C-erB-2、ER、PR在子宫内膜癌中的表达及意义

商庆花 赵岭岭 刘俊芳 吴春平 李景光 刘艳彩

(1.衡水市第四人民医院病理科；2.衡水市第五人民医院病理科，河北 衡水 053000)

C-erB-2、ER、PR在子宫内膜癌中的表达及意义

商庆花1赵岭岭1刘俊芳2吴春平1李景光1刘艳彩1

(1.衡水市第四人民医院病理科；2.衡水市第五人民医院病理科，河北 衡水 053000)

目的 探讨雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)及第二人体表皮生长因子受体(C-erB-2)在子宫内膜癌中的表达及意义。方法 应用免疫组化SP法检测三者在30例正常子宫内膜、30例子宫内膜息肉及86例子宫内膜癌组织中的表达水平，分析其临床意义及相关性，并将其与子宫内膜癌手术病理分期、组织细胞学分化程度、肌层浸润深度、淋巴结转移等高危因素进行分析。结果 (1)C-erB-2、ER及PR在正常子宫内膜、子宫内膜息肉和子宫内膜癌中的阳性表达率组与组之间差异均有统计学意义(P<0.05)。(2)C-erB-2阳性表达与手术病理分期、组织细胞学分级及淋巴结转移相关(P<0.05);ER阳性表达与手术病理分期、组织细胞学分级及肌层浸润相关(P<0.05);PR与组织细胞学分级、肌层浸润及淋巴结转移相关(P<0.05)。(3)C-erB-2 与 ER的表达呈负相关(r=-0.247，P<0.05)， ER与PR的表达呈正相关(r=0.756，P<0.05)。结论 在子宫内膜癌中，C-erB-2、ER及PR联合检测可作为早期诊断、指导内分泌治疗及判断预后的重要指标。

子宫内膜腺癌； 第二人体表皮生长因子受体； 雌激素受体； 孕激素受体； 免疫组化

子宫内膜癌为女性生殖道常见三大恶性肿瘤之一，是一种激素依赖性肿瘤， 其肿瘤细胞中存在雌激素受体(ER)及孕激素受体(PR)，且第二人体表皮生长因子受体(C-erB-2)在细胞的生长、增殖以及分化过程中起重要作用，故C-erB-2的过度表达与肿瘤的恶性程度有一定相关性。有研究[1]发现，在绝经妇女子宫内膜息肉组织中C-erB-2蛋白过度表达，C-erB-2作为促进细胞增殖的基因，使子宫内膜息肉在低雌激素的状态下也能正常生长，这与绝经后子宫内膜息肉的高恶变率相关。近来在世界范围内的发病率有上升趋势，具有年轻化趋势且多数研究认为子宫内膜息肉与子宫内膜癌的发病密切相关。对子宫内膜癌患者预后有显著影响的因素较多，如病理类型、癌瘤生物学恶性程度等，它们常同时存在或相互影响[2]。本研究检测C-erB-2、ER、PR在子宫内膜癌、子宫内膜息肉及正常子宫内膜中的表达，以探讨子宫内膜腺癌可能的发病机制和影响预后的因素。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选择我院2008年10月至2015年1月子宫内膜癌患者86例，年龄31～68岁，平均51．5岁；术前未行放、化疗及激素治疗；手术病理分期采用 2009年国际妇产科联盟(FIGO )标准：Ⅰ期44例、Ⅱ期30例、Ⅲ+Ⅵ期12例；G1级30例、G2级27例、G3级29例；无浸润 6 例，浸及浅肌层(<1/2)52 例，深肌层和浆膜浸润(≥1/2)28例；无淋巴结转移64例，有淋巴结转移22例；另取子宫内膜息肉30例患者，年龄37～69岁；正常子宫内膜30例患者，年龄36～70岁。

1.2 主要试剂及方法 鼠抗人 C-erB-2单克隆抗体、兔抗人 ER 单克隆抗体、兔抗人 PR 单克隆抗体、免疫组化 SP 染色试剂盒、DAB 酶底物显色试剂盒均购自福州迈新生物技术开发有限公司。采用免疫组化SP 法检测C-erB-2、ER、PR的表达，各步骤操作按说明书。进行本实验以PBS代替一抗作为阴性对照。

1.3 判断结果 在显微镜下观察细胞着色的程度，C-erB-2 以胞浆和胞膜呈棕黄色为阳性，ER、PR均以细胞核内存在棕黄色颗粒为阳性，标准：阳性细胞表达数≤5%阴性(-)，6%～ 25%弱阳性(+)，26%～50%中度阳性(++)，>50%强阳性(+++)。

