胃腺癌中基质金属蛋白酶-19和上皮型黏附素表达特征

周　为　马新福　戈　锐

(青海大学附属医院胃肠肿瘤外科，青海　西宁　810001)



胃腺癌中基质金属蛋白酶-19和上皮型黏附素表达特征

周为马新福戈锐

(青海大学附属医院胃肠肿瘤外科，青海西宁810001)

目的观察胃腺癌中基质金属蛋白酶(MMP)-19和上皮型黏附素(E-cadherin)的表达特征，分析其临床价值。方法65例行胃腺癌手术后留取的标本作为研究组，收集距肿物边缘>3 cm的非肿瘤性胃黏膜组织20例作为对照组，应用免疫组化方法检测两组中MMP-19和E-cadherin的表达。结果研究组和对照组中MMP-19和E-cadherin表达的阳性率差异有统计学意义。研究组中MMP-19和E-cadherin表达的阳性率与肿瘤的脉管侵犯和转移密切相关，MMP-19表达的阳性率与肿瘤最大径密切相关，二者均与性别、年龄及浸润深度无明显相关性。线性相关分析显示研究组中MMP-19和E-cadherin的表达具有负相关性。结论胃腺癌中MMP-19高表达、E-cadherin低表达可以促进肿瘤的形成和进展。二者具有一定的协同作用，可能对肿瘤的转移有一定的调节作用。

胃腺癌；基质金属蛋白酶-19；上皮型黏附素；免疫组化

胃腺癌是胃黏膜起源的上皮源性恶性肿瘤，其转移的危险高。转移相关蛋白在肿瘤中常高表达〔1〕。基质金属蛋白酶(MMP)-19是MMPs家族成员之一，最先在自身免疫性类风湿关节炎中分离出来，随后在机体多种组织中被陆续发现，其表达的程度不一，MMP-19的生物学功能中表现出具有明显的降解细胞外基质的作用〔2,3〕。上皮型黏附素(E-cadherin)是细胞间黏附的相关蛋白，正常机体中高表达，对细胞间结构的维持和功能的传递有重要作用〔4〕。本实验分析胃腺癌切除手术后的标本MMP-19和E-cadherin的表达特征。

1　资料与方法

1.1一般资料我院诊断为胃腺癌，并行根治性手术的患者65例作为研究组，均符合WHO中关于胃腺癌的诊断标准，并经病理医师复审切片证实。其中男34例，女31例；年龄34～86岁，平均(60.7±11.8)岁。选择上述患者术后标本中距肿物边缘>3 cm的非肿瘤性胃黏膜组织20例作为对照组，其中男10例，女10例；年龄39～81岁，平均(57.5±8.8)岁。两组一般临床资料无明显差别。

1.2MMP-19和E-cadherin的检测方法标本均切取2～3 mm厚的组织后行甲醛液固定，石蜡包埋后切片，并应用免疫组SP法检测MMP-19和E-cadherin的表达，二氨基联苯胺(DAB)染色。操作严格按说明书进行，做好质量控制，努力减少相关的误差。

1.3MMP-19和E-cadherin结果的判读MMP-19的阳性着色部位是细胞质，E-cadherin的阳性着色部位是细胞膜，以染成棕黄色(中等强度)-棕褐色(强阳性)为阳性反应的细胞(淡黄色着色不计为阳性)。每张切片选择上皮细胞集中的区域进行观察(3个400倍视野)，计算阳性率，取其平均值。以<10%定为阴性，以≥10%定为阳性。

1.4统计学方法应用SPSS统计软件进行χ2检验和线性相关分析。

2　结　果

2.1两组MMP-19和E-cadherin表达阳性率的比较两组MMP-19和E-cadherin表达阳性率差别显著。见表1。

表1　两组MMP-19和E-cadherin表达阳性率比较〔n(%)〕

2.2研究组MMP-19和E-cadherin在不同临床特征中的阳性表达比较研究组中MMP-19和E-cadherin表达的阳性率与肿瘤脉管侵犯和转移密切相关，MMP-19表达的阳性率与肿瘤的最大径密切相关，二者均与性别、年龄及浸润深度无明显相关性。见表2。

