包虫病的诊断方法与预防措施概述

2016-12-27 02:52张壮志张鲁安
草食家畜 2016年6期
关键词:棘球绦虫细粒

张 旭,赵 莉,张壮志,张鲁安*

(1.新疆兵团畜牧兽医工作总站,新疆乌鲁木齐830063;2.新疆畜牧科学院,新疆乌鲁木齐830000)

包虫病的诊断方法与预防措施概述

张 旭1,赵 莉2,张壮志2,张鲁安1*

(1.新疆兵团畜牧兽医工作总站,新疆乌鲁木齐830063;2.新疆畜牧科学院,新疆乌鲁木齐830000)

综述包虫病的相关诊断技术和预防措施研究进展。以细粒棘球绦虫的生活史、包虫病的流行现状、包虫病的检测和诊断技术以及包虫病预防与控制等方面的研究进展进行综述。随着新的诊断技术的发展为包虫病的预防和控制奠定了基础,也使得包虫病患者的早期诊断治疗措施有了重大突破;同时包虫病预防疫苗在动物实验中也收到良好的保护效果,驱虫药物的更新与研发更加深入。目前,在中国包虫病大面积高发,国力民力有限,难以付出巨大的投入,也是控制工作中的主要制约因素,探索出简便易行、投入量少、收效快的防控技术措施,也急待解决。

包虫病;细粒棘球绦虫;诊断方法;预防控制

10.16863 /j.cnki.1003-6377.2016.06.005

包虫病是因细粒棘球绦虫(Echinococcus granulosus)的中绦期幼虫寄生在中间宿主的内脏而引起的疾病,是一种可以引起牧区人民身体健康的寄生虫病,严重危害畜牧业的发展。棘球属分5种[1],其中细粒棘球绦虫(E.granulosus)的分布范围最广,危害也最为严重[2]。本文将以细粒棘球绦虫的生活史、包虫病的流行现状、包虫病的检测和诊断技术以及包虫病预防与控制等方面的研究进展作一综述。

1 细粒棘球绦虫的生活史

细粒棘球绦虫的终末宿主主要是肉食性的哺乳动物,其中最为主要的是狐狸以及犬类;中间宿主则主要是骆驼、羊、牛等偶蹄类动物,人类也是中间宿主[3]。当哺乳动物误食细粒棘球绦虫的虫卵时,孵化出的六钩蚴也会随血液循环侵入到肝脏等其他的组织。被感染的动物常因组织器官受损而丧失活动能力,严重者会发生死亡[4]。

2 包虫病的流行现状

细粒棘球绦虫具有较为广泛的宿主适应性,在世界上各大洲的牧场都有出现,但其还是主要分布在北半球,亚洲的北部、欧洲和北美洲的大部分区域都是其主要的流行区域,中国也是细粒棘球绦虫在世界上流行最为严重的国家之一。在中国由于细粒棘球绦虫引起的疾病多发生在西藏自治区、内蒙古自治区的呼伦贝尔草原地区、新疆维吾尔自治区的北部、青海省的南部高原、四川省的甘孜地区、甘肃省[5]。另外,在东北3省、河南省、山东省、安徽省、湖北省、贵州省和云南省等也有散发的病例[6]。据不完全统计分析,全国大约有50~60万人口患有包虫病,新疆维吾尔自治区是包虫病高发的西部省区之一,1990年的人体细粒棘球蚴病的年发病率为0.0087%,有的县甚至高达0.042%[7]。

3 包虫病的主要诊断方法以及检测技术

3.1 中间宿主的诊断和检测技术

卡松尼皮内试验虽然快捷、敏感,但是因为受到多种因素的影响,导致特异性低[8]。免疫印迹实验能够检测到囊性的包虫病患者血清中的识别抗原的抗原带,敏感性比较高,而且特异性达到了76.0%[9]。用间接血凝试验来监测包虫囊液含有的特异性IgM抗体,它的敏感率和特异性都高,并且具有交叉反应率低的特点[10]。而ELISA方法[11]可以同时检测同一时间段中的包虫病患者血清的IgA、IgG和IgM。