1.4 统计学处理 采用 SPSS 19.0统计软件，C-erB-2、ER、PR 均为计数资料，采用χ2、四格表资料确切概率法及 Spearman 秩和检验。P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 C-erB-2蛋白免疫组化结果 (1)着色部位：C-erB-2蛋白主要分布于细胞浆，少量分布于细胞膜(图1a)。(2)C-erB-2在正常子宫内膜、子宫内膜息肉、子宫内膜癌中的阳性表达率，3组间差异均有统计学意义(P<0.05)(表1)。(3)C-erB-2阳性表达在手术病理Ⅰ、Ⅱ期与Ⅳ期；组织细胞分级Ⅰ级与Ⅲ级；淋巴结是否转移之间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。C-erB-2蛋白阳性与肌层浸润深度差异无统计学意义(P>0.05)(表2)。

2.2 ER、PR蛋白免疫组化结果 (1)着色部位：ER 、PR蛋白分布在细胞核(图1b，c)。(2)ER 、PR在正常子宫内膜组织、子宫内膜息肉组织及子宫内膜癌组织中的阳性表达率呈下降趋势，且子宫内膜癌组与正常子宫内膜组及子宫内膜息肉组比较，差异有统计学意义(P<0.05)，正常子宫内膜组及子宫内膜息肉组比较，差异无统计学意义(P>0.05)(表1)。(3)ER的阳性表达率与淋巴结转移无相关性(P>0.05)；PR阳性表达率随临床分期增高而降低，但差异无统计学意义(P>0.05)，而其阳性表达率随组织细胞学分级增高、肌层浸润深度加深及淋巴结转移率增加而下降，差异有统计学意义 (P<0.05) 。见表2。

C-erB-2 与 ER的表达呈负相关(r=-0.247，P<0.05)， ER与PR的表达呈正相关(r=0.756，P<0.05)，其它因子间相关性差异无统计学意义。

图1 C-erB-2、EP、PR蛋白免疫组化结果

组别nC⁃erB⁃2阳性阴性P值ER阳性阴性P值PR阳性阴性P值正常子宫内膜组302(6．67)28(93．33)<0．05∗29(96．67)1(3．33)<0．05∗28(93．33)2(6．67)<0．05∗子宫内膜息肉组308(26．67)22(73．33)<0．05∗∗25(83．33)5(16．67)<0．05∗∗23(76．67)7(23．33)<0．05∗∗子宫内膜癌组8652(61．21)34(38．79)<0．05∗∗∗57(67．06)29(32．94)<0．05∗∗∗55(64．71)31(35．29)<0．05∗∗∗

注：*正常子宫内膜组与子宫内膜息肉组比较；**子宫内膜息肉组与子宫内膜癌组比较；***正常子宫内膜组与子宫内膜癌组比较。

表2 C-erB-2、ER、PR的表达和临床病理特征的关系

注：*P>0.05。

3 讨 论

C-erB-2基因属于生长因子受体家族，存在于细胞膜且可跨越细胞膜内外双侧，具有酪氨酸蛋白激酶活性，可激活信使系统，将外界信号传递至细胞内。研究[3]发现，在正常的子宫内膜组织中C-erB-2呈无表达或低表达，表达强度仅呈弱阳性，而从子宫内膜息肉到子宫内膜癌，其组织细胞中C-erB-2的阳性表达率则呈逐渐增高的趋势[4]。Lambropoulou等[5]研究发现，42.7%的子宫内膜癌患者有C-erB-2蛋白的过度表达。本研究中C-erB-2在子宫内膜癌中阳性表达率显著高于正常子宫内膜及子宫内膜息肉，提示在子宫内膜癌的发生中C-erB-2可能起一定作用，C-erB-2基因与子宫内膜癌的早期发生有关，如发现其过度表达则需动态观察、早期干预、积极治疗，如其在短期内急剧升高，极有可能发展成内膜癌。当C-erB-2发生扩增或异常过度表达时，可出现细胞生长失控，产生侵袭性肿瘤细胞， 并阻止肿瘤细胞凋亡，甚至促进其生长，从而导致细胞对激素治疗和化疗药物的抵抗力增强[6]。 本研究发现C-erB-2的阳性表达率随手术病理分期增加、组织细胞学分级增高、淋巴结转移而增加，提示C-erB-2的过度表达及扩增与肿瘤的浸润转移、恶性程度及预后有一定相关性，说明C-erB-2癌基因在某些致癌因子的作用下被激活，而导致肿瘤细胞的增殖失控，呈活跃增殖状态。C-erB-2定位于细胞表面， 使其成为抗肿瘤治疗的理想靶位点。

