高尔基体蛋白73在甲胎蛋白阴性原发性肝癌患者中的诊断意义

马 娟，张爱芸，王 煜，张 旭，马 燕，刘 鑫

·论 著·

高尔基体蛋白73在甲胎蛋白阴性原发性肝癌患者中的诊断意义

马 娟1，张爱芸1，王 煜1，张 旭2，马 燕2，刘 鑫2

目的 探讨高尔基体蛋白73(GP73)在甲胎蛋白(AFP)阴性的原发性肝细胞肝癌(HCC)患者中的诊断意义。方法 依据研究对象的纳排标准，将入组的112例HCC患者分组，其中乙肝相关性原发性肝癌患者(HBsAg阳性组)79例，非乙肝相关性原发性肝癌患者(HBsAg阴性组)33例；而APP阴性患者(AFP<20 μg/L)65例，AFP阳性患者(AFP>20 μg/L)47例。检测112例入组患者的空腹血清GP73、AFP水平，对各组中二者水平是否阳性及HBsAg是否阳性进行统计学分析。结果 比较112例肝癌患者HBsAg阳性和阴性的GP73表达，结果显示，HBsAg阳性组与HBsAg阴性组血清GP73、AFP水平均明显升高，但2组差异无统计学意义(P>0.05)。血清GP73单项检测阳性患者74例，阳性率66.07%；血清AFP单项检测阳性患者47例，阳性率41.96%；血清GP73及AFP联合检测阳性患者68例，阳性率60.71%，与血清AFP单项检测阳性率、阴性率比较，血清GP73、血清GP73联合AFP差异均有统计学意义(P<0.05)。65例血清AFP阴性患者，GP73检测阳性患者39例，阳性率达60%，与血清AFP单项检测相比较，差异有统计学意义(P<0.05)。结论 血清GP73在肝癌患者中表达与HBsAg是否阳性无相关性，对AFP阴性的肝癌患者，其对肝癌补充诊断方面具有一定临床价值。

原发性肝癌；高尔基体蛋白73；甲胎蛋白

原发性肝细胞肝癌(HCC)是一种多见、恶性程度高、进展快、预后差的恶性肿瘤，严重威胁着人类健康。在当今全球，每年平均约25万患者死于肝癌，其中我国患者占45%[1]，且HCC每年的发病率、死亡率均有所升高，其总体5年生存率<10%[2]，远期预后极差。研究表明，原发性肝癌缺乏早期特异性较高的诊断指标及手段是其预后差的主要原因之一。甲胎蛋白(AFP)是目前临床诊断HCC较为常用的血清学指标，由于其诊断灵敏度不够，部分HCC患者的AFP检测结果呈阴性或低浓度，使其早期诊断颇感困惑，研究发现多种血清学指标联合检测有望提高诊断效率[3]。本文通过检测原发性肝癌患者血清中高尔基体蛋白73(GP73)和AFP两种标志物，探讨检测GP73在AFP阴性的HCC患者中诊断的临床价值。

1 资料与方法

1.1 一般资料:选择2014年2月-2015年4月在宁夏医科大学总医院感染疾病科门诊及住院治疗的首诊原发性肝癌患者中符合标准的112例HCC患者为研究对象。其中乙肝相关性原发性肝癌患者(HBsAg阳性组)79例，非乙肝相关性原发性肝癌患者(HBsAg阴性组)33例，而AFP阴性患者(AFP<20 μg/L)65例，AFP阳性患者(AFP>20 μg/L)47例，各组间性别、年龄等差异无统计学意义。所有入组HCC患者均符合：①诊断标准符合第4届全国肝癌学术大会讨论通过的原发性肝癌诊断标准[4]；②均为首次确诊、尚未接受规范抗病毒及任何抗肿瘤治疗；③排除既往接受过抗病毒、放化疗及手术治疗者，排除合并妊娠、胃肠道其他部位肿瘤、生殖腺恶性肿瘤等情况。针对血清AFP水平、血清GP73水平，以目前文献资料为依据设定，血清AFP水平<20 μg/L及血清GP73水平<45 ng/L为阴性，AFP水平>20 μg/L及血清GP73水平>45 ng/L为阳性。

