儿童呼吸道病原体急性感染流行病学分析

赵博华，贺占国，王宪灵，张海谱，贺政新

儿童呼吸道病原体急性感染流行病学分析

赵博华，贺占国，王宪灵，张海谱，贺政新

目的 分析儿童急性呼吸道感染(ARI)病原体特异性IgM抗体检出情况，为该地区儿童ARI的早期诊断、治疗提供参考依据。方法 对选择的1928例ARI行呼吸道病原体特异性IgM抗体检测，包括嗜肺军团菌(LPN)、肺炎支原体(MP)、Q热立克次体(COX)、肺炎衣原体(CPN)、腺病毒(ADV)、呼吸道合胞病毒(RSV)、甲型流感病毒(IVA)、乙型流感病毒(IVB)及副流感病毒(PIV)，比较不同年龄段及季节的病原体感染情况。结论 本组MP特异性IgM抗体阳性检出率最高，其次为IVB和PIV。与>3～≤6岁组比较，≤3岁组MP阳性率、≤3岁组和>6～≤16岁组IVB和PIV阳性率均明显降低，差异有统计学意义(P<0.05)。呼吸道感染病原体特异性IgM抗体阳性率以冬季最高，且MP阳性率冬季明显高于春季和夏季(P<0.05)，IVB阳性率冬季明显高于夏季和秋季(P<0.01)，PIV阳性率秋季明显高于春季和冬季，差异均有统计学意义(P<0.01)。结论 本地区患儿ARI以MP、IVB、PIV感染为主，且不同年龄和季节病原体感染存在明显差异。

呼吸道感染；儿童；病原体；流行病学

呼吸道感染是儿科最常见的感染性疾病[1-2]，也是婴幼儿死亡的首要病因。若呼吸道感染治疗不及时或处理不当，可发展成重症肺炎，部分患儿甚至出现呼吸衰竭、心力衰竭或肝肾功能损害，严重者可导致死亡[3-5]。呼吸道感染可由多种病原体引起，为了解本地区儿童呼吸道感染的流行病学特点，本研究采用间接免疫荧光法对急性呼吸道感染(ARI)的患儿进行呼吸道病原体特异性IgM抗体检测，分析感染特征，现将结果报告如下。

1 资料与方法

1.1 研究对象 选取我院2015年10月—2016年9月收治的儿童ARI 1928例，其中男1138例，女790例；年龄0～16岁。参照《诸福堂实用儿科学(第8版)》[6]呼吸道感染诊断标准，诊断为肺炎1112例，其中单纯性肺炎541例，支气管肺炎414例，憋喘性肺炎114例，喘息性支气管肺炎35例，喘息性肺炎8例；支气管炎816例，其中单纯性支气管炎711例，喘息性支气管炎97例，憋喘性支气管炎8例。

1.2 研究方法

1.2.1 仪器及试剂:荧光显微镜为日本产OLYMPUSBX51型，呼吸道病原体特异性IgM抗体检测试剂盒购自西班牙VIRCELL.S.L公司(PNEUMOSLIDE IgM)。

1.2.2 检测方法:采用间接免疫荧光法检测呼吸道病原体特异性IgM抗体。所有患儿均于入院当日抽取静脉血3 ml置于促凝试管内，4000 r/min离心10 min，留取血清备用，严格按照试剂操作说明书进行。先将待检血清用磷酸盐缓冲液(PBS)按1∶1的比例进行稀释，取稀释后血清30 μl加入150 μl吸附剂，彻底混匀后13000 r/min离心10 min，除去沉淀；继之于载玻片的试验孔内分别加入已处理的稀释血清和质控品，37℃湿盒内放置90 min，PBS洗涤2次，蒸馏水洗涤1次，自然晾干；再加入荧光素结合物，37℃湿盒内放置30 min，PBS洗涤2次，蒸馏水洗涤1次，自然晾干；最后加入适量封闭介质，盖上盖玻片，在荧光显微镜400倍视野下观察。均设立阴性和阳性对照，确保试验和试剂盒的有效性。

1.3 统计学分析 采用 SPSS 17.0统计学软件进行数据处理。计数资料采用χ2检验，用率(%)表示，当例数≤5时，采用fisher精确检验。以α=0.05为检验水准。

2 结果

2.1 呼吸道病原体特异性IgM抗体检测结果 呼吸道病原体包括嗜肺军团菌(LPN)、肺炎支原体(MP)、Q热立克次体(COX)、肺炎衣原体(CPN)、腺病毒(ADV)、呼吸道合胞病毒(RSV)、甲型流感病毒(IVA)、乙型流感病毒(IVB)及副流感病毒(PIV)。本组呼吸道病原体特异性IgM抗体阳性441例次，检出率为22.87%，其中MP特异性IgM抗体阳性339例次，检出率最高，达17.58%，见表1。

