慢性荨麻疹患者血清IL-35和IL-17的检测

郭　敏　白　莉



·论著·

慢性荨麻疹患者血清IL-35和IL-17的检测

郭敏1白莉2

目的：检测慢性荨麻疹(CU)患者血清中IL-35及IL-17的表达。方法：病例组60例，根据荨麻疹活动性评分标准(UAS)评价疾病严重程度，60例健康体检者作为对照。ELISA法检测CU患者与对照血清中IL-35和IL-17的水平，分析其与疾病严重程度的相关性。结果：CU患者组血清IL-35水平为(46.73±17.19)ng/L明显低于健康对照组的(73.78±25.51)ng/L(P<0.05)；CU组IL-17表达水平为(18.03±8.88)ng/L，明显高于对照组的(8.46±3.29)ng/L(P<0.05)。疾病严重程度评分与IL-35表达水平呈负相关(P<0.05)，与IL-17表达水平呈正相关(P<0.05)。结论：IL-35和IL-17可能与CU的发病及严重程度有关。

慢性荨麻疹；IL-35；IL-17

慢性荨麻疹(chronic urticaria, CU)是皮肤科常见的过敏性疾病，以反复发生风团或红斑伴瘙痒为特点，病程超过6周，每周至少发作两次，病程迁延难愈，严重影响患者的生活质量。IL-35是Treg细胞分泌的一种特征性的免疫负调节因子，IL-17是Th17细胞分泌的特征性细胞因子，两者均在自身免疫性疾病、炎症反应、肿瘤等发挥重要作用。迄今国内外尚未见对慢性荨麻疹中IL-35和IL-17相关性研究，本文采用ELISA酶联免疫吸附实验，检测CU患者血清中IL-35和IL-17含量，分析两者表达水

平与疾病严重程度的相关性，现将结果报道如下。

1　资料和方法

1.1临床资料病例组选择60例自2014年11月至2015年5月在我院皮肤科门诊就诊并经临床确诊的慢性荨麻疹患者。入选标准：①病程大于2个月，每周至少发作两次；②除外胆碱能性荨麻疹、压力性荨麻疹、寒冷性荨麻疹；③近4周内未使用糖皮质激素及其他免疫抑制剂，近7天内未使用抗组胺药物治疗。排除标准：①资料不全者；②妊娠期、哺乳期妇女；③合并严重心、肝、肺、肾等内脏疾病以及系统性疾病。60例患者中男28例，女32例；年龄16～58岁，平均32.3岁；病程3个月至12年，平均24.6个月。根据EAACI/GA2LEN/EDF荨麻疹评分标准，将CU患者根据病情严重程度分级评分(表1)。对照组选择60例我院体检中心健康体检者，排除系统及过敏性疾病，年龄、性别与病例组匹配，入组及采血均已告知患者并签署知情同意书。

表1　慢性荨麻疹EAACI/GA2LEN/EDF荨麻疹评分标准

1.2CU严重程度评分标准[1,2]严重程度观察指标包括风团数量及瘙痒程度，所有CU按轻、中、重三级评分，按综合症状积分将病情分为轻度(0～2分)，中度(3～4)分、重度(5～6分)。

1.3标本收集入组患者均采肘静脉血3 mL，置于真空采血试管中，室温冷却30 min,3000 r/min离心10 min,取血清1.5 mL放入PE管分装，标记后置于-20℃冰箱中保存，备测。实验操作步骤严格按照IL-35和IL-17酶联免疫吸附试验试剂盒说明书执行。每个试剂盒使用前先做预试验，检测试剂盒正常，标准孔设复孔，检测人IL-35及IL-17吸光值，根据标准孔与复孔的平均值绘制标准曲线，通过曲线回归方程计算出待测孔人IL-35及IL-17浓度。

1.4试剂与器材人IL-35及IL-17酶联免疫吸附试验试剂盒购自上海酶联生物科技有限公司，采用SpectreMax plus384酶标仪(MD公司，美国)。

1.5统计学方法采用SPSS 22.0统计软件进行分析，进行两独立样本t检验比较实验组和对照组血清中IL-35和IL-17表达水平，采用Pearson相关分析探讨两者间的关系，并采用Spearman相关分析探讨IL-35、IL-17与CU疾病症状评分的相关性，P<0.05说明差异有统计学意义。

2　结果

2.1ELISA检测结果IL-35血清含量在CU患者中明显降低，与健康对照组有统计学差异(P<0.05);CU患者IL-17血清水平明显高于健康对照组，差异有统计学意义(P<0.05)，见表2。

表2　IL-35与IL-17水平组间比较

2.2相关性分析IL-35水平与疾病严重度评分呈负相关，有统计学意义(P<0.05)，IL-17水平与疾病严重度评分呈正相关,有统计学意义(P<0.05)。IL-35与IL-17表达水平呈负相关，有统计学意义(P<0.05)；见表3。

