柴胡提取物栓包合前后对家兔解热作用的比较

李　丽，张　玲，蒋　月，王金莉，李芳兵

（锦州医科大学畜牧兽医学院，辽宁　锦州　121001）

柴胡提取物栓包合前后对家兔解热作用的比较

李丽，张玲，蒋月，王金莉，李芳兵

（锦州医科大学畜牧兽医学院，辽宁锦州121001）

本试验依据2015版兽药典方法制备柴胡提取物的包合物及其栓剂，并对其进行质量检查。并通过酵母菌和牛奶所致的两种发热动物模型，观察并比较柴胡提取物栓及柴胡提取物包合物栓对家兔的解热作用。家兔18只随机分为酵母菌致热组和牛奶致热组，每个处理分成3个组，分别为空白对照组、柴胡提取物栓组、柴胡提取物包合物栓组，每组3只。结果表明，包合后的栓剂解热作用更好且维持时间更久。研究证实，在两种发热模型的解热方面，包合前后的药物对酵母菌模型解热作用均优于对牛奶模型的解热作用。证实包合技术可提高药物稳定性，延缓释药的释放，提高药物的生物利用度，在临床上具有很高的应用价值，因此， -环糊精包合技术的研究，在新产品研发，以及药剂处方的改进方面具有良好的应用前景。

柴胡提取物；包合技术；栓剂；解热作用；家兔

1　材料与方法

1.1试验材料

1.1.1药品柴胡提取物，β-环糊精（β-CD），半合成脂肪酸酯，牛奶，酵母菌，生理盐水，液体石蜡，由锦州医科大学畜牧兽医学院药学实验室提供。

1.1.2试验动物家兔，1.5～2.0 kg，雌雄兼用，由锦州医科大学实验动物中心提供。试验前适应环境 3 d，自由饮水，直肠测基础体温，取基础体温39.0±0.5℃家兔用于试验。

1.1.3器材烧杯（250 mL、500 mL、1 000 mL）、移液管（1 mL、5 mL、10 mL）、量瓶（10 mL、25 mL、50 mL）、移液枪、量筒、药匙、洗耳球、玻璃棒、胶头滴管、铁架台、体温计、容量瓶、烧杯、吸管、镊子、紫外分光光度计、注射器等，由锦州医科大学畜牧兽医学院药学实验室提供。

1.2试验方法

1.2.1柴胡提取物的包合物制备及质量检查采用饱和水溶液法制备柴胡提取物β-CD包合物，即称取β-CD适量，置于烧瓶中，加入相应量的纯化水，加热溶解，制成β-CD饱和溶液，加入柴胡提取物，搅拌后冷却，过滤，干燥后得柴胡提取物β-CD包合物。

采用紫外可见分光光度法测定药物的质量浓度，考察药物和包合物的溶解度及光稳定性[3]。

1.2.2柴胡提取物栓及柴胡提取物包合物栓的制备制备工艺：取柴胡提取物，加6倍量水浸泡20 h，水蒸汽蒸馏，收集挥发油，密闭保存。蒸馏后，取出药液，加水煎煮0.5 h，合并药液，滤过，减压低温浓缩干燥，得干浸膏。将干浸膏粉碎，过筛（六号筛），备用。取适量的半合成脂肪酸酯，加热熔化，保温50℃，加入干浸膏粉和挥发油等混合均匀，迅速注入涂有润滑剂的栓模内，冷却20 min，刮去栓模外多余部分，启模即得。包合后的柴胡提取物制备工艺同上[4]。

1.2.3柴胡提取物栓包合前后对家兔解热作用的比较

1.2.3.1牛奶发热模型试验兔称取体重，测定正常体温，用牛奶皮下注射，3 mL/kg，分点注射。

1.2.3.2酵母菌发热模型试验兔称取体重，测定体温，将酵母菌稀释后耳缘静脉注射1 mL/kg[5-7]。

记录试验兔体重和标号。分别测肛温2次，以2次体温的平均值作为正常温度，牛奶致热处理1～3组试验兔，分别在试验兔背部皮下分点注射牛奶，3 h后，分别测其发热温度；酵母菌致热模型组于耳缘静脉注射酵母菌1.5 h后，测温度，进行相应的药物处理，并分别于用药后1、2、3、4和5 h各测体温1次，记录试验结果。

