泄浊益肾方对高尿酸血症肾损害大鼠白介素-1β的影响

王陈芳 徐英英 瞿中洁 留菁菁

泄浊益肾方对高尿酸血症肾损害大鼠白介素-1β的影响

王陈芳 徐英英 瞿中洁 留菁菁

目的 观察泄浊益肾方对高尿酸血症肾损害大鼠IL-1β的影响，探讨其对肾脏的保护机制。方法 通过腺嘌呤加乙胺丁醇复制高尿酸血症肾损害大鼠模型，实验分为正常对照组、模型对照组、中药高、中、低剂量三组及西药（别嘌呤醇）对照组（n=10），实验28 d后处死，腹主动脉采血，检测血清IL-1β。结果 治疗后西药组、中药各剂量组与模型组相比，IL-1β明显降低（P＜0．01）。结论 泄浊益肾方能够通过降低白介素-1β，抑制炎症反应，从而保护肾脏。

泄浊益肾方；高尿酸血症；肾损害；大鼠；血清IL-1β

尿酸盐在血中的浓度呈过饱和状态时即可沉积于肾脏而引起高尿酸血症肾损害，成为高尿酸性肾病（Hyperuricemic Nephropathy）[1]。尿酸大部分经肾脏排泄，故高尿酸血症不仅可以通过尿酸结晶在肾脏的沉积，导致肾间质纤维化；无结晶形成的高尿酸血症还影响肾脏血管及系膜细胞功能[2]。前期研究已经证实新组方泄浊益肾方对高尿酸血症肾损害大鼠肾脏有保护作用[3]。本研究通过观察泄浊益肾方对血清白介素-1β（IL-1β）影响，探究其作用机理。

1 材料与方法

1.1 实验动物

选用Wistar雄性大鼠，60只，体质量（200.0±10.0）g（浙江中医药大学实验动物中心提供）。购自中国科学院上海实验动物中心，由浙江中医药大学SPF动物房饲养。

1.2 药品

泄浊益肾方：萆薢20 g、土茯苓30 g、川牛膝15 g、泽泻15 g、生米仁15 g（浙江省中医院），制成高、中、低（2.0 g/ml、1.0 g/ml、0.5 g/ml）三种浓度药液，其每公斤体重药量分别相当于人的每公斤用药量的20倍、10倍、5倍。高温消毒后封瓶，冷藏备用。腺嘌呤：由Beijing topbio science & Technology Co.Ltd提供；盐酸乙胺丁醇片：由杭州民生药业集团有限公司生产；别嘌醇片：由重庆科瑞制药有限责任公司生产。研末，用生理盐水配成7.5 mg/ml混悬液。

1.3 实验方法

大鼠饲养5 d后，随机分中药低、中、高剂量组、西药对照组、正常对照组、模型对照组共6组，每组10只。除正常对照组外，其余五组予腺嘌呤、乙胺丁醇按100 mg/kg、250 mg/kg比例称取，用生理盐水配成35 mg/ml混悬液，每只大鼠2 ml/d灌胃，共21 d。自实验造模第7 d，出现血尿酸（UA）水平升高，伴肾功能损害（SCr、BUN升高），拟造模成功。开始给药。上午予造模药，下午予治疗药：中药组：3 ml/d。西药对照组（别嘌呤醇）：2 ml/d，正常对照组、模型对照组：予等剂量生理盐水（2 ml/d）灌胃，共21 d，实验共计28 d。4周后，禁食12 h，于次日晨，腹主动脉取血，血标本用于IL-1β测定。

1.4 血清IL-1测定

采用酶联免疫法。按说明书操作，采用双抗体夹心ABCELISA法。

1.5 统计学处理

实验结果以SPSS 17.0软件进行分析，计量资料用（均数±标准差）表示，采用One-way ANOVA方差分析，P＜0.05，差异有统计学意义。

2 结果

各组IL-1β水平比较，模型组、西药组IL-1β水平明显高于正常组，P＜0.01，差异有统计学意义，中药各剂量组、西药组IL-1β水平较模型组降低，P＜0.01，差异有统计学意义，说明中药各剂量组、西药组能降低该大鼠模型IL-1β水平，但中药各剂量组IL-1β较接近正常水平（表1）。

表1 各组IL-1β水平

表1 各组IL-1β水平

注：与正常组比较，*P＜0．05，与正常组比较，**P＜0．01；与模型组比较，#P＜0．05，与模型组比较，##P＜0．01；与西药组比较，△P＜0．05，与西药组比较，△△P＜0．01