1.2 检测方法:将112例入组肝癌患者统一空腹8 h以上，采集肘静脉血5 mL，以3 000 r/min离心8 min，血清置-70 ℃冰箱保存备用，以测定血清GP73的水平。GP73测定采用酶联免疫吸附试验(定量)检测，AFP测定采用电化学发光法检测，试剂盒均订购于北京热景生物技术有限公司。

2 结果

2.1 肝癌患者中血清GP73、AFP与乙肝表面抗原(HBsAg)携带关系：112例入组肝癌患者中，HBsAg阳性79例，HBsAg阴性33例，比较2组患者血清GP73水平的表达。结果显示，HBsAg阳性组与HBsAg阴性组血清GP73水平及血清AFP水平均明显升高，但2组差异无统计学意义(P>0.05)，提示GP73与AFP水平的表达可能与HBsAg是否阳性无相关性，见表1。

表1 112例肝癌患者HBsAg与血清 GP73、AFP水平的关系

表2 112例肝癌患者血清GP73和AFP 单项及联合检测比较[n(%)]

注：*与AFP比较，P<0.05。

表3 65例AFP阴性肝癌患者GP73阳性率 与AFP阳性率比较[n(%)]

3 讨论

近40年来，临床上对肝癌高危人群的筛查主要依靠血清AFP检测和影像学检查，血清AFP升高对肝癌诊断的专一性仅次于肝组织病理检查，其特异性较高,假阳性率较低,为目前临床广泛应用、最有价值的早期筛查及诊断肝癌的血清学指标，但其敏感性不高，有30%左右的HCC患者血清AFP表达呈阴性。可能原因为:AFP仅在肿瘤细胞周期某一时相合成，且肝癌细胞具有合成与不合成AFP的2种细胞成分,当肝细胞出现癌变时,具备合成AFP的肝癌细胞在特定的细胞周期时，在低甲基化作用下开放AFP基因表达,此时检测血清AFP水平呈阳性，可将AFP可作为诊断肝癌的肿瘤标志物;而当AFP基因表达因某因素调控停止在转录后、翻译前时,则检测血清AFP水平呈阴性或低水平，这就在一定程度上限制了血清AFP在诊断中的临床实用性[5]。

GP73是近年来研究火热、临床上值得期待的肝癌血清标志物之一，它是一种整合膜蛋白，存在于高尔基体顺面膜囊上，具有典型的Ⅱ型跨膜蛋白质结构，主要在人体组织的上皮细胞中表达，而肝细胞中则几乎测不到其表达[6]。有学者研究认为，HCC患者GP73高水平表达因HBV感染后所引起，但也有学者持反对态度，他们认为其在HCC患者肝细胞的高水平表达并非仅由病毒感染引起。

本研究分析了112例肝癌患者HBsAg携带情况与血清GP73的浓度关系，比较HBsAg阳性和阴性的肝癌患者血清GP73表达。结果显示，HBsAg阳性组与HBsAg阴性组血清GP73水平及血清AFP水平均明显升高，但2组差异无统计学意义，提示血清GP73与AFP水平的表达可能与HBsAg是否阳性无相关性。临床发现，在患有病毒性或非病毒性肝病者的血清GP73、AFP均有升高，提示二者的高表达是肝细胞损伤后的一个共同标志，而并非仅由HBV感染所致。Iftikha[7]等用免疫组化及Westernblot等方法也证实，GP73表达在各类肝病中没有明显的差异性。Kladney等[8]研究发现，不论何病因的肝硬化患者中，肝细胞GP73表达均有明显升高。他们研究证实，在HBV相关性肝硬化患者中，其肝细胞GP73表达明显升高，与正常肝脏相比，有的升高可达70倍，但与酒精性肝硬化、自身免疫性肝硬化以及HCV相关的肝硬化比较，则其升高的幅度无明显差异。