1.2.3.3观测指标观察试验兔正常体温、造模成功兔的体温和用药后1～5 h体温，试验结果以体温降幅均值和标准偏差表示（X±S）。

1.3统计学方法用SPASS13.0软件单因素方差分析（one way ANOVA）进行差异的比较。P＜0.05，表示有显著性意义。

2　结果与分析

2.1柴胡提取物栓和柴胡提取物包合物栓对牛奶模型的解热作用试验结果见表1。

表l结果显示，在家兔牛奶模型试验，与空白组相比，柴胡提取物栓、柴胡提取物包合物栓均有明显的解热作用（P＜0.05），与柴胡提取物包合物栓比较，柴胡提取物栓的解热作用较弱，差异显著（P＜0.05）。

2.2柴胡提取物栓和柴胡提取物包合物栓对酵母菌模型的解热作用结果见表2。

表2结果显示，在家兔酵母菌模型试验中，与空白组相比柴胡提取物栓和柴胡提取物包合物栓均有明显的解热作用（P＜0.05）；柴胡提取物包合物栓的解热作用强于柴胡提取物栓，差异显著（P＜0.05）。

2.3柴胡提取物栓和柴胡提取物包合物栓对两种发热模型的解热作用结果见表3。

表l柴胡提取物栓和柴胡提取物包合物栓对牛奶致热模型的解热作用比较（n=3，X±S）Table1　Com parison of the antipyretic effect of Bupleurum extract suppository and Bup leurum extract inclusion com pound suppository induced thermalmodel for m ilk ℃

表2　柴胡提取物栓和柴胡提取物包合物栓对酵母菌致热模型的解热作用比较（n=3，X±S）Table2　Com parison of the antipyretic effect of Bupleurum extract suppository and Bup leurum extract inclusion suppository on yeast induced by thermalmodel ℃

表3　柴胡提取物栓和柴胡提取物包合物栓对两种发热模型的体温平均降幅比较Table3　Comparison of the average tem perature drop of two kinds of heating models w ith the inclusion com pound suppository o f the extract o f the root of the root and the root of the root o f the root ℃

表3结果显示，柴胡提取物栓和柴胡提取物包合物栓在酵母菌致热模型的解热方面要优于牛奶模型（P＜0.05）。

2.4柴胡提取物栓和柴胡提取物包合物栓对两种发热模型的解热趋势柴胡β-环糊精包合物栓在制备过程中可有效防止挥发油的挥发，提高制剂的稳定性，并改善有效成分的溶解性，提高制剂的溶出速率和生物利用度，图示结果表明，两个模型中柴胡提取物包合物栓的解热作用较柴胡提取物栓快而稳定，家兔牛奶发热模型中各组解热趋势见图1。家兔酵母菌发热模型中各组解热趋势见图2。

3　讨论

3.1柴胡提取物栓和柴胡提取物包合物栓对发热模型的解热作用牛奶发热模型的原理是，注射牛奶后牛奶刺激局部产生强烈的炎症反应，此炎症的形成主要与其诱导前列腺素（PG）生物合成及释放有关，并激活巨噬细胞，引起发热，症状与临床“里热症”相似。酵母菌属真菌类，致热成分是全菌体及菌体内所含的荚膜多糖和蛋白质。酵母菌作用于机体可激活内生性致热原（EP）细胞产生和释放EP，EP作用于丘脑体温调节中枢，引起发热介质的释放改变调定点。制造发热模型多选择大型动物，以保持恒定的体温。但体型过大的动物操作起来困难，过小动物受外界环境影响太大，因此多选择家兔。试验时外界温度最好在20℃左右。家兔的选择，一方面选择早晚温度变化小的，弃去孕兔；另一方面应选择体重、年龄适中的家兔，年龄老的不敏感[8-9]。本试验选用家兔作为模型动物，注射牛奶和酵母菌后1 h，各注射组家兔体温都升高，模型组高温持续11.5 h，空白对照组体温没有升高，说明造模成功。在两种发热模型对比治疗试验中，柴胡提取物包合物栓的解热作用均强于柴胡提取物栓，且柴胡提取物栓和柴胡提取物包合物栓在酵母菌致热模型的解热方面要优于牛奶模型。