2.3研究组中MMP-19和E-cadherin的相关性分析MMP-19和E-cadherin的表达具有负相关性(r=-0.47,P=0.041 2)。

表2　研究组中MMP-19和E-cadherin在不同临床特征中的阳性表达比较〔n(%)〕

3　讨　论

流行病学显示胃癌的发生率正呈下降趋势，尤其是在一些西方国家。这与饮食、营养方式的改变及早期胃癌检测方法的进步有关〔5〕。胃腺癌病变形成和进展较快。体内与转移相关的基因和蛋白表达异常〔6〕。MMPs是由体内多种组织和肿瘤细胞形成的蛋白水解酶，对细胞外基质、基底膜均有较好的降解作用，这使肿瘤转移的屏障受到破坏，肿瘤细胞易于突破基底膜形成远隔部位的播散〔7〕。MMP-19是家族中重要成员，又称为基弹性蛋白酶，可以降解明胶、纤维结合蛋白、聚集蛋白聚糖等〔8〕。MMP-19保留可溶性MMPs家族成员的共同域组织，还包括在催化领域插入一个独特的半胱氨酸，改变延时动机，同时有一个独特的插入铰链区和一个C末端尾巴〔9,10〕，因此其可能有特殊作用。Yu等〔11〕通过观察MMP-19在肺癌中的表达，发现MMP-19基因和蛋白均高表达，且与非小细胞肺癌的预后相关，认为MMP-19过表达能促进上皮和间质的转化、肿瘤的转移和浸润过程，MMP-19可能是一个重要的肿瘤标志蛋白。梁珍丽等〔12〕通过观察MMP-19在鼻咽癌组织中的表达后，发现MMP-19在鼻咽癌中的表达下调。因此MMP-19在肿瘤中的表达可能不完全一致，其作用可能更趋于多样性，也可能有肿瘤特异性。E-cadherin是细胞间重要的黏附蛋白，具有维持细胞间连接及信息传递的重要作用〔13〕，正常情况下E-cadherin高表达，而在肿瘤性病变和肿瘤进展时E-cadherin表达下降，此时细胞易于与原发灶脱离，出现浸润性生长和播散。

本实验结果提示MMP-19高表达、E-cadherin低表达是促进肿瘤形成的重要蛋白。MMP-19高表达显示出正向的促进肿瘤性生长的作用。有观点认为MMP-19在病变形成的初始阶段可以显著降低细胞的克隆能力，但是在肿瘤恶性转变的过程中，MMP-19表达明显增强，可能通过细胞因子和胰岛素样生长因子信号来调节细胞的黏附和增殖过程〔10〕。这可能是MMP-19的双重作用，也可能是病变的不同阶段起的作用及调节的途径不同形成的。本文结果提示MMP-19和E-Cadherin二者异常表达可以促进肿瘤的进展和远处播散。MMP-19高表达可以促进肿瘤的生长。因此MMP-19高表达可能预示着不良的生物学行为〔14〕。本文提示二者具有协同负向作用。MMP-19为细胞外基质降解的重要蛋白，而E-cadherin是调节细胞连接和黏附的，此时细胞连接能力下降，细胞间松动，使肿瘤细胞易于离开原发灶〔15,16〕。同时在细胞外基质溶解使细胞转移的屏障受到明显破坏的情况下，肿瘤远处转移形成可能〔17,18〕。

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12梁珍丽,韦祝新,陈霜,等.基质金属蛋白酶-19在鼻咽癌组织的表达及临床意义〔J〕.广西医学,2015;37(3):307-9.

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〔2015-01-26修回〕

(编辑苑云杰)

周为(1965-)，男，副主任医师，主要从事胃肠肿瘤研究。

R730

A

1005-9202(2016)18-4513-03；doi：10.3969/j.issn.1005-9202.2016.18.054