桑椹多糖对高脂血症大鼠血脂代谢、血液流变学及氧自由基的影响

郭晓娜　刘现辉　闫春生　黄　涛　张月藤　王君明　李晓冰

(黄河科技学院，河南　郑州　450063)



桑椹多糖对高脂血症大鼠血脂代谢、血液流变学及氧自由基的影响

郭晓娜刘现辉1闫春生黄涛张月藤2王君明3李晓冰3

(黄河科技学院，河南郑州450063)

目的探讨桑椹多糖对高脂血症大鼠血脂代谢、血液流变学及氧自由基的影响。方法高脂饲料制造高脂血症大鼠模型。实验设正常对照组、高脂血症模型组、高、中、低剂量桑椹多糖组及洛伐他汀组。给予桑椹多糖或洛伐他汀干预3个月。实验结束处死大鼠，比较各组甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)及低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、载脂蛋白(Apo)A-I、ApoB。测定血液流变学指标及总超氧化物歧化酶(T-SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)、总抗氧化能力(T-AOC)指标。结果与模型组比较，桑椹多糖明显降低TG、TC、LDL-C、ApoB及血液流变学指标水平;降低MDA,增强T-SOD、GSH-Px、CAT、T-AOC活性，升高HDL-C、ApoA-I水平。结论桑椹多糖对实验性高脂血症模型大鼠具有降血脂、改善血液的黏聚状态及抗脂质过氧化作用。

桑椹；多糖；高脂血症

桑椹为桑科植物桑树的干燥果穗，可滋阴养血，生津，润肠，主治肝肾不足和血虚精亏的头晕目眩，耳鸣，须发早白，失眠，消渴及肠燥便秘等证〔1〕。桑椹中主要含有白黎芦醇芦丁原花色素及多糖等成分〔2〕。桑椹多糖具有抗氧化性、降血糖活性、抗肿瘤活性、抗炎症活性等〔3〕。然而对桑椹多糖改善血脂、血流变等指标状况却鲜有报道，本实验研究桑椹多糖对高脂血症大鼠血脂代谢、血液流变学及氧自由基的影响。

1　材料与方法

1.1试验药物洛伐他汀,购于重庆大新药业有限公司；新鲜桑椹采摘于中国农业科学院蚕业研究所桑园，放入-20℃冷藏备用。桑椹多糖依据文献提取〔4〕，纯度为92.35%。

1.2仪器日立7170A全自动生化分析仪;UV-2450紫外可见分光光度计(日本岛津公司)。MVIS-2035全自动血液流变分析系统，重庆天海医疗设备有限公司。

1.3试剂 血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、 高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)试剂盒(均购于中生北控生物科技股份有限公司);总超氧化物歧化酶(T-SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、总抗氧化能力(T-AOC)、丙二醛(MDA)试剂盒均购于南京建成生物工程研究所。

1.4动物及饲料Wistar大鼠，SPF级，雄性，体质量180～220 g，由北京维通利华实验动物技术有限公司提供，许可证号SCXK(京)2011-0011。高脂饲料(基础饲料78%，猪油10%，蛋黄粉10%，胆固醇2%)自行配制〔5〕。

1.5方法

1.5.1动物分组与模型大鼠60只，基础饲料适应性喂养1 w后，按体重随机分为正常对照组、高脂血症模型组、桑椹多糖高、中、低剂量组和洛伐他汀组，每组10只。正常对照组喂食基础饲料，同时按15 ml/kg生理盐水灌胃，模型组给予高脂饲料+15 ml/kg生理盐水灌胃，桑椹多糖高、中、低剂量组给予高脂饲料+桑椹多糖400、200、100 mg·kg-1·d-1，洛伐他汀组给予高脂饲料+洛伐他汀2 mg·kg-1·d-1。连续给药3个月。