3.2柴胡提取物包合物栓特点用饱和水溶液制备环糊精包合物具有操作简单、易于实现工业化生产等优点。β-CD包合物可增加难溶性药物的溶解度，提高药物的稳定性。本试验研究表明柴胡提取物制成β-CD包合物后再做栓能显著提高药物的溶解度和稳定性，且有延缓释药的作用，从而满足兽医临床上的需要[10]。因此，研究应用β-CD环糊精包合技术，用于研制新产品，改进药剂处方有着良好的前景。

图1　柴胡提取物栓及柴胡提取物包合物栓对家兔牛奶发热模型的解热作用Fig.1　The antipyretic effect of suppository and extract of Bupleurum Bup leurum extract inclusion suppository in rabbits model of m ilk fever

图2　柴胡提取物栓及柴胡提取物包合物栓对家兔酵母发热模型的解热作用Fig.2　The antipyretic effect of Bup leurum extract suppository and Bupleurum extract inclusion com pound suppository in rabbits yeast fever m odel

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Com parison of the Antipyretic Effect Between Extractof Radix Suppository and β-cyclodextrin Inclusion Suppository in Rabbits

Li Li,Zhang Ling,Jiang Yue,Wang Jinl i,Li Fangbing
(Jinzhou Medical University,LiaoningJinzhou121001）

According to 2015 edition of the Veterinary Pharmacopoeia,the Radix Bupleuri ext ract and Inclusion suppository are prepared in this test,and car ries on the qual ity inspection.By yeast and mi lk caused by two kinds of heat animal model,to observe and compare the ext racts f rom radix bupleuri suppository and radix bupleuri ext raction for suppository of rabbit antipyretic effect.Rabbit 16 were randomly divided into yeast to heat and hot milk group,each process is divided into three groups,respectively,blank control group,the ext racts f rom radix bupleuri group,radix bupleuri ext raction for suppository group,each group 3 only.Resul ts showed that after the inclusion of suppository antipyretic ef fect bet ter and longer time.Research conf irms that in terms of two models of heat antipyretic,before and af ter the inclusion of drug are antipyretic ef fect on yeast model model is bet ter than mi lk.Conf irmed inclusion technology can improve the ef fect of drug stabil ity and delay the drug release,great ly improving the bioavai labi lity of drug,in the clinical appl ication value is very big,therefore,research on application of beta CD cyclodext rin inclusion technique,used in the development of new products,improve drug prescription has a good prospect.

Ext ract of Radix;Inclusion technique;Suppository;Antipyretic ef fect;Rabbit柴胡为伞形科植物柴胡Bupleurum chinense DC.或 狭 叶 柴 胡 Bupleurumscorzoneri fol ium Wil ld.的干燥根。其性味苦凉，有疏散退热、疏肝解郁、升阳举气之功效，用于治疗寒热往来，胸满胁痛等[1-2]。栓剂（Suppository）系指药物与适宜基质制成供腔道给药的制剂[3]。本研究通过对柴胡提取物栓包合前后对家兔解热作用的比较试验，对包合的作用加以研究，以此了解柴胡包合后的栓剂的实用价值，以及包合技术的广阔应用前景。

R285

B

1672-9692(2016)04-0044-05

2016-03-07

李丽（1967-），女，黑龙江哈尔滨人，教授，硕士，主要从事主要从事兽医药理毒理与新兽药研发方面的研究。

辽宁省科技厅联合基金项目（复方β-环糊精柴胡栓制备及在犬体内药代动力学研究，2013022045）。