2015年新疆食源性金黄色葡萄球菌污染状况及耐药性分析

苏 静，武 运，杨勤德，马 鑫，于 烽，刘 艳，远雪梅

（1.新疆农业大学食品科学与药学学院，新疆乌鲁木齐 830052；2.新疆维吾尔自治区疾病预防控制中心，新疆乌鲁木齐 830001）

2015年新疆食源性金黄色葡萄球菌污染状况及耐药性分析

苏 静1，2，*武 运1，杨勤德2，马 鑫2，于 烽2，刘 艳2，远雪梅2

（1.新疆农业大学食品科学与药学学院，新疆乌鲁木齐 830052；2.新疆维吾尔自治区疾病预防控制中心，新疆乌鲁木齐 830001）

2015年从新疆地区14个地（州、市）市售7类940份食品中，共分离得到49株金黄色葡萄球菌，阳性率为5.21%。除调味品、烘焙及油炸类食品未检出外，熟肉制品、肉与肉制品、餐饮食品、地方特色食品、乳与乳制品的检出率分别为10.00%，7.89%，6.25%，5.00%，2.86%。同时，从分离得到的49株金黄色葡萄球菌菌株中共检出36株耐药菌，耐药率为73.47%，其中1株为6重耐药的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA），其余35株为单一或多重耐药的甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌（MSSA）。对抗生素的耐药率从高到低依次为红霉素（ERY）57.14%，克林霉素（CLI）53.06%，四环素（TET）46.94%，环丙沙星（CIP）24.49%，庆大霉素（GEN）8.16%，苯唑西林（OXA）2.04%，头孢西丁（CFX）2.04%，甲氧苄啶/磺胺甲噁唑（SXT）2.04%，万古霉素（VAN）0，达托霉素（DAP）0，氯霉素（CHL）0。

食源性致病菌；金黄色葡萄球菌；污染状况；耐药情况；食品安全

0 引言

食品安全已成为全球重要的公共卫生问题，食源性致病菌对健康危害越来越引起人们的关注。金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus） 是引起食物中毒的主要致病菌之一[1]。据报道，2006年在美国由于金黄色葡萄球菌引起的食物中毒有29起，在细菌性食物中毒事件中居第3位。我国每年发生的此类食物中毒事件也非常多，全国各地均有报道[2]。近年来，随着各类广谱、高效抗生素的大量临床应用，金黄色葡萄球菌的耐药性也发生了很大变化。细菌的耐药出现不仅给临床及兽医用药带来了麻烦，重要的是其耐药性还可通过食物链传播，临床细菌的耐药性与食物中细菌的耐药性直接相关。多重耐药金黄色葡萄球菌的出现，已危及到对该菌引发食源性疾病的控制[3]。目前，新疆地区在食品中金黄色葡萄球菌流行性情况尚缺乏充足的数据。为了了解新疆食源性金黄色葡萄球菌的污染状况及耐药趋势，并为细菌性食源性疾病的治疗、耐药性传播的防控提供科学依据。根据2015年国家食品安全风险监测方案，对新疆14个地（州、市）市售的7类食品进行金黄色葡萄球菌检测，同时对分离到的金黄色葡萄球菌菌株进行耐药性分析。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 样品及标准菌株

样品采自新疆地区14个地（州、市）的农贸市场、食品超市等市售食品，包括乳与乳制品、肉与肉制品、熟肉制品、调味品、烘焙及油炸类食品、餐饮食品、地方特色食品共7类940份食品样品，采样时间集中在2015年4月-11月。

质控菌株为金黄色葡萄球菌（ATCC 29213），为国家食品安全风险评估中心配发。

1.1.2 主要仪器及试剂

VITEK 2 COMPACT型全自动微生物生化鉴定仪、GP型革兰氏阳性细菌鉴定卡、Thermo型生物安全柜、SANYO MCO186T型恒温培养箱、Leica型电子显微镜、Sensititre AIM型全自动药敏试验菌液接种仪、Sensititre Vizion型全自动药敏试验菌液判读仪、Sensititre PRCFSRA型革兰氏阳性非苛养菌的MIC药敏板；Sensititre型CAMHBT肉汤、脑心浸液琼脂培养基、脑心浸液肉汤、血浆凝固酶试剂、Baird-Parker琼脂平板、血琼脂平板、7.5%氯化钠肉汤。

1.2 试验方法

1.2.1 分离鉴定

金黄色葡萄球菌的分离鉴定，参照《2015年国家食品污染和有害因素风险监测工作手册》中金黄色葡萄球菌检验标准操作程序[4]。将样品接种在7.5%氯化钠肉汤中，于36℃条件下培养24 h。取增菌液划种Baird-Parker平板及血平板，于36℃条件下培养24 h。挑取可疑菌落进行涂片染色、溶血试验及血浆凝固酶试验，最后用全自动微生物生化鉴定仪（VITEK 2 COMPACT型）进行验证。

