超微粉对蒙成药三子汤散中栀子苷溶出的影响△

乌力吉 萨础拉 松 林 孟永梅 呼和木仁 都伊乐

(内蒙古医科大学蒙医药学院,内蒙古 呼和浩特 010110)

超微粉对蒙成药三子汤散中栀子苷溶出的影响△

乌力吉 萨础拉 松 林 孟永梅 呼和木仁 都伊乐

(内蒙古医科大学蒙医药学院,内蒙古 呼和浩特 010110)

目的：比较蒙成药三子汤散常规粉与超微粉中栀子苷的体外溶出度，探索超微粉碎技术对蒙成药三子汤散中有效成分栀子苷的溶出的影响，为蒙成药三子汤散粉碎粒径的选择提供科学依据;方法:应用高效液相色谱同时分析蒙成药三子汤散超微粉和常规粉中有效成分栀子苷的体外溶出情况，绘制溶出曲线，比较蒙成药三子汤散不同粒径粉末的溶出特征。结果:蒙成药三子汤散超微粉和常规粉10min时累计溶出率分别90%，68%，20min时累计溶出率分别为98%，79%。结论:超微粉碎能明显提高蒙成药三子汤中有效成分栀子苷的体外溶出量及溶出速率，表明超微粉技术可用于蒙成药三子汤散的制备。

三子汤散；栀子苷；超微粉；常规粉；溶出度；高效液相色谱

文献研究表明，三子汤始载于《四部医典》[1]，由栀子，川楝子，诃子组成，具有酸、苦、甘、涩、辛等5种味的方剂，其性味与功能相互协调，性凉，功能清血热，分离正血与恶血，主治新旧血热症，血症引起的眼红、头痛、牙痛，未成熟热，正血与恶血混合，瘟疫骚热，希拉热等[2],有关三子汤散的文献多为制剂、工艺实验研究，未见其超微粉技术的研究报告。超微粉碎是近 20 年来迅速发展起来的一门新技术，已被广泛应用于航空航天、食品、化妆品、医药等领域[3-6]。超微粉碎技术在提高药效和药品质量、节省资源、提高经济效益方面的突出优势，也引起了动植物药行业的普遍关注。粉碎是动植物药生产中重要的前处理步骤，超微粉碎技术在以粉体为原料的固体与半固体制剂中应用前景广泛。近年来有关超微粉碎在中药汤剂、散剂、丸剂、胶囊、片剂等剂型中应用均有报道[7]，本课题以栀子为研究对象，通过比较三子汤散超微粉与常规粉中栀子苷的体外溶出情况，探讨其溶出特性，为栀子超微粉体的进一步开发和应用提供实验依据。

1 材料

1.1 仪器：LC-15C高效液相色谱仪 (岛津)；紫外检测器DGU-20A3；BSA124S-CW电子天平(sartorius)；KQ-300E型超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)；超纯水器WA-UN4-F20(北京普析通用仪器有限责任公司)；电热鼓风干燥箱(上海-恒科学仪器有限公司)；万能粉碎机(南京腾阳干燥设备厂)；BFM-6A型贝利微粉机(济南倍力粉技术工程有限公司)。甲醇为fisher色谱纯试剂，磷酸为优级纯(天津永晟精细化工有限公司),水为超纯水，其他试剂均为分析纯。

1.2 试药：栀子、诃子、川楝子由内蒙古呼和浩特市华蒙医药有限公司提供，经鉴定栀子为茜草科植物栀子Gardenia jasmi-noides Ellis的干燥成熟果实，诃子为使君子科植物诃子的干燥成熟果实，川楝子为使楝子科植物川楝子的干燥成熟果实，均符合2015年版《中国药典》质量要求。三子汤散超微粉和常规粉由内蒙古医科大学蒙医方剂室提供，栀子苷对照品(中国药品食品检定研究院，批号100081-201408)，甲醇为fisher色谱纯试剂(天津永晟精细化工有限公司),水为超纯水，其他试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 供试品溶液的制备：三子汤常规粉体采用万能粉碎机制备，过100目筛，经winner3003A激光粒度仪测定粒径D50为72.753 μm、D95为205.3918μm；三子汤超微粉体采用BFM-6A型贝利微粉机制备，经winner3003A激光粒度仪测定粒径D50为15.247 μm、D95为51.33606μm，证明已达到超微级粉末。将上述样品精密称取1.0g置锥形瓶中，加入甲醇10mL,超声20min，过滤，取滤液，过0.45μm过滤膜即得供试品溶液。

2.2 对照品溶液的制备：精密称取1.3mg栀子苷对照品置25mL容量瓶中加甲醇至刻度，即得对照品溶液。

2.3 色谱条件： 色谱柱为pgrandil STC-C18(4.6mm×250 mm、5μm)，流动相甲醇-水(30:70)，检测波长238nm，流速1.0mL.min-1，柱温30℃，进样量10μL。

2.4 标准曲线的制备： 制备不同浓度的栀子苷对照品进样10μL，在上述色谱条件下进行HPLC 分析，以色谱峰面积为横坐标，栀子苷对照品浓度为纵坐标，进行线性回归分析，线性回归方程：Y=76228X-20100,r =0.9999。结果表明栀子苷测定在0.296～0.088μg间线性良好。浓度与峰面积的线性关系良好。