表1 儿童急性呼吸道感染1928例呼吸道病原体特异性IgM抗体检测结果

2.2 呼吸道病原体混合感染情况 本组同时检出2种呼吸道病原体特异性IgM抗体阳性28例，占1.45%(28/1928)，同时检出3种呼吸道病原体特异性IgM抗体阳性2例，占0.10%(2/1928)。在30例混合感染中，出现MP+IVB感染15例，IVB+PIV感染8例，MP+PIV感染3例，MP+LPN感染、IVA+PIV感染、MP+PIV+IVB感染及MP+PIV+IVA感染各1例。

2.3 不同年龄段呼吸道病原体特异性IgM抗体感染情况 依据儿童的生长发育过程进行分组，其中≤3岁组患儿呼吸道病原体特异性IgM抗体阳性227例次，>3～≤6岁组132例次，>6～≤16岁组82例次。各年龄段呼吸道病原体阳性率均为MP最高，其次为IVB。与>3～≤6岁组比较，≤3岁组MP阳性率、≤3岁组及>6～≤16岁组IVB和PIV阳性率均明显降低，差异有统计学意义(P<0.05)，而>6～≤16岁组MP阳性率降低不明显，差异无统计学意义(P>0.05)；与≤3岁组比较，>6～≤16岁组MP、IVB及PIV阳性率差异无统计学意义(P>0.05)，见表2。

表2 不同年龄段儿童急性呼吸道感染1928例呼吸道病原体特异性IgM抗体阳性检出情况[例(%)]

注：与>3～≤6岁组比较，aP<0.05，bP<0.01

2.4 不同季节呼吸道病原体特异性IgM抗体阳性检出情况 本研究定义春季为3～5月，夏季为6～8月，秋季为9～11月，冬季为12～次年2月。呼吸道病原体特异性IgM抗体阳性检出率以冬季最高，其余依次为秋季、夏季、春季。MP阳性率冬季明显高于春季和夏季，IVB阳性率冬季明显高于夏季和秋季，PIV阳性率秋季明显高于春季和冬季，差异均有统计学意义(P<0.05)，见表3。

表3 不同季节急性呼吸道感染1928例呼吸道病原体特异性IgM抗体阳性检出情况[例(%)]

注：与春季和夏季肺炎支原体阳性率比较，aP<0.05；与夏季和秋季乙型流感病毒阳性率比较，cP<0.05；与春季和冬季副流感病毒阳性率比较，bP<0.01

3 讨论

ARI为儿童常见病，在学龄前儿童中下呼吸道感染发病率较高[7-8]。有报道发现ARI人数占儿科住院总人数的72.3%[9]。近年儿童呼吸道病原体感染的检测越来越受到重视，且呼吸道病原体感染常因地区、年份、季节和年龄的不同而存在差异[10]。本研究发现该地区1928例ARI检出呼吸道病原体特异性IgM抗体阳性441例次，检出率为22.87%，与江峤等[11-12]研究结果一致，但与许沙沙等[13-14]研究结果存在差异，可能与气候、环境、生活习惯和研究对象的选择及其构成等有关。本组MP特异性IgM抗体阳性339例次，检出率最高，与国内多项儿童呼吸道感染研究结果相一致[15-17]，其余依次为IVB、PIV、CPN、LPN、ADV、IVA、RSV及COX﹙未检出﹚，提示本地区儿童ARI以MP、和IVB和PIV感染为主，与李宁霞等[16]报道一致。本组同时检出2种或3种呼吸道病原体特异性IgM抗体30例，占1.56%，提示ARI患儿可能存在多种呼吸道病原体的混合感染，亦可能是患儿在近期先后感染了2种以上病原体，即在一种病原体特异性IgM抗体未消失时又感染了其他病原体，而非真正意义上的混合感染[18]。在30例混合感染病例中，IVB感染24例，占80.00%(24/30)，说明混合感染以IVB多见，提示IVB易与其他病原体发生混合感染，且以MP+IVB混合感染最多见，与许沙沙等[13]报道一致。

