柴胡—黄芩药对配伍前后有效成分比较研究

潘 燕，孙立弟

（大连大学 医学院，辽宁 大连 116622）

柴胡—黄芩药对配伍前后有效成分比较研究

潘 燕，孙立弟

（大连大学 医学院，辽宁 大连 116622）

为深入探讨柴胡黄芩药对配伍机制，本文对柴胡黄芩药对配伍前后有效成分变化进行研究,运用HPLC色谱法对柴胡药材、黄芩药材、柴胡单煎液、黄芩单煎液、柴胡黄芩药对合煎液中柴胡皂苷a和黄芩苷的含量进行测定。结果显示柴胡皂苷a含量（%）：柴胡药材（醇提）1.373%，柴胡单煎液1.244%，柴—黄合煎液1.301%；黄芩苷含量（%）：黄芩药材（醇提）23.987%，黄芩单煎液13.429%，柴-黄合煎液23.300%。合煎液中有效成分的含量高于单煎液中有效成分的含量（以柴胡皂苷a、黄芩苷为指标），说明药对配伍后会明显增加药材中一些有效成分的溶出。

柴胡；黄芩；柴胡皂苷a；黄芩苷；高效液相色谱法

中药“药对”作为中药方剂中的最小配伍单元，是以中医基本理论为原则，针对治法选择性地应用与之性味、功用相匹配的两味中药，在临证应用中形成一种较为固定的组合形式。“药对”理论在相当大的程度上反应了方剂配伍关系，是历代医家积累临证用药经验的升华。

柴胡、黄芩是临床常用的配伍药对，黄芩疏风清肺、宣肺止咳，柴胡疏肝和阳、和解表里，二者合用具有清热疏肝，和解少阳之功效，在临床上应用非常广泛[1]。

1 材料与仪器

1.1 药材

柴胡购自安徽省源和堂药业股份有限公司，黄芩购自安国市健仁药材有限公司，经大连大学医学院高松副教授鉴定均为正品。

1.2 药品与试剂

标准品：柴胡皂苷a标准品（中国食品药品检定研究院），批号为：11077-200405。

黄芩苷标准品（中国食品药品检定研究院），批号为：110715-201016。

主要试剂：乙腈：色谱纯，Tedia，United States of America；甲醇：色谱纯，Tedia，United States of America；乙醇：分析纯，沈阳市苏家屯区化工厂。

1.3 主要仪器

高效液相色谱仪HITACHI L 2000，日本日立；检测器HITACHI UV-detector 2-2400；工作站，色谱数据工作站N-2000，浙江大学智达信息工程研究所。

2 实验方法

2.1 药材提取

柴胡：称取干燥至恒重的柴胡粉末2.0 g，置于500 mL的圆底烧瓶中，用含5%氨水的70%乙醇溶液回流提取三次，每次1 h，合并三次所得滤液，回收乙醇，将浓缩液分别用正丁醇100 mL萃取四次，合并萃取液，蒸干溶液，得到固体残渣，用甲醇溶液溶解，待全部溶解后，再用甲醇溶液定容至250 mL的容量瓶中，密封保存，制得柴胡药材样品。黄芩：称取干燥至恒重的黄芩粉末0.3 g，用40 mL70%乙醇加热回流提取3 h，滤液浓缩后置100 mL容量瓶，加入70%乙醇定容至刻度，摇匀。精密量取1 mL于10 mL容量瓶，用甲醇定容，制得黄芩药材样品。

2.2 水煎液样品制备

⑴柴胡-黄芩合煎液：称取柴胡40.0 g、黄芩30.0 g，混合均匀后，用蒸馏水加热煎煮提取2次，合并2次提取液，浓缩至折合原药材浓度1 g/mL，精确量取1 mL置10 mL容量瓶，甲醇定容，制得合煎液样品。