1.2.2 药敏试验

根据临床与实验室标准化协会（Clinical and Laboratory Standards Institute，CLSI） 推荐的微量肉汤稀释法，定量测定致病菌的最低抑菌浓度（Minimal inhibitory concentration，MIC）。将质控菌株和备检菌株分别接种于脑心浸液琼脂培养基，于36℃条件下纯培养24 h。挑取3～5个纯菌落，均匀悬浮于去离子水中制成0.5麦氏菌悬液。将菌悬液与CAMHBT肉汤通过全自动药敏试验菌液接种仪接种在革兰氏阳性非苛养菌的MIC药敏板上，药敏板用塑料膜封好，置于湿盒中，于36℃条件下纯培养24 h。采用全自动药敏试验菌液判读仪，对MIC药敏板进行判读分析。参考国内外常用抗生素种类、既往耐药监测结果，根据CLSI文件M100-S24推荐的药敏试验抗生素选择原则确定耐药监测的抗生素，确定了β-内酰胺类、多肽类、林可霉素类、四环素类、脂肽类、大环内酯类、酰胺醇类、氟喹诺酮类、磺胺类、氨基糖苷类共计10类抗生素中的11种，其中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）鉴定用头孢西丁代替甲氧西林，耐头孢西丁的金黄色葡萄球菌即是MRSA。

2 结果与分析

2.1 金黄色葡萄球菌检出情况

检测的940份样品包括乳与乳制品、肉与肉制品、熟肉制品、调味品、烘焙及油炸类食品、餐饮食品、地方特色食品共7类食品，共检出金黄色葡萄球菌49株，检出率为5.21%。除调味品、烘焙及油炸类食品外，熟肉制品、肉与肉制品、餐饮食品、地方特色食品、乳与乳制品均检出金黄色葡萄球菌，检出率分别为10.00%，7.89%，6.25%，5.00%，2.86%。

2015年新疆地区金黄色葡萄球菌检出情况见表1。

表1 2015年新疆地区金黄色葡萄球菌检出情况

2.2 金黄色葡萄球菌耐药情况

分离得到的49株金黄色葡萄球菌中共检出36株耐药菌，耐药率为73.47%。对11种抗生素耐药率从高到低依次为红霉素（ERY） 57.14%，克林霉素（CLI）53.06%，四环素（TET）46.94%，环丙沙星（CIP）24.49%，庆大霉素（GEN）8.16%，苯唑西林（OXA）2.04%，头孢西丁（CFX）2.04%，甲氧苄啶/磺胺甲噁唑（SXT）2.04%，万古霉素（VAN）0，达托霉素（DAP）0，氯霉素（CHL）0。

49株金黄色葡萄球菌对11种抗生素耐药情况见表2。

表2 49株金黄色葡萄球菌对11种抗生素耐药情况

2.3 金黄色葡萄球菌耐药谱结果

49株金黄色葡萄球菌中有1株为耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA），48株为甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌（MSSA）。其中，1株的MRSA为6重耐药，占MRSA菌株数100%；48株MSSA中有13株对所选11种抗生素都敏感，其余35株为单一或多重耐药。其中，2株为5重耐药，占MSSA菌株数4.16%；6株为4重耐药，占MSSA菌株数12.5%；10株为3重耐药，占MSSA菌株数20.83%；9株为双重耐药，占MSSA菌株数18.75%；8株为单一耐药，占MSSA菌株数16.67%。

49株金黄色葡萄球菌对11种抗生素耐药谱见表3。

表3 49株金黄色葡萄球菌对11种抗生素耐药谱

3 结论与讨论

通过对国家食品安全风险监测方案选定的市售7类940份食品中金黄色葡萄球菌的检测，发现新疆地区市售食品中存在金黄色葡萄球菌的污染，且不同来源之间金黄色葡萄球菌检出率存在差异。在乳与乳制品、肉与肉制品、熟肉制品、餐饮食品、地方特色食品中均有检出，而在调味品、烘焙及油炸类食品中未检出。其中，熟肉制品检出率最高，为10.00%。随着生活节奏的加快和生活方式的改变，在人们的日常膳食结构中方便快捷的食物（如熟肉制品）所占比例越来越高[5]。熟肉制品由于大多为经营者自己制作，且在加工与消费过程中，极易被致病菌污染。其次，肉与肉制品检出率为7.89%，餐饮食品6.25%，地方特色食品5.00%，乳与乳制品2.86%，这些均为动物源性食品，表明动物性食品中金黄色葡萄球菌有较高的检出率，这与国内外有关报道相符[6]。由于新疆地区的饮食习惯以肉与肉制品为主，而肉制品中较高的金黄色葡萄球菌污染应引起食品卫生管理部门的高度重视。

