国产马波沙星注射液在母猪体内的药代动力学

岳永波，吴好庭，范小平，杨芳，刘波，李天云

(1．保定冀中药业有限公司河北省中兽药工程技术研究中心，河北保定071500;2．中国兽医药品监察所，北京海淀100081;3．海南省兽药饲料监察所，海南海口570203)

国产马波沙星注射液在母猪体内的药代动力学

岳永波1，吴好庭2，范小平3，杨芳1，刘波1，李天云1

(1．保定冀中药业有限公司河北省中兽药工程技术研究中心，河北保定071500;2．中国兽医药品监察所，北京海淀100081;3．海南省兽药饲料监察所，海南海口570203)

为了考察国产马波沙星注射液在母猪体内的药动学数据，给临床用药提供依据。选用18头健康长白、大白母猪(体重222．0±31．9 kg)，随机分为2组，分别以每千克体重2．0 mg的剂量静脉注射或肌肉注射马波沙星注射液。在给药前后按设计时间点从母猪前腔静脉采集血液，离心后取上清液，用反相高效液相色谱法(HPLC)测定血浆中药物的浓度，采用美国Pharsight公司药动学软件Winnonlin5．2．1的非房室模型来处理血浆药物浓度－时间数据。结果:主要药动学参数分别为:(1)肌肉注射马波沙星注射液:MRT(20．20±3．71)h;t1/2"(21．09±5．18)h;AUC(32．94±4．41)μg/h·mL;tmax(1．72±0．97)h;Cmax(1．90±0．69)μg/mL，生物利用度(F)为80．2%;(2)马波沙星注射液静注:MRT(18．94±4．10)h;t1/2"(17．70±4．59)h;AUC(41．07±13．02)μg/h·mL;Vd(1．23±0．33)L/kg。表明:在健康母猪体内，马波沙星肌肉注射给药的主要药动学特征为:吸收迅速完全，消除缓慢，生物利用度高。

马波沙星注射液;药动学;母猪;HPLC法

马波沙星(marbofloxacin MBF)属第3代喹诺酮类抗菌药物，具有抗菌谱广、消除半衰期长、生物利用度高的特点，以马波沙星为主成分的注射液已在欧盟、新西兰、日本等国家被批准用于兽医临床，主要用于治疗母猪的乳房炎－子宫炎－无乳综合征(MMA)以及牛细菌性呼吸道感染的治疗［1-2］。

马波沙星在猪、羊、鸡、犬体内的药动学特征研究［3-6］表明，该药内服及非肠道给药吸收迅速且完全，分布广泛，血浆及组织中的浓度高，消除半衰期长，生物利用度高。这些优良的特性决定了马波沙星在防治畜禽感染方面具有巨大潜力。目前，国内还未见有关马波沙星在母猪体内的药动学研究报道。本试验探讨了健康母猪肌肉注射、静脉注射马波沙星的药物动力学过程及药动学特征，旨在为兽医临床制定合理的给药方案提供理论依据。

1 材料与方法

1．1 动物健康长白、大白母猪18头，试验前按常规饲养，自由饮水和采食，饲料为全价日粮(不含抗菌药物)，观察两周，确认健康后，随机分为2组，A组9头，B组9头。

1．2 药品与试剂自制10%马波沙星注射液;马波沙星对照品:含量99．0%，德国Dr．Ehrenstorfer GmbH公司产;甲酸、三乙胺等均为国产分析纯试剂;甲醇、乙腈，色谱纯级，美国Fisher Scientific公司。

1．3 仪器高效液相色谱仪:ACQUITY UPLC型，美国WATERS公司;色谱柱:Gemini C18(4．6mm× 250mm，5μm)，不锈钢柱，广州菲罗门科学仪器有限公司;台式高速离心机:Centrifuge5804，德国EPPENDORF公司;旋涡混合器:XW－80A，上海青浦沪西仪器厂。

