通痹膏的提取工艺研究

刘凤乐 杨忠进 谢建苗 王蕊蕊 高文全��

摘要：目的 优选通痹膏的最佳提取工艺。方法 采用L9（34）正交试验法，考察加水倍量、煎煮时间和煎煮次数3个因素，以提取物干浸膏得率为考察指标，优选确定最佳提取工艺。结果 最佳提取工艺为A3B2C3，即加水倍量12倍，煎煮时间90 min，煎煮次数3次。结论 通过验证实验，通痹膏提取工艺合理可行，所优选的提取工艺条件提取浸膏得率较高，能够较好的保证有效成分提取率。

关键词：通痹膏；正交实验；提取工艺

中图分类号：R284 文献标志码：A 文章编号：1007-2349（2016）06-0073-03

通痹膏是根据本院临床验方所研制的院内中药制剂，由忍冬藤、透骨草、木瓜、桂枝等药物组成，用于中老年风湿痹痛，腰腿疼痛等病症。痹证[1]，正如《素问·痹论》所云：“风寒湿三气杂至，合而为痹也”。是因为感受风寒湿热之邪引起的以肢体、关节疼痛、酸楚、麻木、重着以及活动障碍甚或关节肿大灼热等为主要症状的病症，临床上具有渐进性或反复发作的特点。其病机主要是气血闭阻不通，肌肉关节失于濡养所致。西医治疗痹证所采用的方法是抗炎镇痛与激素治疗，重点是解除患者的症状，如疼痛、肿胀、功能缺失；而中医则侧重于病因、病机治疗，如祛风、除湿、散寒、活血、通络、扶正等，尤其是西医的激素治疗与中医的扶正治疗几乎是正相反的，一个是运用免疫抑制剂；一个是增强免疫功能。而且西药治疗痹证会带来些许副作用，从而影响患者的身体，不宜长期使用。通痹膏外敷于局部，经透皮吸收后控制和缓解疼痛，标本兼治，对于长期用药的患者来说比较合适。为更加方便患者的携带使用，改变原有应用方式，对通痹膏的提取工艺进行研究，为该剂型进一步研究奠定基础。

1 仪器与试药

1.1 仪器 AR423DCN电子天平（奥豪斯仪器有限公司）；DV215CD电子天平（奥豪斯国际贸易有限公司）；MB54卤素水分测定仪（奥豪斯仪器有限公司）；C21-ST2118电磁炉（广东美林生活电器有限公司）；SUPERwscYLRO-3000MZ水处理系统（谊利广州有限公司）；H.H.S型电热恒温水浴锅（上海医疗器械五厂）。

1.2 试药 药材购于云南白药集团股份有限公司中药饮片分公司（由中药库采购，经赵爱梅副主任药师鉴定均为合格品）。

2 方法与结果

2.1 提取方法的选择 结合临床应用经验和生产条件，组方药材分为两部分，一部分为贵重药材或主要化学成分不宜煎煮药材打成细粉入药，另一部分主要含有机酸类、皂苷类等极性较大成分药材采用水煎煮。

2.2 L9（34）正交试验的设计[2～5] 根据煎煮法的条件选择加水倍量（A）、提取时间（B）及提取次数（C）3个条件为考察因素，各因素根据实际情况均取3个水平，以提取物干浸膏得率为评价指标，筛选最佳提取工艺，因素水平表见表1，L9（34）正交实验安排表见表2。

2.3 稠浸膏水分含量测定方法 采用卤素水分测定仪测稠浸膏水分含量，该仪器可用来测量任何物质含水量。

2.3.1 卤素水分测定仪的操作原理 该仪器的操作是根据热解重量原理。开始，仪器测量样品重量，内部的卤素加热单元和水分蒸发器快速干燥样品。在干燥过程中，仪器持续测量并显示结果。干燥完成后，结果以水分含量%、干重%、重量和回潮率%显示。