⑵柴胡单煎液：称取柴胡40.0 g，处理方法同上，制得柴胡单煎样品。

⑶黄芩单煎液：称取黄芩30.0 g，处理方法同上，制得黄芩单煎样品。

2.3 有效成分HPLC含量测定

柴胡皂苷色谱条件。色谱柱：Hypersil ODS-2(4.6 mm×250 mm，5 μm)；流动相：乙腈－水（45:55）；柱温：25℃；检测波长：210 nm；流速：1.0 mL/min；分析时间：40 min。

黄芩苷色谱条件[2]。色谱柱：Hypersil ODS-2(4.6 mm×250 mm，5 μm)；柱温：25℃；检测波长：280 nm；流速：1.0 mL/min；流动相：甲醇－水—磷酸（47:53：0.2）；分析时间：40 min。

对照品溶液的制备。柴胡皂苷a：精密称取柴胡皂苷a标准品2.0 mg，置10 mL容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得（每1 mL含柴胡皂苷a0.20 mg）。黄芩苷：精密称取黄芩苷对照品3 mg，加甲醇制得每1 mL含30 ug的溶液，即得。

供试品溶液的制备。分别取制得的药材样品、单煎及合煎液样品，微孔滤膜过滤，取续滤液，待测。

3 实验结果

HPLC测定结果显示，合煎液中的柴胡皂苷a的含量为1.301%，单煎液中柴胡皂苷a的含量为1.244%；合煎液中黄芩苷的含量为23.300%，单煎液中黄芩苷的含量为13.429%。

对照品和供试品色谱图见图1、图2、图3、图4；实验数据见表1、表2。

图1 柴胡皂苷a对照品色谱图

图2 柴胡单煎液色谱图

图3 黄芩苷对照品色谱图

图4 黄芩单煎液色谱图

表1 供试品中柴胡皂苷a含量

表2 供试品中黄芩苷含量

4 讨论

（1）柴胡、黄芩中所含化学成分多种多样，本次研究主要以柴胡中的主要有效成分柴胡皂苷a，以及黄芩中的主要有效成分黄芩苷为指标，对药对配伍前后的化学成分变化进行研究。

（2）HPLC测定结果显示，合煎液中的柴胡皂苷a的含量（1.301%）略高于单煎液中柴胡皂苷a的含量（1.244%）；合煎液中黄芩苷的含量（23.300%）要明显高于单煎液中黄芩苷的含量（13.429%）。

（3）研究结果表明，柴胡－黄芩药对配伍后会明显增加药材中一些有效成分的提出，这些组份有可能是药理学研究中发现的黄芩柴胡配伍后药效增强的物质基础。

[1]吕富银.黄芩常用药对浅述[J].世界中医药,2010(9):353-354.

[2]国家药典委员会.中华人民共和国药典:第I部[M].中国医药科技出版社,2010:282.

Study on the Effective Components Changes of the Radix Bupleuri-Scutellaria Baicalensis Herbal Pair before and after Compatibility

PAN Yan,SUN Li-di
(College of Medicine,Dalian University,Dalian 116622,China)

To further investigate the compatibility mechanism of Radix Bupleuri-Scutellaria baicalensis herbal pair,HPLC method was applied to assay the contents of saikosaponin a and baicalin in Radix Bupleuri or Scutellaria baicalensis medicinal materials,their single decoction solution and compound decoction solution.Results showed that the content of saikosaponin a in the Radix Bupleuri is 1.373%,in the single decoction is 1.244%and in the compound decoction is 1.301%;the content of baicalin in the Scutellaria baicalensis is 23.987%,in the single decoction is 13.429%and in the compound decoction is 23.300%.In conclusion,the content of the effective components in the compound decoction exceed the content in the single decoction(the saikosaponin and the baicalin as the index),the dissolved quantity of effective components increased after the compatibility of medicines.

Radix Bupleuri;Scutellaria baicalensis;saikosaponin a;baicalin;HPLC

R285

：A

：1008-2395(2016)06-0078-04

2016-09-05

辽宁省大学生校外实践教育基地建设项目（20160321）。

潘燕（1972-），女，讲师，研究方向：中药化学成分的提取分离、分析鉴定。