目前诸多研究表明，GP73在肝癌、肝硬化进展期或急性肝炎时均呈高表达，并且随着肝病的发展其表达逐步上调；随着病情恢复，GP73的表达水平也可逐渐下降，GP73水平与疾病的发展阶段有关。正常肝脏组织中，肝细胞几乎不表达GP73，而在急性肝炎、较严重的肝纤维化时，GP73在肝细胞中表达明显上调，肝硬化时其表达又进一步提高，而发展到肝癌时，它的表达到高峰[9]。研究证实，GP73表达与肝癌的发生、病情发展及转归密切相关。

本研究结果显示112例肝癌患者，血清GP73单项检测阳性率66.07%，血清AFP单项检测阳性率41.96%，这就意味着AFP单项检测时，将有近58%的原发性肝癌患者可能会被漏检。进一步探讨血清GP73对AFP阴性肝癌患者的诊断价值，结果显示，在65例AFP阴性的原发性肝癌患者中有39例GP73>45 ng/mL，阳性率达60%，提示血清GP73有助于AFP阴性肝癌患者的早期检出。本研究结果显示，血清GP73及AFP联合检测阳性率60.71%，与血清AFP单项检测阳性率比较，差异有统计学意义，提示两者联合检测将有可能提高肝癌的检出率。这与Riener[10]和Marrero[11]、毛一雷等[12]、郑建建[13]等研究结论一致，他们一致认为，GP73在肝细胞中高表达与肝细胞癌关系密切，具有比AFP更高的敏感性和特异性，可一定程度地提高AFP阴性肝癌患者的早期检出率，在HCC早期诊断中，具有良好的临床应用前景。但由于本研究纳入病例仅为确诊肝癌患者，且病例数偏少，结果及结论均具有一定的局限性。

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Golgi protein 73 in AFP-negative diagnosis of primary liver cancer patients

MAJuan1,ZHANGAiyun1,WANGYu1,ZHANGXu2,MAYan2,LIUXin2.

1.DepartmentofInfectionDiseose,TheGeneralHospitalofNingxiaMedicalUniversity,Yinchuan750004,China;2.NingxiaMedicalUniversity,Yinchuan750004,China

WANGYu,Email:wangyu0127@163.com

Objective To discussed the diagnostic significance of Golgi protein 73 in AFP-negative patients with primary liver cancer.Methods According to the criterion of study,112 cases of Hepatocellular Carcinoma(HCC)patients were enrolled the group，including 79 cases of HBV-related HCC patients(HBsAg positive group)and 33 cases of non-HBV-related HCC patients(HBsAg negative group).AFP-negative patients(AFP<20 μg/L)were 65 cases and AFP-positive patients(AFP>20 μg/L)were 47 cases.112 patients were detected the fasting serum GP73 and AFP levels，which were analyzed.Results The levels of GP73 and AFP were significantly increased in HBsAg positive and HBsAg negative groups,there was no significant difference(P>0.05).Of the 112 patients with liver cancer，there were 74 patients tested the GP73 single,the positive rate was 66.07% and there were 47 patients tested the AFP single，the positive rate was 41.96%.There were 68 cases whose GP73 and AFP were all positive,the positive rate were 60.71%.Compared with the AFP positive rate and the negative rate，the GP73 and the joint of GP73 and AFP were statistically significant(P<0.05),65 cases of serum AFP negative patients，GP73 test positive in 39 patients，the positive rate was 60%，with serum AFP single detection contrast，the difference was statistically significant(P<0.05).Conclusion GP73 expression in the serum is not correlation with the HBsAg.It has some clinical value to the AFP-negative patients with liver cancer.

Hepatocellularcarcinoma;Golgiprotein73;Alpha-fetoprotein

10.13621/j.1001-5949.2017.04.0298

1.宁夏医科大学总医院感染疾病科，宁夏 银川 750004 2.宁夏医科大学，宁夏 银川 750004

马娟(1986-)，女，回族，硕士研究生，主要从事肝病的临床诊治工作。

王煜，Email：wangyu0127@163.com

http://kns.cnki.net/kcms/detail/64.1008.R.20170328.2051.006.html

R575

A

2016-09-17 [责任编辑]王凯荣