低评分胚胎在卵裂期及囊胚期移植的结局分析

李宜学, 郭　剑, 宁艳春, 于婉莹, 郭婉茹, 刘　恒, 冯玉环

(河北省唐山市妇幼保健院, 河北 唐山, 063000)



低评分胚胎在卵裂期及囊胚期移植的结局分析

李宜学, 郭剑, 宁艳春, 于婉莹, 郭婉茹, 刘恒, 冯玉环

(河北省唐山市妇幼保健院, 河北 唐山, 063000)

摘要:目的分析低胚胎评分患者行卵裂期(D3)或囊胚期(D5)移植的结局。方法选取接受IVF-ET治疗的低评分胚胎患者222例，根据患者意向分为卵裂期移植组(A组)和囊胚培养组(B组)。比较2组临床妊娠率、继续妊娠率及种植率。结果2组的取卵周期临床妊娠率无显著差异(P>0.05), 2组移植周期临床妊娠率、继续妊娠率及种植率有显著差异(P<0.05)。结论继续囊胚培养能有效筛选出低评分胚胎中具有发育潜能的胚胎，降低无效移植。

关键词:体外受精-胚胎移植; 低评分胚胎; 囊胚

体外受精-胚胎移植(IVF-ET)治疗中，受精后72 h胚胎应处于6～8细胞期或者早期致密化，发育过快或过慢均提示胚胎异常，尤其是发育过慢，往往预示着较低的发育潜能[1]。由于种种原因，一些患者的胚胎发育较差，表现为发育慢或形态不佳，这些胚胎在移植后的种植率较低。学者[2]认为可将这些胚胎进行囊胚培养，通过延长体外培养时间对胚胎的发育潜能进行筛选，而对于发育阻滞的胚胎，及早取消周期，可以避免无效移植。也有学者[3]认为单独的卵裂期胚胎形态并不能完全代表其生命力和质量，不能准确预测囊胚的质量。本研究分析低评分胚胎进行卵裂期移植或囊胚培养的结局，现报告如下。

1资料与方法

1.1一般资料

对2012年5月—2014年4月在唐山市妇幼保健院生殖中心接受IVF-ET治疗的患者进行分析，入选标准为D3所有卵裂期胚胎均为低评分胚胎(4～5 cell Ⅰ～Ⅱ级或6～12 cell Ⅲ级胚胎，形态不佳，包括卵裂球大小不均、碎片15%～25%、卵周隙大、有空泡等)。根据患者意愿选择卵裂期移植或囊胚培养，分为卵裂期移植组(A组,n=124)及囊胚培养组(B组,n=98)。A组行D3

1.2研究方法

1.2.1控制性促排卵：根据患者个体差异选择采用长方案或短方案进行促排卵，当至少有2个卵泡直径≥20 mm时，当晚给予人绒毛膜促性腺激素(hCG)5 000～10 000 IU, 36 h后经阴道B超介导取卵。

1.2.2精液准备、受精：取卵日男方手淫取精于一次性无菌杯中，采用梯度离心+上游法处理。IVF患者所得卵母细胞培养2～4 h加精；ICSI患者卵母细胞培养4 h，行ICSI操作。

1.2.3胚胎发育与评级：使用G5系列培养基(瑞典Vitrolife公司)进行胚胎体外培养。加精后16～18 h(次日晨)观察原核，评价受精情况。本研究中所有胚胎均来自于正常受精卵(2PN)。D3进行卵裂期胚胎评级，评级根据Veeck胚胎评分标准[3]进行。本研究中所选择的患者，所有胚胎均为低评分胚胎，发育受限胚胎(卵裂球数2～3或碎片>30%)不在本研究中。当胚胎延长培养至D5时，根据Gardner囊胚分级系统[4]对囊胚进行评级。

1.2.4移植与移植后处理：A组于D3进行卵裂期胚胎移植；B组于D5进行囊胚移植，无囊胚形成者取消周期。自取卵日给予黄体酮、达芙通等黄体支持，移植后12～14 d测尿hCG，阳性者为生化妊娠。移植后32～35 d, 超声检查见孕囊即为临床妊娠。

1.3统计学处理

采用SPSS 17.0 软件包进行统计学分析，计量资料用单向方差分析(One-Way ANOVA)，计数资料采用卡方检验。P<0.05为差异有统计学意义。

2结果

2组一般临床资料比较均无显著差异，见表1。A组中，124例患者全部接受了胚胎移植，共移植胚胎264枚。临床妊娠率为22.6%，种植率为16.3%，继续妊娠率为18.5%(5例流产)。B组中，对98例患者的401枚胚胎进行了囊胚培养，D5获得囊胚88枚，囊胚形成率为21.9%，其中优质囊胚(Gardner评分≥3 BB)11枚(12.5%)。44例患者(44.9%)未获得囊胚，取消移植。其余54例患者共移植78枚囊胚，临床妊娠19例，取卵周期临床妊娠率为19.4%，移植周期临床妊娠率为35.2%，种植率为28.2%，继续妊娠率为31.4%(2例流产)。见表2。2组取卵周期临床妊娠率比较，差异无统计学意义(P>0.05)，但B组移植周期临床妊娠率、继续妊娠率及种植率显著高于A组(P<0.05)。