ER和PR主要是在子宫内膜中的表达。ER导致内膜增生，对子宫内膜的影响表现为子宫内膜的增生和血管增殖，形成息肉[7]。PR的作用则是使子宫内膜从增生期转为分泌期，从而拮抗内膜发生癌变。ER、PR均存在于靶细胞核内，引起基因活化、转录系统启动，在新mRNA 引导下合成新的蛋白质，以其特殊的生物学活性调节细胞的生长和代谢。当子宫内膜细胞发生癌变后，ER、PR生物学活性开始丧失，这可能是由于癌基因的激活或抑癌基因的突变阻碍了正常基因的表达及酶的功能，使受体失去活性。目前国内外关于 ER、PR与子宫内膜癌预后的研究甚多，Jongen 等[8]发现就早期子宫内膜癌患者无病生存期而言，PR的缺乏是独立的预后因素，而ER阳性患者其整体生存期较好。本研究结果显示，ER、PR 在正常子宫内膜组织、子宫内膜息肉组织及子宫内膜癌组织中的阳性表达率呈下降趋势，且子宫内膜癌组与正常子宫内膜组及子宫内膜息肉组比较，差异有统计学意义(P<0.05)，从而提示子宫内膜ER、PR的进一步丢失与增加细胞恶性转变有关，且在子宫内膜发生病变的过程中，可能会逐步失去 ER、PR 的表达。随着组织细胞学分级、肌层浸润及淋巴结转移发生率的增加，ER、PR的阳性表达率呈下降趋势，且与组织细胞学分级及肌层浸润深度呈负相关(P<0.05)，但与手术病理分期关系差异无统计学意义(P>0.05)。提示子宫内膜癌中的 ER、PR 的含量可在一定程度上反映肿瘤的分化程度，而肿瘤的发展则会逐步失去 ER、PR 的表达，说明 ER、PR的缺失与细胞恶性程度上升、侵袭性增加及向非激素依赖型肿瘤转化有关。ER、PR的存在提示肿瘤细胞对激素的刺激有一定的反应能力，是内分泌抗雌激素治疗的理论基础，同时其失表达会导致肿瘤对激素治疗的效果差，预后不良。

多数研究显示ER、PR成正相关，李惠[9]研究发现C-erB-2 与 ER、PR 表达相关。本结果显示，C-erB-2 与ER的表达呈负相关，ER与PR的表达呈正相关，说明在子宫内膜癌变过程中，C-erB-2、ER及 PR之间可能存在着极其复杂的关系，C-erB-2的表达可破坏抗雌激素活性，从而导致ER、PR的下调甚至缺失以及侵袭性表型的获得。本研究提示C-erB-2、ER及PR的异常表达，在子宫内膜癌的发生、发展中起重要作用，对良恶性肿瘤的鉴别诊断有一定临床意义，因此推测C-erB-2、ER及PR可能是一个免疫因子组合，其联合检测可作为子宫内膜癌早期诊断及预后评估的重要指标。

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·实验研究·

Expression and clinical significance of C-erbB-2, ER and PR in adenocarcinoma of endometriuin

ShangQinghua1,ZhaoLingling1,LiuJunfang2,WuChunping1,LiJingguang1,LiuYancai1.

1.DepartmentofPathology,theFourthHospitalofHengshuiCity,Hengshui053000,China. 2.DepartmentofPathology,theFifthHospitalofHengshuiCity,Hengshui053000,China.

Objective To explore the expression of human epidermal-growth factor receptor 2 (C-erB-2), estrogen receptor (ER) and progesterone receptor(PR) in endometrial carcinoma and their relationship．Methods Immunohistochemical analyses of ER、PR and C-erB-2 were performed in 30 cases of normal endometrium, 30 cases of endometrial polyps and 86 cases of ndometrial carcinoma cases．The relationship between expression rate and stage of pathology，histoogical grade，myometrial invasion，lymph node metastasis was analyzed．Results There were statistical significantly differences that the positive expression rate between in the groups for the C-erB-2 in normal endometrium, endometrial polyps and endometrial carcinoma were significant differences among them (P<0.05). There were significant correlation compared with the positive expression of C-erB-2, stage of surgical-pathologic, grade of histocytology, and lymph node metastasis(P<0.05). The positive expression of ER was significant correlated with stage of surgical-pathologic, grade of histocytology, and degree of myometrial invasion (P<0.05). The positive expression of PR was significant correlation with histocytology, and degree of myometrial invasion (P<0.05). The expression of C-erB-2 was negatively correlated with the expression of ER in endometrial carcinoma (r=-0.247，P<0.05)； The expression of ER was positively correlated with the expression of PR in endometrial carcinoma (r=0.756，P<0.05)．Conclusion The abnormal expression of C-erB-2、ER and PR plays an important role in the occurrence and development of endometrial carcinomas. Both of them may be used as the important index of early diagnosis, guiding therapy of endocrine and judgment of the prognosis of endometrial carcinoma.

Endometrial carcinoma； C-erB-2； Estrogen receptor； Progesterone receptor； Immunohistochemistry

R737.33

A

1000-744X(2016)04-0362-03

2015-08-20)