乳胶凝集实验是一种较为理想的包虫病检测方法[12],但由于包虫可以分泌许多体表可溶性抗原的影响,导致在进行抗体的检测时会呈现出阴性的结果[13]。通过逆转录PCR来扩增特异mRNA的方法则可以大大提高血清学方法检测感染棘球绦虫特异性抗体的阳性率[14]。

应用超声波[15]、X线[16]、B超[17]、CT[18]、MRI[19]可以检查到患有包虫病的包囊,发现病变脏器的不同形态变化,区分胆结石和包虫子囊阻塞胆管,甚至可以区别单房型和多房型包虫囊肿。使用血清学检查,再结合B超检查,包虫病的准确率更可高达94%。

3.2 终末宿主的诊断和检测技术

氢溴酸槟榔碱进行驱虫以及剖检是两种检查细粒棘球绦虫虫体感染的主要方法,但某些终末宿主对氢溴酸槟榔碱不敏感,同时会造成环境污染和对操作者也有感染包虫病的风险。利用麦克马斯特氏法不但可以进行细粒棘球绦虫的感染诊断,同时也可以初步估计终末宿主体内细粒棘球绦虫的感染量或者感染程度。但是,犬带科绦虫虫卵十分相似,进行鉴别诊断十分困难,只能确定犬寄生有犬带科绦虫,不能区分具体虫种。

粪抗原夹心ELISA方法可以检测感染细粒棘球绦虫粪样中虫卵的代谢抗原[20-24]。在中国一些地区的细粒棘球绦虫流行病学调查工作中已经开始应用该种检测方法。同样使用copro-PCR方法来检测在粪样(copro-DNA)中的虫体DNA也是非常新颖的。

地高辛标记探针杂交的PCR技术同样具有敏感性高、特异性强、操作简便、检测快速的特点,特别是Im-PCR技术,在特异性抗原浓度低至2 ng都能被检测出来[25],而Northern杂交技术、RNA酶的保护性分析都至少需要5mg的RNA,所以此方法是目前所有免疫定量方法都所不能及的。但与Real-time PCR和RT-DDPCR检测相比较,后者需要的RNA要更加的少,在定量终点分析的方面精准性要低[26]。

目前检测血清中特异抗体最为普遍的还是ELISA方法,可以检测到感染细粒棘球绦虫的血清中的特异抗体—Em2循环抗体[27]。分子生物学方面被用来确定基因表达的最新方法则是Real-Time PCR,可以检测到免疫后的基因表达水平、确定各种基因表达量的多少、分析免疫效应分子之间的关系。

4 包虫病的预防和控制

包虫病疫苗已经研发成功,合成疫苗的材料是体外培养六钩蚴的代谢产物,或者是致弱的活虫。这种方法在进行理论的研究、或者疫苗研发的效果评价是可以的,但是进行大范围的推广应用,首先就必须解决能够供应制备疫苗所需要的六钩蚴,因此就必须有大量的持续感染绦虫成虫的犬,以及羊或者其它的中间宿主。在新西兰制备免疫所有羊只的疫苗就要饲养25万只犬,以及大量的中间宿主。所以该疫苗的制备方法显然是不切合实际的[28]。原头蚴的体外培养研究,建立体外培养的平台,就可以不用受制与细粒棘球绦虫的特异性抗原,从而为研制包虫病疫苗开展免疫预防奠定基础,同时也能观察到原头蚴的发育和代谢,为筛选驱虫药物提供有利的条件[29]。

把细粒棘球蚴的原头蚴进行匀浆后得到纯净的可溶性抗原免疫试验犬,免疫一次就能够抑制74.1%的孕节产生,免疫三次能够抑制100%的孕节产生[30],机体也产生对细粒棘球绦虫较强的抗感染能力。用EgM9蛋白免疫接种犬后,也可以使肠道内虫体发育迟缓,减卵率达97.7%。肠道内虫体发育迟缓使得虫卵产生减少,这样就切断了细粒棘球绦虫的生活史,达到了控制包虫病的目的,在流行病学上具有重要的意义。

