推荐的纸片筛选法和酶抑制剂增强确证试验检测大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、产酸克雷伯菌和奇异变形杆菌中产ESBLs菌株。

2 结果

2.1 病原菌分布 503株致病菌中，革兰阴性细菌377株（75.0%）、革兰阳性细菌85株（16.9%）、真菌41株（8.1%）；大肠埃希菌中ESBLs阳性株数184株，阳性率为59.0%（184/312），肺炎克雷伯菌中ESBLs阳性株数20株，阳性率为42.6%(20/47）。见表1:

表1 503株病原菌构成比

2.2 大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、奇异变形杆菌的耐药性 未检出对碳青霉烯类药物耐药的大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和奇异变形杆菌。三种病原菌的耐药率见表2:

表2 大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、奇异变形杆菌对抗菌药物的耐药率[例(%）]

2.3 肠球菌属、链球菌属、葡萄球菌属的耐药性 14株葡萄球菌中，耐甲氧西林(MRS）菌株5株，占35.7%。肠球菌属、链球菌属、葡萄球菌属具体耐药率见表3:

表3 肠球菌属、链球菌属、葡萄球菌属对抗菌药物的耐药率[例(%）]

3 讨论

近年来，随着广谱抗菌药物、免疫抑制剂、激素及介入技术等先进医疗手段的广泛应用，尿路感染发病率日益增多[3]。本研究显示，泌尿道感染致病菌以革兰阴性细菌为主(75.0%），主要致病菌为大肠埃希菌，占62.0%，高于国内文献报道[5-6]。大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中ESBLs阳性率分别为59.0%和42.6%，低于国内文献报道[5-6]。

由于临床上对怀疑大肠埃希菌感染的尿路感染患者经验用药常偏重，而大肠埃希菌对常用抗菌药物的总体耐药性偏高，导致了更多的耐药菌及真菌感染的出现。实际上，对于非产ESBLs大肠埃希菌菌株，选择第2、3代头孢菌素亦可取得很好的疗效;对于产ESBLs大肠埃希菌菌株，由于其耐药质粒上常携带ESBLs酶、AmpC酶、喹诺酮类耐药基因、氨基糖苷类钝化酶等耐药基因，因而具备多药耐药特性，对青霉素、头孢菌素及氨曲南均呈现高度耐药，故建议首选β-内酰胺酶抑制剂、碳氢酶烯类药物[7-9]。另外，为减少ESBLs菌株的出现，应避免长期使用第2代头孢菌素或同类间频繁更换，以减少细菌对β-内酰胺类抗菌药物耐药的产生和播散。值得注意的是ESBLs种类繁多，多数酶所水解的底物具有一定专一性，并非每一种酶对各种头孢菌素类或氨曲南的水解程度完全一样。本次监测结果显示，我院大肠埃希菌对喹诺酮类的耐药率达50%以上，这可能与本院经常使用喹诺酮类药物治疗尿路感染有关，也可能由于近年来很多养殖业用喹诺酮类药物预防动物感染等有关[10]。因此，目前临床医生经验用药不要选用此类药物。

本院尿培养分离的革兰阳性球菌以肠球菌属、链球菌属和葡萄球菌属为主。肠球菌对喹诺酮类的耐药率最高达100%，屎肠球菌的耐药率显著高于粪肠球菌。由于肠球菌的耐药机制独特，已对人类健康造成了极大威胁，其具有的多重耐药性、天然耐药性以及获得性耐药等特性，给临床肠球菌感染的治疗和控制带来了极大困难，应引起足够重视[11]。链球菌属对红霉素、克林霉素、左氧氟沙星的耐药率较高，但对青霉素的耐药率只有11.1%，因此，尿路感染检出链球菌属，可优先选择青霉素作为常规药物。葡萄球菌属对大环内酯类、克林霉素耐药率较高，对青霉素的耐药率高达100%，且耐甲氧西林菌株占比35%以上，其对所有β内酰胺类抗生素耐药，特别是儿科患者临床抗生素使用面十分狭窄，糖肽类抗生素是治疗耐甲氧西林葡萄球菌感染的疗效最佳的药物。

本研究显示，我院两年间在尿液中检出真菌41株，仅次于肺炎克雷伯菌，这可能是临床广谱抗菌药物大量使用，人体菌群失调，激素和免疫抑制剂应用过多、介入操作使机体免疫力低下，条件致病菌大量繁殖所致;也可能由于临床采集尿液时操作不规范、标本采集后未及时送检和接种以及标本污染有关。

综上，本院尿路感染病原菌种类复杂多样且耐药程度严重，应加强清洁中段尿培养的送检，并及时监测病原菌的菌群分布和耐药性的发展趋势，以指导临床合理、规范地使用抗菌药物，为患者制定合理有效的治疗方案。

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DISTRIBUTION AND DRUG RESISTANCE OF PATHOGEN IN URINE CULTURE POSITIVE SPECIMENS OF 503 CASES

KONG Chang-sheng, CHEN Jun, ZOU Xiao-yan, et al
(CLinicaL Laboratory Department of Yichang YiLing HospitaL, Hubei Yichang 443100, China)

Urine culture; Βacterial f ora distribution; Drug resistance

R446.5

A

1004-6879(2016）04-0291-04

2015-06-20）

【ABSTRACT】Objective:To investigate the bacterial distribution and drug resistance in culture-positive urine in our hospital, and to provide reference for rational use of antibiotics in clinic.Methods:Distribution and drug resistance to pathogens in 503 culture-positive specimens from 2013.1 to 2014.12 were retrospectively analyzed.Results:503 bacterial strain were isolated, which included 377 strains of gram-negative bacteria strain (75.0%), 85 strains of gram-positive bacteria strain (16.9%) and 41 stains of fungus (8.1%); The highest detection rate of the top three strains were Escherichia coli (62.0%), Enterococcus (10.5%) and Klebsiella pneumoniae (9.3%). The resistance rate of Escherichia coli to cefotaxime, ceftriaxone and quinolones were all higher than 50%. The resistance rate of Klebsiella pneumoniae to amoxicillin/clavulanic acid, cefotaxime, and ceftriaxone were all higher than 42%; resistance rate to nitrofurantoin was higher 40%. The antimicrobial resistance of Enterococcus faecium was signif cantly higher than Enterococcus faecalis; and the resistance rate to quinolones was 100.00%.Conclusions:The pathogens of urinary tract infection in our hospital are complex and diverse, and the drug resistance is serious. In order to guide clinical rational and standard use of antibiotics, the distribution of pathogenic bacteria and the changes of drug resistance should be timely monitored.