1.5.2取材大鼠处死前1 d禁食不禁水24 h，腹主动脉取血，离心分离血清。

1.5.3指标测定 按试剂盒使用说明测定血清中TC、TG、HDL-C、LDL-C、T-SOD、CAT、GSH-Px、T-AOC、MDA。用终点法测定载脂蛋白(Apo)A，ApoB。全自动血液流变分析系统检测血液流变学主要指标:全血高、低切黏度,血浆黏度,红细胞聚集指数。

1.6统计学方法采用SPSS15.0软件行单因素方差分析。

2　结　果

2．1桑椹多糖对高脂血症大鼠血脂代谢的影响与正常对照组比较，模型组TC、TG、LDL-C显著升高，HDL-C显著降低(P<0.01),说明造模成功。与模型组比较，桑椹多糖低剂量组明显降低TC水平(P<0.05)；桑椹多糖中剂量组明显降低TC、TG含量(P<0.05)；桑椹多糖高剂量组显著降低TC、TG(P<0.01),明显降低LDL-C水平，升高HDL-C水平(P<0.05)，见表1。

表1　桑椹多糖对高脂血症大鼠血脂代谢的影响

与对照组比较:1)P<0.05,2)P<0.01；与模型组比较:3)P<0.05，4)P<0.01，下表同

2.2桑椹多糖对高脂血症大鼠Apo的影响与正常对照组比较，模型组ApoA-I水平明显下降，ApoB明显上升(P<0.05)，ApoB/ApoA-I比值显著升高(P<0.01)。与模型组比较，桑椹多糖低剂量组明显降低ApoB/ApoA-I比值(P<0.05)，高、中剂量组明显升高ApoA-I水平(P<0.05)，显著降低ApoB/ApoA-I比值(P<0.01)，桑椹多糖高剂量组明显降低ApoB水平(P<0.05)，见表2。

2．3桑椹多糖对高脂血症大鼠血液流变学的影响与正常对照组比较，模型组大鼠全血高切黏度、低切黏度及红细胞聚集指数显著增高(P<0.05，P<0.01)。桑椹多糖干预后，与模型组比较，各剂量组均明显降低全血低切黏度及红细胞聚集指数；其中中、高剂量组显著降低血浆黏度，高剂量组明显降低全血高切黏度(P<0.05)，见表3。

2．4桑椹多糖对高脂血症大鼠血清氧化应激的影响与正常对照组比较，模型组T-SOD、CAT、GSH-Px显著降低(P<0.01)，T-AOC明显下降(P<0.05)，MDA显著升高；经桑椹多糖干预后，与模型组比较，各剂量组显著升高CAT、GSH-Px水平；中、高剂量组降低MDA含量，显著升高T-AOC水平(P<0.01)；多糖高剂量组明显升高T-SOD含量(P<0.05)，见表4。

表2　桑椹多糖对高脂血症大鼠Apo的影响

表3　桑椹多糖对高脂血症大鼠血液流变学的影响±s，n=10)

表4　桑椹多糖对高脂血症大鼠血清氧化应激的影响±s，n=10)

3　讨　论

高脂血症与脑卒中、心肌梗死、心脏猝死、糖尿病、高血压、脂肪肝等发病密切相关，是冠心病的主要危险因素之一〔6〕。LDL-C升高或HDL-C降低都是冠心病发生的独立危险因素。近年有研究表明Apo与冠状动脉疾病发病更具相关性〔7〕。ApoA-I是在肝脏及肠黏膜中合成，代表HDL-C中蛋白质部分，反应HDL-C合成与分解之间的平衡。ApoB是在肝脏中合成，ApoB水平升高是动脉粥样硬化的主要危险因素之一〔8〕。研究发现ApoB/ApoA-I比值越高，胆固醇越容易在血管内皮细胞中堆积，冠状动脉粥样硬化病变和心血管事件的风险越大〔9〕。本研究显示，桑椹低糖有调节血脂及载脂蛋白代谢作用。

