不同产地灯盏细辛药材野黄芩苷含量测定

苏锦松，吕秀梅，张静



不同产地灯盏细辛药材野黄芩苷含量测定

苏锦松，吕秀梅，张静

［摘要］目的：研究不同产地灯盏细辛药材中野黄芩苷含量。方法：采用高效液相色谱法，色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶柱Diamonsil C18（250×4.6mm），流动相：乙腈-水-磷酸（18∶82∶0.2） ，流速：1mL.min-1，检测波长：282 nm，柱温：40℃。结果：在选定色谱条件下，野黄芩苷分离度良好，线性范围为0.1812 μg ～2.8997 μg，不同产地灯盏细辛药材中野黄芩苷含量差异较大，云南双柏县药材野黄芩苷含量最高。结论：不同产地灯盏细辛含量差异大。

［关键词］HPLC；产地；灯盏细辛；野黄芩苷

［作者单位］成都中医药大学，四川 成都 610075

Tel:028-87714869 Email:1508113999@qq.com

Email:zhangjingtcm@cdutcm.edu.cn

灯盏细辛，又名灯盏花，来源于菊科飞蓬属植物短葶飞蓬（Erigeron breviscapus （Vant.） Hand. -Mazz.），始载于《滇南本草》，具有活血通络止痛，祛风散寒，用于中风偏瘫，胸痹心痛，风湿痹痛，头痛，牙痛［1］。灯盏细辛主产云南省，西藏和四川少有分布。随灯盏细辛的深入研究，其需求量日益增加，市面上商品药材也越来越多，笔者走访的云南省几个县市的灯盏细辛药材，不同产地灯盏细辛药材在性状上也具有一定差异，为比较不同产地灯盏细辛药材质量，本实验对收集的各产地具代表性的药材样品进行野黄芩苷的含量比较。

1　仪器与试药

药品采自云南省、西藏等地，经成都中医药大学民族医药学院张艺教授鉴定为菊科植物短葶飞蓬（Erigeron breviscapus （Vant.） Hand. -Mazz.）。野黄芩苷对照品（880-200001，中国药品生物制品检定所提供）。日本岛津LC-10A高效液相色谱仪。乙腈（色谱纯，Dikmapure公司） ， 水为重蒸水，其他试剂为分析纯。

2　方法与结果

2.1 色谱条件［2］

色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶柱Diamonsil C18（250×4.6 mm）， 流动相：乙腈-水-磷酸（18∶82∶0.2），检测波长：282 nm；流速：1 mL.min-1；柱温：40℃。此条件下，野黄芩苷峰形和分离度好，结果见图1，图2。

图1 野黄芩苷对照品HPLC图

图2 灯盏细辛药材供试品溶液HPLC图

2.2 实验方法及方法学考察

2.2.1 对照品溶液制备 精密称取野黄芩苷对照品适量，加甲醇配制成0.1 mg.mL-1对照品溶液。

2.2.2 供试品溶液制备［2］将药材粉碎，取0.5 g，精密称定，加水回流提取两次，第一次加水50 mL，第二次加水40 mL，每次60 min，合并滤液于100 mL的量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液用0.45 μm微孔滤膜滤过，作为供试品溶液。

2.2.3 线性关系考察 分别精密量取贮备液0.25 mL、0.5 mL、1 mL、2 mL、4 mL5份，置于10 mL量瓶中，以甲醇稀释至刻度。照上述色谱条件分别精密吸取各溶液20 μL进样，测定峰面积积分值，以野黄芩苷对照品进样量 （μg）为横坐标，峰面积积分值为纵坐标，绘制标准曲线，并计算回归方程得：Y= 151374.0677X+34678.443 （r=0.9997）。

2.2.4 精密度试验 在上述色谱条件下，精密吸取对照品溶液10 μL，注入液相色谱仪，测定5次，分别记录峰面积积分值， RSD为0.49%，结果表明方法精密度良好。

2.2.5 稳定性试验 在上述色谱条件下，精密吸取对照品溶液20 μL，注入液相色谱议测定，然后每隔2h测定1 次，考察10 h，记录峰面积，RSD为0.56%，结果表明，至少在10 h内样品稳定。

2.2.6 重现性试验 取灯盏细辛药材粗粉5份，分别精密称定，照“2.2.2”项下制备，照上述色谱条件测得野黄芩苷平均含量为1.13 %，RSD为1.57%，结果表明本方法重现性良好。

2.2.7 回收率试验 取已知含量的灯盏细辛药材粗粉6份，精密称定，分别置烧瓶中，各加入一定量的野黄芩苷对照品，制成供试品溶液，照上述色谱条件进行测定结果，结果表明，野黄芩苷平均回收率为102.0 %，RSD为1.47 %。

2.3 样品测定结果

按照含量测定方法，各批号灯盏细辛药材分别精密称定3份，按照供试品溶液制备方法制备，测定不同产地灯盏细辛中野黄芩苷含量，结果各产地灯盏细辛药材中野黄芩苷含量差异较大（0.8 %～1.8%），其中云南省双柏县药材野黄芩苷含量最高，结果见表1。

3　讨论

灯盏细辛野生资源主要生长在海拔1200～3500米之间，年平均气温15 ℃左右，土壤微酸性和中性。云南省的资源主要集中在丽江、楚雄、弥勒、大理、迪庆、罗平、蒙自、邱北等地，产量占全国产量的95 %。四川攀西地区、西藏在林芝地区亦有分布。本文对不同产地灯盏细辛野黄芩苷含量进行测定，发现各产地存在一定差异，其中云南省双柏县药材野黄芩苷含量最高。

［参考文献］

［1］兰茂.滇南本草（卷一）［M］.上海世界书局，1937:9.

［2］杨文宇，张艺，段俊国.高效液相色谱法测定灯盏细辛中灯盏乙素的含量［J］.成都中医药大学学报，2001，24（3）:37～38.

Determination of scutellarin in Dengzhanxixin from different habitats by HPLC

SU Jing-song， LV Xiu-mei， ZHANGJing //（ Chengdu University of Traditional Chinese Medicine， Chengdu 610075， Sichuan）

［Abstract］Objective: To determine the content of scutellarin in Dengzhanxixin from different habitats.Method: HPLC was adopted to determine the content of scutellarin. The mobile phase was as following: acetonitrile: water: phosphoric acid （18:82:0.2 V/ V）. The flow rate was 1 mL.min-1at 40 ℃. The UV detection wavelength was 282nm. Result: Under the selected chromatography condition， the scutellarin was observed in a good separation and was good linear in the range of 0.1812 μg ～2.8997 μg. The content of scutellarin in Dengzhanxixin from different habitats was different. And the content of scutellarin was highest in Dengzhanxixin from Shuangbai County， Yunnan Province. Conclusion: The content is different of Dengzhanxixin from differentthe habitats.

［Keywords］HPLC； habitat； Dengzhanxixin； scutellarin

［中图分类号］R 284.1

［文献标识码］A

［文章编号］1674-926X（2016）02-006-02

［作者简介］苏 锦松，男，在读硕士研究生，从事中药及民族药药效物质基础及质量评价研究

［通讯作者］张 静，女，副教授，从事中药及民族药药效物质基础及质量评价研究 Tel:028-87714869

［收稿日期］2015-10-09