2.3.2 水分测定仪测量条件 ①温度程序：阶梯；②干燥温度：0～4 min，升至200℃，4 min后降至105℃；③关闭模式：60 min；④测量时间：5 min。

2.4 浸膏得率的测定 按照L9（34）正交表安排实验，分别精密吸取9组实验一定体积的提取液，置于已干燥至恒重的蒸发皿中，加热浓缩至稠浸膏（含水量约为40%～60%），转移至水分测定仪，测出含水量，计算出浸膏得率。

2.5 工艺流程

2.6 提取工艺优选[6～8]依处方组成配比称取药材，先浸泡30 min，然后按L9（34）正交表安排试验，进行煎煮提取，将煎煮所得溶液浓缩得浸膏，分别计算浸膏得率，分析结果见表2，表3。

结合极差分析表和方差分析表，以提取物干浸膏得率为考察指标，各指标因素的主次顺序为：C>A>B，提取过程中提取次数对试验结果有极显著性影响，加水量对试验结果有显著性影响，提取时间对试验结果影响不大，结合K值越大的工艺条件越有利于浸膏的提取，确定通痹膏提取条件为A3B2C3。

2.7 验证实验 按最佳工艺条件A3B2C3进行验证实验，两次实验平均结果为17.297%，实验结果较为理想，说明该工艺条简单可行。而且操作简单、方便易行，适合大规模生产。从生产的综合效益出发，考虑到节能降耗、缩短生产周期等因素，最终确定了各因素的最佳水平组合。

2.8 追加实验[9～10] 由直观分析表和方差分析表可以看出，实验结果显示3个因素的最大K值都落在最高水平上，由于提取时间对实验结果的影响没有显著性差异，所以对加水量和提取次数这两个因素分别进行追加实验，即在最佳提取工艺 A3B2C3基础上分别将加水量12倍换为14倍和将提取次数3次换成4次，2组实验，分析结果见表4，图1。

由表4可以看出，14倍量水和提取4次2组实验的浸膏得率与2次验证实验的平均浸膏得率17.297%相比并无显著差异，结合图1，可以看出，加水量10倍以上变化趋势渐缓，提取次数趋势变化也放缓，综合考虑实验的严谨性、实际生产的合理性，多次提取有可能含大量杂质，所以就不再继续追加实验，确定最佳提取工艺为A3B2C3。

3 讨论

3.1 提取方法的讨论 通痹膏是由忍冬藤、桂枝等中药组成，其部分药材为贵重药材、脂溶性有效成分含量较多，部分药材为含有机酸类、皂苷类等极性较大有效成分，鉴于药物的主要化学成分的有效溶出，考虑了几种提取方法，包括水提醇沉法、超声提取、微波提取、乙醇回流提取、蒸馏法提取挥发油，因为是医院制剂，仪器设备不足，没有乙醇提取和回收装置，结合临床用药方便及疗效，最终选择将贵重药材和脂溶性有效成分含量较多药材打粉，含极性较大有效成分药材用水煎煮。并且，药材浸泡30 min的吸水量，经多次实验验证可忽略不计。

3.2 评价指标的选择 通痹膏组方由将近20味药材组成，组方复杂，且“君药”均以粉末入药，提取部分药材多为“臣、佐、使”药，含有10多味药材，无法确定具体以哪一个有效成分或有效部位作为评价指标，最终选择水煎煮经常采用的提取物干浸膏得率为评价指标。

3.3 最佳提取工艺的确定 正交试验的极差分析结果显示3个因素都落在最高水平上，只有加水量和提取次数对实验有显著性影响，而提取时间对实验无显著性影响。所以就在加水量和提取次数上对实验进行追加，结果显示与最佳提取工艺（A3B2C3）无显著差性异，再从生产的综合效益出发，考虑到节能降耗、缩短生产周期等因素，最终确定各因素的最佳水平组合为A3B2C3。为医院制剂通痹膏的申报和生产提供了相应依据。

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（收稿日期：2016-04-15）