血液流变学指标的异常是心脑血管疾病出现临床症状之前的早期表现，其机制与血脂水平的变化关系密切〔10〕。高脂血症通过影响红细胞膜脂质双层和骨架蛋白，使血液流速降低，微循环减慢，从而导致组织缺血缺氧及代谢紊乱。本研究结果提示桑椹多糖在降血脂的同时也部分纠正了血液流变学异常，改善高脂模型大鼠血液的高黏和高聚状态。

血脂异常会导致机体抗氧化能力下降，氧自由基生成增加，脂质过氧化作用增强。超氧化物歧化酶(SOD)是机体细胞中主要抗氧化酶，能清除超氧阴离子，使其生成过氧化氢，之后能被CAT分解为水和氧气，是维持生物体自由基产生和过氧化物清除能力平衡的重要物质。GSH-Px亦能清除自由基，阻断脂质过氧化的链式反应，保护细胞膜的结构和功能〔11〕。MDA是脂质过氧化反应链终止阶段产生的小分子产物，可严重破坏细胞膜结构，检测MDA含量可以间接反映机体组织细胞的过氧化程度。本实验观测到高脂模型组中大鼠血清MDA水平明显升高，T-AOC显著降低，桑椹多糖干预能有效抑制高脂血症大鼠血清MDA 的升高，使CAT、T-SOD、GSH-Px活力显著升高，增强机体总抗氧化能力。

1南京中医药大学.中药大辞典〔M〕.第2版.上海:上海科学技术出版社,2006:2790．

2施青红,王向阳.桑椹的功能成分及药理作用〔J〕.食品与机械,2007;23(4):153．

3胡海梅.桑堪多糖提取工艺优化、组分分析及降血糖活性鉴定〔D〕.合肥:合肥工业大学,2009.

4张文娜,陆敏,姚清国,等.桑椹多糖的抗氧化活性研究〔J〕.安徽农业科学,2012;40(1):156-7.

5刘启玲,周玲,许心青.番茄红素预防高脂喂饲大鼠脂质代谢紊乱的作用及机制探讨〔J〕.西安交通大学学报(医学版),2008;29(1):70．

6苏蓉,于德水.高脂血症的危害及防治〔J〕.中国当代医药,2009;16(8):128-9.

7Carnevale SGP,Pedrazzoli R,Onolfo S,etal.ApoB/apoA-I ratio is better than LDL-C in detecting cardiovascular risk〔J〕.Nutr Metab Cardiovasc Dis,2011;21(6):406-11.

8张洋,张建华,汪跃国,等.血清ApoB/ApoA-I比值与冠心病患者冠脉病变严重程度的相关性〔J〕.安徽医药,2014;18(4):633-7.

9Tani S,Nagao K,Anazawa T,etal.Relation of change in apolipoprotein B/apolipoprotein A-I ratio to coronary plaque regression after pravastatin treatment in patients with coronary artery disease〔J〕.Am J Cardiol,2010;105(2):144-8.

10Jeong YJ，Choi YJ，Kwon HM． Differential inhibition of oxidized LDL induced apoptosis in human endothelial cells heated with different flavonoids〔J〕．Br J Nutr,2005;93(8):581-91.

11Chung SS,Kim M,Youn BS,etal.Glutathione peroxidase 3 mediates the antioxidant effect of peroxisome proliferator activated receptor γ in human skeletal muscle cells 〔J〕.Mole Cell Biol,2009;29(1):20-30.

〔2015-04-15修回〕

(编辑苑云杰/曹梦园)

中国博士后科学基金(2012M521412)；河南省科技攻关计划项目(162102310466)；河南省高等学校重点科研项目(16A360010)；河南中医学院科技创新人才(2015XCXRC05)

李晓冰(1980-)，女，副教授，博士，主要从事多糖免疫药理学研究。

郭晓娜(1981-),女,讲师,硕士,主要从事经方配伍规律及作用机制研究。

R285

A

1005-9202(2016)18-4421-03；doi：10.3969/j.issn.1005-9202.2016.18.008

1河南省中医院2广州中医药大学3河南中医学院