分析呼吸道病原体特异性IgM抗体在不同年龄段的分布，发现各年龄段病原体特异性IgM抗体阳性率均以MP最高，这与周莲等[19]报道一致；其次为IVB，其他病原体在各年龄段的阳性率均较低。MP阳性率<3～≤6岁组明显高于≤3岁组，差异有统计学意义，但>3～≤6岁组与>6～≤16岁组MP阳性率差异无统计学意义，与黄锐等[20-21]报道一致；IVB及PIV阳性率>3～≤6岁组明显高于≤3岁组和>6～≤16岁组，差异有统计学意义，与邱胜丰等[17]报道一致。提示<3～≤6岁儿童为易感人群，分析原因可能是此年龄段为学龄前，防范意识差，机体的免疫机制尚未完全建立，且常在人群较密集的地方活动，易造成交叉感染。据文献报道，学龄前儿童发生上呼吸道感染的概率高于婴幼儿[22]，与本研究结果一致。分析≤3岁组阳性检出率较低的原因可能为婴幼儿呼吸道感染常发病急、就医早，采血时可能处于特异性IgM抗体产生的窗口期，不能有效检测到病原体特异性IgM抗体[23]，且婴幼儿免疫组织器官功能发育尚未完全，在病原体感染的短时间内不能有效产生特异性IgM抗体。分析>6～≤16岁组呼吸道病原体特异性IgM抗体阳性检出率较低的原因可能是儿童免疫系统随年龄的增长而逐渐完善，机体免疫力增强，感染概率下降。

本研究分析了ARI患儿呼吸道病原体特异性IgM抗体在不同季节的检出情况，发现冬季抗体阳性率最高，与李东明等[14,16,19]报道一致；其次为秋季、夏季、春季。MP阳性率冬季明显高于春季和夏季，与周莲等[19]等报道一致；IVB阳性率冬季明显高于夏季和秋季，与谢菲等[24]结果不一致，可能与检测方法、病原谱构成有关。MP、IVB在冬季检出率高[25]，原因可能是北方冬季气候寒冷、干燥，更适宜MP、IVB的生存和传播；或是本地区冬季雾霾较严重，室内外温差较大，儿童户外活动减少，机体免疫力下降，增加了病原体的传播。PIV阳性率秋季明显高于春季和冬季，与柳鹏程等[26]结果存在偏差，可能与检测方法、研究年份、气候、温度及湿度有关。本文发现MP可四季流行，说明MP感染是本地区ARI最常见的病原体，可能因为人是MP的唯一宿主，常通过飞沫传播，引发地方性或流行性扩散[27]。

综上，不同地域的气候条件，包括温度、湿度等均可影响病原体感染的流行[19]，且不同年龄段病原体的感染情况不同，故如何及时准确判断病原体感染、实现个体化治疗是目前临床面临的重要问题[28-29]。因此，分析呼吸道病原体感染的流行病学特点，为指导临床合理用药、预防及控制疾病的流行提供科学依据。

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Epidemiological Analysis of Children with Acute Respiratory Infection

ZHAO Bo-hua, HE Zhan-guo, WANG Xian-ling, ZHANG Hai-pu, HE Zheng-xin
(Department of Clinical Laboratory, Bethune International Peace Hospital of PLA, Shijiazhuang 050082, China)

Objective To analyze detection condition of special IgM antibodies of children with acute respiratory infection (ARI) in order to provide reference for early diagnosis and therapy of ARI children in Shijiazhuang area. Methods Serum specific IgM antibodies of respiratory pathogens, which included legionella pneumophila (LPN), mycoplasma pneumoniae (MP), Q fever rickettsia burneti (COX), chlamydia pneumoniae (CPN), adenovirus (ADV), respiratory syncytial virus (RSV), influenza virus A (IVA), influenza virus B (IVB) and parainfluenze virus (PIV), were detected for 1928 patients with ARI. Conditions of pathogen infection in different ages and seasons were compared. Results Among the pathogens, the highest detection rate was MP, and then followed by IVB and PIV. Compared with those in children with >3-≤6 years old group, the MP positive rate in children with ≤3 years old group and IVB and PIV positive rates in children with ≤3 years old group and >3-≤6 years old group were significantly decreased. The highest positive rate of special IgM antibody infection was in the winter, and MP positive rate in the winter was significantly higher than those in the spring and summer (P<0.05), while IVB positive rate in the winter was significantly higher than those in the summer and autumn (P<0.01), and PIV positive rate in the autumn was significantly higher than those in the spring and winter (P<0.01). Conclusion MP, IVB and PIV infection are the main respiratory pathogens of ARI children in Shijiazhuang area, and pathogens in different ages and seasons have significantly different characteristics.

Respiratory tract infections; Children; Pathogens； Epidemiology

050082 石家庄，解放军白求恩国际和平医院检验科

贺占国，电话：0311-87978545；E-mail:Zdcwork2011@126.com

R517.6

A

1002-3429(2017)06-0084-04

10.3969/j.issn.1002-3429.2017.06.031

2017-03-15 修回时间：2017-04-17)