食源性致病菌的耐药性对食品安全及人类健康的影响已经引起很多国家的警惕，细菌耐药性的产生，尤其是多重耐药菌的出现并广为传播是当今医学界的难题，食物链是细菌耐药性的产生与播散的重要环节之一[7]。大量抗菌药作为疾病感染防治和激素被滥用于饲料中，从而影响了动物肠道正常菌群并刺激耐药菌的复制，动物排泄物中的抗菌药和耐药菌株排入环境中通过食物链传播[8]。通过对2015年新疆地区市售食品中分离到的49株金黄色葡萄球菌进行耐药性分析，结果显示49株金黄色葡萄球菌中对11种抗生素共检出36株耐药菌，耐药率为73.47%。其中，对四环素（TET）、克林霉素（CLI）、红霉素（ERY）耐药率均接近或超过50%，依次为46.94%，53.06%，57.14%。同时，也呈现出多重耐药性，双重及双重以上耐药菌株28株，占耐药菌株总数的77.78%；出现1株6重耐药，为耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）。众所周知，MRSA感染的治疗是临床十分棘手的难题之一，关键是其对许多抗生素有多重耐药，因其耐药机制是PBPs（青霉素结合蛋白）性质的改变。因此，MRSA几乎对所有的β-内酰胺类抗生素耐药，且在同时还可能对大环内酯类抗生素、氨基糖苷类抗生素等多种抗菌药物表现出耐药性。长期以来，万古霉素是治疗MRSA感染的基石和金标准，耐万古霉素的MRSA被列为未来10年的超级耐药细菌，而此次研究中虽然没有万古霉素（VAN）耐药株出现，但出现的1株万古霉素（VAN）中介株也应当引起研究人员的重视。

此次研究为新疆地区食源性金黄色葡萄球菌污染状况分析及耐药性趋势研究积累了数据，同时也为相关部门为做好食源性疾病的预防和控制工作提供一定指导意义。

[1]李光伟，潘孝仁，Lillioja S，等.检测人群胰岛素敏感性的一项新指数 [J].中华内科杂志，1993，32（10）：656-660.

[2]吴剑阁，刘英豪，楼萍，等．一起由金黄色葡萄球菌肠毒素引起群体性食物中毒的病原学分析 [J].现代预防医学，2011，38（8）：1 424-1 425．

[3]王迪，张晓媛，陈倩，等.北京市食源性金黄色葡萄球菌耐药及分子分型研究 [J].中国食品卫生杂志，2014，26（5）：428－434.

[4]杨大进，李宁，蒋定国，等.2015年国家食品污染和有害因素风险监测工作手册 [M].北京：中国标准出版社，2015：754-772.

[5]闻剑，梁辉，戴光伟，等.2008-2011年广东省熟肉制品中常见食源性致病菌污染状况分析 [J].中国食品卫生杂志，2013，25（1）：68－70.

[6]贺连华，王瑞端，陈妙玲，等.食品中金黄色葡萄球菌的肠毒素检测及耐药性 [J].职业与健康杂志，2006，22（15）：1 173-1 174.

[7]Hennign Somm，Trine Marie L，Abee-Lund.Antibiotic resistance in food-related bacteria-a result of interfering with the global web of bacteria genetics[J].International J Food Microbiol，2002，78：43-56.

[8]周藜，周倩，朱玫．贵州省食源性金黄色葡萄球菌肠毒素及耐药分析 [J]．中国卫生检验杂志，2014，24（22）：3 318－3 320．◇

Pollution Condition and the Analysis of Drug Resistance of Foodborne Staphylococcus Aureus in Xinjiang in 2015

SU Jing1，2，*WU Yun1，YANG Qinde2，MA Xin2，YU Feng2，LIU Yan2，YUAN Xuemei2

（1.School of Food Science and Pharmacy，Xinjiang Agricultrual University，Urumqi，Xinjiang 830052，China；2.Xinjiang Uygur Autonomous Region Center for Disease Control and Prevention，Urumqi，Xinjiang 830001，China）

There are 49 Staphylococcus aureus strains are isolated from 940 foods in 7 kinds groceries from 14 areas in 2015，and the，positive rate is 5.21%.In addition to the condiments，baked and fried foods have no pollution，cooked meat products，meat and meat products，food，local characteristics food，milk and dairy products are 10.00%，7.89%，6.25%，5.00%，2.86%.At the same time，36 strains of drug-resistant bacteria detection resistant rate of 73.47%are isolated from the 49 strains of Staphylococcus aureus strains.1 for 6 drug-resistant strains of methicillin-resistant Staphylococcus aureus（MRSA），and the remaining 35 for single or multiple drug-resistant strains of methicillin sensitive Staphylococcus aureus（MSSA）.Irologic resistance to antibiotics from high to low are erythromycin（ERY）57.14%，clindamycin 53.06%（CLI），tetracycline（TET） and ciprofloxacin（CIP） 46.94%to 24.49%，gentamicin（GEN） 8.16%，benzene azole westwood（OXA）and cefoxitin provided（CFX）are 2.04%，2.04%，methyl benzyl oxygen organism/sulfamethoxazole（SXT）2.04%，vancomycin（VAN）0，toxin（DAP）0，chloramphenicol（CHL）0.

foodborne pathogenic bacteria；Staphylococcus aureus；pollution condition；drug resistance；food safety

TS201.3

A

10.16693/j.cnki.1671-9646（X）.2017.01.018

1671-9646（2017）01a-0066-03

2016-11-21

新疆自治区科技支撑项目（201431113）。

苏 静（1981— ），女，在读硕士，主管技师，研究方向为食品安全。*

武 运（1965— ），女，硕士，教授，研究方向为食品生物技术。