1．4 给药和血样采集10%马波沙星注射液，A组颈部肌肉注射、B组耳缘静脉注射，以每千克体重2．0 mg剂量，单次给药。给药前采空白血样，肌肉注射给药后0．167、0．25、0．5、0．75、1、1．5、2、3、4、6、9、12、16、24、36、48、72、96 h分别采集血液样品;静脉注射给药后0．083、0．167、0．25、0．5、0．75、1、1．5、2、3、4、6、9、12、16、24、36、48、72、96 h分别采集血样;猪只站立式保定，颈静脉采血，每次采血5 mL左右。采集静脉血置于含0．5%肝素钠的离心管中，混匀，3 000 r/min，离心10 min，分离血浆，置－20℃冰箱保存，待测。

1．5 血浆中马波沙星浓度的测定血浆样品前处理方法参照梅雪洁等［4］报道的山羊血浆前处理方法。从冰箱中取出血浆，室温解冻，涡旋混匀。准确吸取0．5 mL于2 mL进口离心管中，加入1 mL色谱甲醇，旋涡混合器混匀，置轨道式摇床上震荡10 min。以15 000 r/min(4℃)离心10 min，用1 mL一次性注射器吸取上清液，过0．2 μm有机相针式过滤器至2 mL棕色进样瓶中，自动进样器进样20 μL，进行UPLC紫外检测。色谱柱:Gemini C18(4．6 mm×250 mm，5 μm);流动相为甲酸溶液(pH值3．0)－乙腈(84:16，V/V);检测波长: UV/295 nm;柱温:30℃;流速:1．0 mL/min。在上述色谱工作条件下，马波沙星与血浆中其他组分分离良好，猪血浆中马波沙星的最低检测限为0．02 μg/mL，定量限为0．05 μg/mL。标准曲线在0．05～5 μg/mL范围内线性关系良好(R=0．9999～1．0000)，批内及批间变异系数均值分别为3．31%和6．32%。

1．6 数据分析处理采用美国Pharsight公司药动学软件Winnonlin5．2．1的非房室模型来处理药动数据，计算出每头试验母猪的药动学参数，然后计算平均值(珔X)及标准误(S．E．)，同时以血药浓度平均值对时间作药－时曲线。

2 结果

健康母猪单剂量肌肉注射、静脉注射马波沙星注射液后，不同时间血药浓度实测值见表1，采用美国Pharsight公司药动学软件Winnonlin5．2．1的非房室模型来处理药动数据，药物动力学参数见表2，药物－时间曲线图见图1．

表1 健康母猪肌肉注射、静脉注射马波沙星注射液(2．0 mg/kg)的血药浓度(珔x±s．E．n=9)单位:μg/mL

3 讨论

3．1 肌肉注射给药的药动学特征观察试验母猪肌肉注射马波沙星注射液(2．0 mg/kg)后的药－时曲线(见图1)发现，肌肉注射药物后，吸收较为迅速，tmax=1．72 h，Cmax=1．90 μg/mL;t1/2β为20．09 h，消除缓慢，显著长于恩诺沙星［7］、沙拉沙星［8］、达氟沙星［9］，与健康猪的17．99 h［3］基本一致，马波沙星的生物利用度为80．2%，说明肌肉注射给药吸收较为完全，低于健康猪的107．86%［3］。药动学参数详见表2。

3．2 静脉注射给药的药动学特征健康母猪静脉注射马波沙星注射液(2．0 mg/kg)后，采用非房室模型分析静脉注射给药的药动学数据，马波沙星静脉注射给药后表观分布容积Vd为1．23 L/kg体重，结果表明马波沙星分布广泛。与哺乳期母猪［10］静脉注射给药马波沙星(2．0 mg/kg体重)后Vd为1．27 L/kg体重比较，显示出相似的分布特征。与马波沙星静脉注射健康猪给药后Vd、Vd(ss)分别为3．61 L/kg体重、2．69 L/kg体重(李云峰等，2004)相比，有较大的差异。在其他动物亦可见相似的特征，但存在一定的种属差异。药动学参数详见表2，药－时曲线图见图1。

