青海都兰野生反刍兽和啮齿动物布鲁菌病血清学检查

罗建军，肖　峰，苏贵军，王晓润（.青海省都兰县动物疫病预防控制中心，青海都兰8600；.青海省动物疫病预防控制中心，青海西宁8000）



青海都兰野生反刍兽和啮齿动物布鲁菌病血清学检查

罗建军1，肖峰1，苏贵军1，王晓润2
（1.青海省都兰县动物疫病预防控制中心，青海都兰816100；2.青海省动物疫病预防控制中心，青海西宁810001）

摘要：采集青海省都兰县境内动物血清：野生马鹿15份，野生岩羊6份，野生黄羊血清20份，高原鼠兔100份，喜马拉雅旱獭20份进行布鲁菌病检测，结果：被检野生马鹿血清15份，试管凝集阳性反应的2份，占13.3%，虎红凝集试验阳性反应1份，占6%；被检野生岩羊6份，试管凝集阳性反应1份，占16.7%，虎红凝集试验为阴性反应；被检野生黄羊血清20份，试管凝集阳性反应的3份，占15%，虎红凝集试验阳性反应1份，占5%；被检高原鼠兔血清100份，试管凝集阳性反应的3份，占3%，虎红凝集试验有阳性反应1份，占1%；被检喜马拉雅旱獭20只，试管凝集阳性反应的1只，占5%，虎红凝集试验为阴性反应。

关键词：野生反刍兽；啮齿动物；布鲁菌病；血清学检测

布鲁菌病（Brucella），是动物和人类共患的一种高度接触性传染病，其病原是布鲁菌属菌。目前，我国和世界上很多国家的家畜布鲁菌病虽已得到有效净化或成功的控制，然而野生动物布鲁菌病的存在仍构成了对畜牧业和人类健康的潜在威胁，其重要性日益增加。为更好地防控此病，2013年6月我们对青海省海西州都兰县境内的8个乡、镇的野生反刍兽和啮齿动物进行了布鲁菌病血清学检测。根据相关国外资料介绍，野生动物布鲁菌病的传染源可成为家畜布鲁菌病的来源，因为布鲁菌可在媒介昆虫草原革蜱（扁虱）体内繁殖，且存活的时间较长，感染布鲁菌的野生动物可通过草原革蜱（扁虱）寄生家畜感染，可长期保持对家畜的致病力；所以，在放牧地区防控家畜的布鲁菌病的传播中，搞清野生动物布鲁菌的感染也是一个很重要的方面。

1　材料

1.1血清样品通过都兰县巴隆国际狩猎场，采集野生马鹿（Red deer）血清15份，野生岩羊（Blue sheep）血清6份，野生黄羊（The antelope）血清20份，（均颈静脉采血），在都兰县境内8乡、镇荒漠型草场采集高原鼠兔（Ocliotcnacu-ryoniae）（摘眼法采血）采集血清100份，喜马拉雅旱獭（Mcrmota himalayana）（股动脉采血）血清20份。

1.2诊断液购自青岛易邦生物工程有限公司的兽用布鲁菌病试管凝集抗原与对照阴、阳性血清，批准文号兽药生字（2006）150138011，和兽用布鲁菌病虎红平板凝集试验抗原，批准文号兽药生字（2006）130138017，试验用平板玻璃板，按需要数量的10 mL玻璃试管，移液器，移液嘴等试验器械。

2　检测方法

对被检的反刍兽、啮齿动物的血清进行虎红平板凝聚试验和试管凝集反应的检查

2.1血清虎红平板凝集试验划出4 cm的若干小格，分别标记待检血清号。取待检血清0.03 mL用移液器加入相应小格，然后用移液器依次滴加抗原0.03 mL与其相混合，等待4 min后观察结果，同时作阴、阳性血清对照，每份血清在规定的4 min内出现凝集反应判为阳性，不出现凝集反应判为阴性。

2.2试管凝集反应检测抗原使用时作1∶02稀释，对所有野生动物的血清用0. 5%苯酚生理盐水稀释，摇匀，稀释度为1∶12.5、1∶25，1∶50和1∶100，1∶200稀释，同时设阴、阳性血清对照，每管各加入布鲁菌试管凝集抗原原液0.5 mL试管中，摇匀，放入36℃～37℃的温箱中24 h，观察凝集结果，判定结果，在1∶50的血清稀释度发生两个加号（++）以上的凝集反应时判为阳性反应，1∶25为可疑。

3　结果

被检野生马鹿血清15份，试管凝集阳性反应2份，占13.3%，虎红凝集试验有阳性反应1份，占6%；被检野生岩羊6份，试管凝集阳性反应1份，占16.7%，虎红凝集试验为阴性反应；被检野生黄羊血清20份，试管凝集阳性反应3份，占15%，虎红凝集试验有阳性反应1份，占5%；被检高原鼠兔血清100份，试管凝集阳性反应3份，占3%，虎红凝集试验有阳性反应1份，占1%；被检喜马拉雅旱獭20只，试管凝集阳性反应1只，占5%，虎红凝集试验为阴性反应。见表1。

表1　都兰县野生反刍兽和啮齿动物布鲁菌病检测

4　结论

在被检的15只马鹿、6只岩羊、20只黄羊、100只鼠兔、20只旱獭中，布鲁菌病血清试管凝集反应和虎红平板凝集试验，试管凝集反应阳性率均高于虎红平板试验，分别为13.3%/6%；16.7%/ 0；15%/5%；3/1；5/0。我们用于检测的两种血清学检测试剂，是用于家畜的布鲁菌病诊断，用于野生动物和啮齿类动物，可能不是最佳的检测方法，结合西宁动物检疫所赵青、贾鸿滨等（1984）在海西州天俊县用试管反应做的80只旱獭，布鲁菌感染阳性率为2.5%的结果，证明青海省境内野生动物普遍带有布鲁菌，而感染了布鲁菌的野生反刍兽和啮齿动物通过其体表寄生的蜱虫而使家畜感染，布鲁菌在蜱虫体内存活时间较长，若在放牧的家畜受到蜱虫的侵袭，肯定会受到感染，对感染了布鲁菌的野生反刍兽和啮齿动物，在布鲁菌病的传播上，作为布鲁菌病自然疫源，具有一定对人和家畜潜在的感染作用。

因此，防控人、家畜布鲁菌病，不但要对家畜进行布鲁菌检测、免疫，还要进行驱除蜱虫的工作，以及在蜱虫活跃的季节，本地每年4～5月份进行避免和野生动物在一个草场放牧，同时采取避蜱放牧，这样可在一定程度上阻断布鲁菌对家畜的侵袭，同时，需要对广大牧民养殖户普及有效的防控布鲁菌病的科普知识和措施，做到防患于未然。

参考文献：

［1］赵青，贾鸿滨.天峻野生旱獭布鲁菌病血清学调查［J］.青海畜牧兽医杂志，1994（5）：23-24.

中图分类号：S858.28

文献标志码：B

文章编号：0529- 6005（2016）03- 0097- 02

收稿日期：2014-07-14

作者简介：罗建军（1974-），男，中级兽医师，本科，研究方向为动物疫病防控，E-mail：ghxnabcd@126.com

通讯作者：王晓润，E-mail：qhxnabcd@126.com