表1　2组患者一般临床资料比较

表2　2组临床数据比较

与B组比较, *P<0.05。

3讨论

日常IVF-ET工作中，全胚为低评分并不罕见。目前，最常用的胚胎选择方法仍然是依靠形态学评分，卵裂期胚胎评分主要根据胚胎发育速率、卵裂球形态与大小、无核碎片量及分布、胞浆均质情况等进行，优点是快速、安全、简便。然而，胚胎的发育是一个复杂的动态过程，随着发育时程的推进，表现出不同的生理特征，受精卵原核评级、早期卵裂的发生、胚胎形态评分及囊胚的形成，都与胚胎的发育潜力有一定的相关性[4]。

囊胚是卵裂期胚胎之后的一个重要发育阶段，发育潜能差及染色体异常的胚胎在未发育至囊胚时即发育停止，囊胚期胚胎具有更好的发育潜能。囊胚移植较卵裂期胚胎移植有较大的优势: ① 自然生理状态下，早期胚胎在输卵管中发育，直到接近囊胚期才进入子宫腔[5]，此时的子宫腔更符合生理性着床，胚胎-子宫内膜同步[6]。② 囊胚培养延长了体外培养时间，对胚胎具有筛选作用。研究[7]表明，只有50%左右的优质胚胎能够发育至囊胚期，而非优质卵裂期胚胎的囊胚形成率更低，仅为20%，大部分染色体异常的胚胎则无法发育到囊胚期。③ 囊胚移植在取卵后第5～6天，此时子宫收缩活动减弱，更容易接受胚胎，有利于胚胎着床[8-9]。囊胚移植后着床率明显提高，减少了胚胎的移植数目，甚至可实行单胚胎移植，从而降低多胎妊娠的风险，提高了IVF的治疗效果。

研究[10]表明，胚胎的质量影响囊胚形成率、囊胚质量和种植率。随着胚胎碎片的增多，囊胚形成率降低，囊胚的细胞数目，尤其是滋养外胚层数目减少，质量下降[11]。虽然优质胚胎的囊胚形成率相对较高，但随着囊胚培养及冷冻技术的发展，新观点认为形态评分不能完全预测其发育潜能[12]，将这部分低评分胚胎经体外延长培养时间，仍有一部分能越过阻滞期发育成囊胚甚至优质囊胚。本研究收集了98个治疗周期的401枚低评分胚胎继续进行囊胚培养, 54个周期有88枚胚胎发育成囊胚，其中优质囊胚11枚。结果显示，虽然囊胚培养组患者的周期取消率显著增加(P<0.05), 但取卵周期妊娠率无显著变化(P>0.05), 移植周期妊娠率显著提高(P<0.05)。由此可见，胚胎的发育潜能与其形态并非完全一致，仅仅依靠单一的形态学评分来预测胚胎的发育潜力是不严谨的，对这些胚胎进行囊胚培养，加以筛选，可以最大限度地提高胚胎利用率，减少患者损失[13-15]。对于发育阻滞的胚胎，及早取消周期，可以避免无效移植。

参 考 文 献

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Outcomes of low grade embryos transplanted at cleavage or blastocyst stage

LI Yixue, GUO Jian, NING Yanchun, YU Wanying,GUO Wanru, LIU Heng, FENG Yuhuan

(TangshanMaternalandChildHealthCareHospital,Tangshan,Hebei, 063000)

ABSTRACT:ObjectiveTo analyze the outcomes of low grade embryos transplanted at cleavage stage (D3) or blastocyst stage (D5). MethodsA total of 222 patients with low grade embryos were treated by IVF-ET therapy, and they were divided into cleavage stage transplanting group (group A) and blastocyst stage transplanting group (group B) according to the patients′ intentions. Clinical pregnancy, ongoing pregnancy and implantation rate were compared between the two groups. Results There was no significant difference of clinical pregnancy rate in ocyte retrieval cycle between two groups (P>0.05), but there were significant differences of clinical pregnancy rate, ongoing pregnancy rate and implantation rate in transfer cycle between two groups. ConclusionBlastocyst culture can screen those with development potentials in low grade embryos and reduce invalid transplantation.

KEYWORDS:in vitro fertilization-embryo transfer; low grade embryos; blastocyst

中图分类号:R 321

文献标志码:A

文章编号:1672-2353(2016)07-090-03

DOI:10.7619/jcmp.201607026

收稿日期:2015-12-22

移植；B组行囊胚培养，若D5有囊胚形成，则进行移植，否则取消周期。