图1 母猪单剂量静脉注射、肌肉注射10%马波沙星注射液的药－时曲线图

表2 母猪肌肉注射、静脉注射马波沙星注射液(2．0 mg/kg)后的药物动力学参数

马波沙星的消除半衰期(t1/2β)为17．7 h，显著高于Petracca等［10］报道的哺乳期母猪(5．92 h)，与李云峰等［3］报道的健康猪(16．22 h)接近;与其他氟喹诺酮类药物在健康猪的t1/2β比较，显著长于恩诺沙星［7］、沙拉沙星［8］、达氟沙星［9］。也显著长于马波沙星在岭南黄鸡［5］、山羊［4］的消除半衰期。

3．3 母猪的给药方案本试验中母猪按2．0 mg/kg体重一次肌肉注射后(见表1)，10 min血浆中马波沙星的浓度即可达到1．04 μg/mL，30、60 min分别达到1．65、1．79 μg/mL，至12、48 h血浆中药物浓度仍可维持0．81、0．18 μg/mL。马波沙星对大部分致病菌的MIC值低于1．0 μg/mL(介于0．02～0．94 μg/ mL)，只有对链球菌的MIC值达3．8 mg/L。由于氟喹诺酮类药物属于浓度依赖性药物，其临床用药给药间隔可用AUC/MIC或Cmax/MIC来计算;此外，马波沙星还表现出抗菌药后效应。根据本试验静脉注射或肌肉注射所得AUC或Cmax与临床常见致病菌MIC值计算可得，按2．0 mg/kg体重静脉注射或肌肉注射马波沙星注射液的给药间隔为24～48 h，可应用对多数敏感菌的治疗。因此推荐马波沙星临床用于敏感菌治疗按2．0 mg/kg体重，肌肉注射给药，每日1次。

［1］EMEA．TheEuropean agency for the evaluation of medicinal products veterinary medicines evaluation．marbofloxacin．summary．report［DB/OL］．http://www．ema．europa．eu/pdfs/vet/mrls/ 007996en．pdf．1996．

［2］EMEA．TheEuropean agency for the evaluation of medicinal products veterinary medicines evaluation．marbofloxacin．summary．report［DB/OL］．http://www．ema．europa．eu/pdfs/vet/mrls/ 069399en．pdf．1999．

［3］李云峰，曾振灵，陈杖榴，等．麻保沙星(marbofloxacin)在猪体内的药物动力学［J］．中国兽医学报，2004，24(2):177-179．

［4］梅雪洁，李引乾，庞利娜，等．麻保沙星在山羊体内的药物动力学［J］．西北农业学报，2009，18(3):38-41．

［5］黄显会，陈杖榴，张淑婷，等．麻保沙星在鸡体内的生物利用度及药物动力学［J］．中国兽医学报，2002，22(3):279-281．

［6］张玲玲，潘安，赵杰，等．两种剂型麻保沙星在健康家犬体内药物动力学比较［J］．华中农业大学学报，2010，29(1):75-78．

［7］Richez P，Mrner A P，Jong A D，et al．Plasma pharmacokinetics of parenterally administered danofloxacin and enrofloxacin in pigs［J］．J Vet Pharmacol Therap，1997，20(supp l1):41242．

［8］丁焕中，曾振灵，冯淇辉，等．沙拉沙星在猪体内的药动学研究［J］．中国兽医学报，2000，20(5):493-496．

［9］Mann D D，Frame G M．Pharmacokinetic study of danofloxacin in cattle and swine［J］．Am J Vet Res，1992，53(6):1022-1026．

［10］Petracca K，Riond J L，Geaser T，et al．Pharmacokinetics of the grase inhibitor marbofloxacin:influence of pregnancy and lactation in sows［J］．Zentralbl Veterinarmed，1993，40(1):73-79．

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0529-6005(2017)01-0103-03

2016-04-29

岳永波(1971-)，男，高级工程师，硕士，主要从事动物药学研究，E-mail:yueyongbo909@sohu．com