2.5 精密度试验： 精密吸取同一对照品溶液，连续进样6次，结果峰面积的RSD为1.4%，表明仪器精密度良好。

2.6 重复性试验： 取同一批超微粉样品6份，按溶出量测定方法进行测定，测得样品中栀子苷的平均含量为2.91%，RSD为1.0%，表明该方法的重复性良好。

2.7 稳定性试验： 取同一批次样品的供试品溶液，室温放置，按2.1.3项下色谱条件分别于0,2,4,6,8,10h进样测定，结果峰面积的RSD为0.9%,表明供试品溶液在10h内稳定。

2.8 回收率试验：精密称取已知栀子苷含量的样品5份，每份约0.1g分别加入栀子苷对照品溶液10mL，按2.1.1项下方法制备供试品溶液，按2.1.3项下色谱条件进样，测定栀子苷含量，结果表明回收率为96%～98%，RSD为1.5%，符合有关规定。

3 样品含量测定

取3批样品，每批3份。按2.1.1项下方法制备供试品溶液，取供试品溶液10?L注入液相色谱仪中，记录峰面积，按外标一点法测定药材中栀子苷的含量。结果见表3。

表3 样品含量检测结果(%；n=3)

4 溶出度的测定

精密称取三子汤散常规粉、超微粉各1.0g，各平行取5份，分别置于溶出度测定仪中，以900mL水为溶出介质，恒温(37±0.5)℃，搅拌转速100r.min-1,分别于5,10,15,20,30,40,50,60,120min定时吸取溶出液5mL，经0.45μm微孔滤膜滤过，同时将等体积同温的溶出介质补充至溶出度测定仪中。然后精密吸取样品液10μL，注入液相色谱仪中，按2.1.3项下色谱条件测定栀子苷的溶出量，以三子汤散超微粉中栀子苷溶出量为100%，计算出各超微粉和常规粉栀子苷的累计溶出率，绘制成溶出曲线，见图1，2。结果表明三子汤散超微粉中栀子苷的溶出量和溶出速率比常规粉均有一定优势。

5 讨论

超微粉蒙药既保持了传统制剂能适应辩证论治、随症加减的特色，又克服了其煎煮麻烦、服用不便的缺点。蒙药材经过细胞破壁后，粒度均匀细密,并可使细胞壁破碎, 增加了药材的比表面积,药物有效成份充分释放，从而大幅度提高药效。通过比较三子汤散常规粉和超微粉的体外溶出研究，表明了超微粉三子汤散中有效成分栀子苷溶出量及溶出率均大幅度提高，从而提高药物的生物利用度和药物吸收速度，减少用药剂量。

[1]宇妥·元丹贡布．四部医典(蒙古文版)[M]．呼和浩特:内蒙古人民出版社，1978:1005.

[2]白金亮，敖银梅.蒙药复方三子汤的研究进展[J].中国民族民间医药，2006(4):209-211.

[3]邓雯，夏荃，詹若挺，等.中药超微粉碎技术的研究进展[J].食品与药品a,2007,9(11):59-62.

[4]盛勇，刘彩兵，涂铭旌.超微粉碎技术在中药生产现代化中的应用优势及展望[J].中国粉体技术,2003,9(3):28-31.

[5]鞠爱华，庄志鹤，蔡丽娟，等.蒙药山沉香超微粉与普通粉中总木脂素体外溶出度比较[J].时珍国医国药，2016(1):89-91.

[6]郭松河.蒙药制剂应用超微粉碎技术的探讨[J].中国民族医药杂志，2007,(12):58.

[7]赵国巍，王春柳，廖正根，等.超微粉碎在中药复方制剂中的应用研究进展[J].江西中医药大学学报，2014(2):94-97.

2017年1月24日收稿

The impact of ultrafine grinding technology on the dissolubility of geniposide in Mongolian patent medicine Sanzitang powder

Wuliji,Sachula,Songlin,Mengyongmei,Duyile

College of Mongolian Medicine in Inner Mongolia Medical University

Objective: Compare the in vitro dissolubility of geniposide in traditional and ultra-micro pulverized powder of Sanzitang powder, and explore the effect of ultrafine grinding technology on the dissolubility of geniposide, which is the effective component of Sanzitang, and finally provide a scientific basis for the choice of the size of pulverization of Sanzitang powder. Method: The in vitro dissolubility of geniposide in traditional and ultra-micro pulverized powder of Sanzitang powder was analyzed simultaneously by applying high performance liquid chromatography (HPLC).Then the dissolution profile was plotted and finally, the dissolving-out characteristics of different grain diameter of Sanzitang powder were compared. Result: The cumulative dissolution rates of ultra-micro pulverized and traditional powder of Sanzitang were 90%, 68% and 90% at 10 min, respectively, and the 98% and 79% at 20 min, respectively. Conclusion: The ultrafine grinding technology could significantly increase the dissolving-out quantity and dissolving-out rate of geniposide, indicating that this technology could be used in the preparation of Mongolian patent medicine Sanzitang.

Sanzitang Powder; Geniposide; Traditional Powder; Ultra-micro Pulverized Powder; Dissolution Rate; High Performance Liquid Chromatography

内蒙古医科大学科技百万工程项目(YKD2013KJBW004)

R291.2

A

1006-6810(2017)02-0049-02