经过对诱食药饵配方的改良加工,应用制药新工艺中的新型掩味技术,研发出“爱普锐克—食肉动物自动吞食片”[31-32],家/牧犬的自动吞食率提高到了95%,驱虫率也能达到100%,该药既降低了驱虫药投喂过程中的危险,又达到驱虫的目的。

长期以来,各个国家都在坚持综合防控治理(详见图1),坚持“以预防为主要方面,预防重于治疗”的基本方针指导下控制包虫病,实施屠宰管制、家/牧犬的驱虫管理等综合防控措施,双向的切断细粒棘球绦虫循环链的方法,使得绵羊棘球蚴的感染率大幅下降[33-36]。虽然防控工作都获得了良好的效果,但是历经时间漫长,消耗代价相当昂贵,难度也十分巨大。

图1 各国控制成年绵羊棘球蚴病进展示意图

在新疆的呼图壁县和温宿县通过以家/牧犬的驱虫管理为中心的控制措施[37]。每只犬每月驱虫一次,同时配合人员的培训、宣传教育、组织的领导监督等,使得两县的犬细粒棘球绦虫感染率下降为0,较防控手段实施以前,绵羊子代的感染率下降了85%,防控工作取的重大突破,这些都足以证明以消灭包虫病传染源为主的控制策略是成功的。

对人而言,不管是手术摘除包囊还是口服阿苯哒唑类、甲苯咪唑类药物都会对机体产生较大的损伤,对易感动物而言,使用抗寄生虫药物虽然能减少感染的机率,但仍然需要反复多次的投喂药物,药物有效浓度降低后动物又会再次被感染。所以有效的控制包虫病的流行最有效的方法还是使用疫苗。通过目前对Eg95的大量研究表明,其对中间宿主的是具有保护力的[38]。从做好包虫病的有效预防和控制的角度看,作为终末宿主的犬在此病的循环链中是非常重要的一个环节,所以检测并扑杀感染细粒棘球绦虫的犬,研制更方便、高效的犬用预防细粒棘球绦虫感染的疫苗急需得到更新。利用包囊生发层和原头蚴的杀伤技术手段,对改变目前的防控原理,突破控制周期的限定,也具有很大的研究意义。目前,在我国包虫病大面积高发,国力民力有限,难以付出巨大的投入,也是我们控制工作中的主要制约因素,探索出简便易行、投入量少、收效快的防控技术措施,也急待解决。

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The Diagnosis of Hydatid Disease And Preventive M easures

ZHANG Xu1,ZHAO Li2,ZHANG Zhuang-zhi2,ZHANG Lu-an1*
(1.Animal Hushandry and Veterinary Station of Xinjiang Production and Construction Corps,Urumqi830063, China;2.Veterinary Research Institute,Xinjiang Academy of Animal Science,Urumqi830000 China)

Research progress of diagnosis technology and related preventive measures of hydatid disease.In the life history of Echinococcus granulosus hydatid disease,epidemic situation,hydatid disease detection and diagnosis technology of hydatid disease prevention and control and other aspects of the research are reviewed in this paper.With the development of new diagnostic techniques have laid the foundation for the prevention and control of hydatid disease,make early diagnosis and treatmentmeasures of hydatid disease has been a major breakthrough in the prevention of hydatid disease vaccine;at the same time also received a good protective effect in animal experiments,update and research of anthelmintic drugsmore in-depth.At present, in our country a large area of high incidence of hydatid disease,their strength is limited,it is difficult to pay a huge investment,we also control the main restricting factors in the work,explore prevention measures is simple,less investment,fasteffect,also need to be solved.

Hydatid disease;Echinococcus granulosus;diagnosis;prevention and control

S855.9

A

1003-6377(2016)06-0021-05

支撑项目:兵团英才专项基金

张旭(1984-),男,兽医硕士,兽医师,主要从事动物疫病预防控制及检测工作。E-mail:59951178@qq.com

简介:张鲁安(1971-),男,兽医硕士,推广研究员,主要从事动物疫病预防控制工作。E-mail:59951178@qq.com

2016-09-20,

2016-09-25

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