动物数（n）IL-1β组别中高组967．823±24．122##△△中中组971．362±24．296##△△中低组980．560±28．144##△△西药组9120．463±27．735**#模型组9147．971±23．253**正常组960．635±19．155

3 讨论

高尿酸血症（HUA）与慢性肾脏病（CKD）的关系已成为近年来的研究热点，研究显示，高尿酸血症是慢性肾功能衰竭的独立危险因素[2]。高尿酸血症和其他代谢性疾病一样，可独立导致肾脏损伤，其机制包括物理损伤、炎症反应及氧化应激甚至免疫因素的参与[4]。高尿酸血症本身不会产生明显的临床症状，但可通过诱导高血压、蛋白尿、内皮功能不良、活化肾素-血管紧张素（RAS）系统等机制，促进肾脏疾病的发生发展[2]。

IL-1是一种前炎症细胞因子，分为IL-1α和IL-1β两种类型，两种类型无种属特异性，主要由活化的单核或巨噬细胞产生。在免疫及炎症的刺激下，系膜细胞通过自分泌和旁分泌生成大量的IL-1β，后者进一步刺激系膜细胞分泌多种炎性细胞因子，诱导炎性细胞向肾内浸润[5]。高尿酸血症时，尿酸盐沉积肾小管、肾间质，引起炎症反应，导致肾脏损害[6]。本实验治疗后各组IL-1β水平比较，模型组、西药组IL-1β水平高于正常组（P＜0.01），中药各剂量组、西药组IL-1β水平较模型组明显降低（P＜0.01），说明中药各剂量组、西药组能降低该大鼠模型IL-1β水平，该中药方可降低IL-1β水平，抑制炎症反应。

高尿酸血症乃湿浊之毒也，穷必及肾，而损肾。在治疗痛风性肾病文献统计中发现，诸类中药为清热利湿泄浊、健脾益肾、活血化瘀通络之品[7]。以药测证，本病的病机可能多为脾肾亏虚，浊瘀内停[7]。可见脾肾不足，为病发之本，痰瘀湿浊是基本病理因素，为病发之标[8]，同时痰瘀湿浊诸邪既可影响脾肾之功能，又可进一步变生他病，是病理变化之关键。泄浊益肾方中萆薢、土茯苓、泽泻清热利湿祛浊，川牛膝、生米仁健脾益肾兼以活血化瘀，标本兼治，降低血尿酸， 减轻肾脏炎性改变，从而保护肾脏。

综上所述，泄浊益肾方能够降低血尿酸、血肌酐、尿素氮[3]，同时能抑制肾脏的炎症反应，从而减轻肾损伤，保护肾脏。

[1] 陈灏珠，林果为． 实用内科学[M]． 13版． 北京：人民卫生出版社，2009：2320-2325，2766-2773．

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[3] 王陈芳，黄平． 泄浊益肾方对高尿酸血症肾损害大鼠肾脏的保护作用[J]． 中华中医药学刊，2012，30（6）：1266-1268．

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The Influence of Xiezhuoyishen Fang on Serum IL-1β of the Hyperuricemic Nephropathy

WANG Chenfang XU Yingying QU Zhongjie LIU Jingjing Endocrine Ward Rheumatic Nephropathy, The Third Hospital Affiliated to Zhejiang University of Chinese Medicine, Hangzhou Zhejiang 310005, China

ObjectiveTo observe the effect of xiezhuoyishen fang on Hyperuricemic Nephropathy rats in Serum interleukin-1 (IL-1),discuss it’s protection of renal function.MethodsAnimal mode was made by Adenine and ethambutol, the animals divided into nomal contast group, model group, Chinese medicine high dose group, chinese medicine middle dose group, Chinese medicine low dose group and medicine group (Allopurinol)(n = 10), The rats were killed at 28 days after the test, then blood specimen was collected from the main abdominal aorta to examine blood IL-1β.ResultsContrast to model group, the level of IL-1β of the treatment groups clearly drop (P ＜ 0.01).ConclusionXiezhuoyishenfang can reduce the leve of IL-1β, restrain the inflammatory response. improve the renal function.

xiezhuoyishenfang; hyperuricemia; kidney damage; rats; Serum IL-1 beta

R965

A

1674-9316（2017）06-0104-02

10．3969/j．issn．1674-9316．2017．06．062

2014年度院级医药卫生科技项目（ZS14CA01）

浙江中医药大学附属第三医院内分泌风湿肾病科，浙江杭州 310005