表3　IL-35、IL-17与疾病严重度的相关性及IL-35与IL-17相关性的分析

3　讨论

慢性荨麻疹(CU)发病的中心环节是肥大细胞活化脱颗粒，释放组胺、合成细胞因子、炎症介质等引起血管扩张及血管通透性增加，导致真皮水肿，引起风团及瘙痒等临床症状[3]。目前国内外对CU的研究大多集中在免疫调节机制上，主要研究为Th1/Th2细胞之间的平衡以及相关的细胞因子在自身免疫性疾病中的作用，但仍不能很好地解释CU的发病机制。Treg细胞与Th17细胞是近几年研究发现的CD4+的细胞亚群，Treg/Th17的平衡在免疫调节过程中发挥重要作用[4]，目前已经在自身免疫性疾病中得到越来越多的关注。

IL-35是由调节性T细胞分泌的一种具有免疫负调节作用的新型细胞因子，IL-35与IL-12、IL-23、IL-27一起组成了IL-12细胞因子家族[5]。IL-35是由p35和EBI3两个亚单位组成的异源二聚体，其在体外具有促进Treg细胞扩增，诱导iTR35细胞产生、促进Th1细胞分化，抑制Th17细胞产生和效应性T细胞活化等作用，是Treg细胞发挥其最大抑制效应所必不可少的细胞因子[6]。 由于IL-35具有较强的免疫抑制作用，越来越多的研究者开始关注其在疾病发生与发展过程的重要作用。IL-17是由Thl7分泌的最重要的细胞因子，参与中性粒细胞的增殖、成熟和趋化，可诱导巨噬细胞、内皮细胞、上皮细胞和成纤维细胞分泌IL-6、IL-8、肿瘤坏死因子、趋化因子，导致和放大炎症[7]。已有的研究表明IL-17作为一种很强促炎功能的细胞因子，在过敏性哮喘、慢性荨麻疹、类风湿性关节炎、多发性硬化症、银屑病、红斑狼疮、自身免疫性肝炎和炎症性肠病中扮演重要角色[8-10]。

本研究发现，CU患者组IL-35的表达水平较健康对照组明显降低，并且与疾病的严重程度呈负相关，提示在健康人体内，IL-35可能作为一种保护性细胞因子存在，维持人体的免疫平衡。本研究表明CU患者比健康人血清IL-17水平明显升高，且与病情严重程度评分成正相关，但与病程、年龄、性别无明显相关性，推测随着临床症状逐渐加重，Treg细胞分化减少，合成的IL-35逐渐降低，促进Th1、Th2等细胞分化,抑制Th17细胞产生和Treg细胞活化，IL-17的表达增加，导致机体免疫功能的异常，引起CU的发生。本研究还发现，在CU患者中IL-35与IL-17表达水平呈负相关，有统计学意义(r=-0.488,P<0.05)，提示IL-35既可以使调节性T细胞增殖，也可以抑制Th17细胞的分化，影响IL-17合成，提示两者可能共同在自身免疫性疾病、炎症反应、肿瘤、病毒感染等扮演重要角色[6]。

综上所述，CU的发生与发展与IL-35与IL-17密切相关，通过对其关系的研究有助于了解CU的免疫发病机制，并为CU的诊断与治疗提供新的思路。但CU发生、发展的机制复杂，尤其对于IL-35的研究尚处于早期，IL-35与IL-17在CU中如何相互作用，仍需进一步研究。

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(收稿：2015-07-29修回：2015-08-05)

Detection of serum IL-35 and IL-17 in the patients with chronic urticaria

GUOMin1,BAILi2.

1.FirstClinicalMedicalcollege,ShanxiMedicalUniversity,Taiyuan030001,China; 2.TheFirstHospitalofShanxiMedicalUniversity,Taiyuan030001,China

BAILi,E-mail:baili@medmail.com.cn

Objective: To detect the level of IL-35 and IL-17 in the patients with chronic urticaria (CU). Methods: The levels of IL-35 and IL-17 in 60 patients and 60 controls were detected by ELISA and the severity of the patients was assessed by urticaria activity score (UAS). The correlation between the level of serum IL-35 and IL-17, and CU severity scores was analyzed. Results: The serum level of IL-35 in the patients was (46.73±17.19) ng/L, which was lower than that in the controls (73.78±25.51) ng/L. The difference was statistically significant (P<0.05). The serum level of IL-17 in the patients was (18.03±8.88) ng/L, which was higher than that in the controls (8.46±3.29) ng/L. The difference was statistically significant (P<0.05). The CU severity score was negatively correlated to the level of IL-35 and positively to the level of IL-17 (P<0.05). Conclusion: The expression of IL-35 and IL-17 may be involved in the onset and severity of CU.

chronic curticariaA; IL-35; IL-17

1山西医科大学第一临床医学院，山西太原,030001

2山西医科大学第一附属医院，太原，030001

白莉，E-mail:baili@medmail.com.cn