平贝母和川贝母总生物碱含量及其镇咳、抗炎作用比较研究

陈泓竹,张世洋,黄雅彬,李生茂,陈金凤,敖 慧,*

(1.成都中医药大学,四川成都 611137;2.川北医学院,四川南充 637000)

平贝母和川贝母总生物碱含量及其镇咳、抗炎作用比较研究

陈泓竹1,张世洋1,黄雅彬1,李生茂2,陈金凤1,敖 慧1,*

(1.成都中医药大学,四川成都 611137;2.川北医学院,四川南充 637000)

目的:比较平贝母与川贝母新品种——太白贝母、旧品种——松贝、青贝、炉贝总生物碱含量及镇咳、抗炎药理作用,探讨平贝母作为川贝母新来源的可行性。方法:采用回流法提取各品种总生物碱,紫外分光光度法测定其含量;比较不同品种贝母总生物碱对氨水刺激法致小鼠咳嗽模型和二甲苯致耳廓肿胀模型的药理作用;对各品种总生物碱咳嗽抑制率和炎症抑制率进行聚类分析。结果:各贝母提取物总生物碱含量从高到低依次为太白贝母(野生)、平贝母、青贝、松贝、炉贝、太白贝母(栽培)。平贝母、松贝、青贝、炉贝、太白贝母(栽培)总生物碱可明显减少氨水刺激法致小鼠咳嗽模型咳嗽次数,其中老品种较平贝母、新品种减少咳嗽次数优;松贝、青贝总生物碱可明显延长咳嗽潜伏期。平贝母、松贝总生物碱可明显减轻二甲苯致小鼠耳廓肿胀模型肿胀度;平贝母较松贝减轻抗炎效果更佳。聚类分析结果显示松贝、青贝、炉贝与太白贝母(栽培)、太白贝母(野生)聚集,与平贝母分离,表明平贝母与川贝母各品种总生物碱镇咳抗炎药效有一定差异。结论:平贝母总生物碱组成和抗炎、镇咳作用与川贝母有一定差异;但平贝母亦可作为川贝母候选新来源品种进一步研究。

平贝母,川贝母,生物碱,镇咳,抗炎

药食两用川贝母属名贵中药材。传统川贝母品种来源于川贝母FritillariacirrhosaD. Don、暗紫贝母FritillariaunibracteataHsiao et K. C. Hsia、甘肃贝母FritillariaprzewalskiiMaxim.、梭砂贝母FritillariadelavayiFranch.[1];但此4种植物喜生长于高海拔地区,资源受到破坏严重,供求矛盾突出,寻找相同功效的其他贝母类药材作药材川贝母使用已是迫在眉睫。太白贝母、平贝母与川贝母功效相近,种属相似,能规模栽培,因此被长期用作代用品,一定程度上缓解了川贝母供求矛盾,为野生资源提供了保护[2]。

目前,太白贝母已被《中国药典》2010年版、2015年版列为川贝母的来源[3-4]。亦有学者支持将平贝母列入川贝母项下[5]。平贝母和川贝母新旧品种在物质基础和药理作用方面是否相似,值得进一步研究。

研究表明,生物碱是川贝母镇咳抗炎的主要物质基础[6-7]。本研究拟首次平行比较平贝母和川贝母新品种——太白贝母、旧品种——松贝、青贝、炉贝的总生物碱含量及其镇咳、抗炎药理作用,并采用聚类分析综合分析各提取物药效差异性,以探讨平贝母作为川贝母新来源的可行性,为临床合理用药提供参考。

1 材料与方法

1.1 材料与仪器

95%乙醇、三氯甲烷、羧甲基纤维素钠、甲醇、二甲苯、浓氨水 分析纯,成都市科龙化工试剂厂生产;西贝母碱 纯度98%以上,由成都瑞芬思生物科技有限公司生产。太白贝母(野生)、太白贝母(栽培)、松贝、青贝、炉贝、平贝母 购自成都国际商贸城;醋酸地塞米松片 遂成药业股份有限公司;氢溴酸右美沙芬片 北京天衡药物研究院南阳天衡制药厂;SPF级昆明种小鼠 雌雄各半,体重18～22 g,成都达硕实验动物有限公司,动物质量合格证号:scxk(川)2013-24。

FA2004B型电子天平 上海越平科学仪器有限公司;AUW220D型电子分析天平 日本岛津公司;XMTD-4000型电热恒温水浴锅 北京市永光明医疗仪器有限公司;SHZ-D(Ⅲ)型循环水式真空泵 巩义市予华有限公司;KH2200DE型数控超声波清洗器 昆山禾创超声仪器有限公司;SB25-12D型超声波清洗仪 宁波新艺超声设备有限公司;PCD-E3000智能型电热恒温鼓风干燥箱 上海琅玕实验设备有限公司;EPED-E2-30TJ型实验室级超纯水器 南京易普易达科技发展有限公司;SPECORD® 200 PLUS型紫外分光光度计 德国耶拿分析仪器股份公司;YLS-8A型多功能诱咳引喘仪 济南益延科技发展有限公司。

1.2 实验方法

1.2.1 不同品种贝母总生物碱含量测定

1.2.1.1 供试品溶液制备 根据《中国药典》2015年版[1]和参考文献[6],分别精密称定各贝母样品粗粉1.0000 g,置于100 mL圆底烧瓶中,加入1.5倍量浓氨试液,密封浸润1 h后,再加20倍量三氯甲烷-甲醇(4∶1)混合溶液,80 ℃水浴回流提取2次,每次2 h,过滤,滤渣用10 mL三氯甲烷-甲醇(4∶1)洗涤,合并滤液,60 ℃减压浓缩至适当体积,转移并用三氯甲烷-甲醇(4∶1)混合溶液定容至50 mL容量瓶。分别取各供试品溶液5 mL置蒸发皿,60 ℃水浴挥去溶剂,精密加入三氯甲烷10 mL使其溶解,转移至分液漏斗中,再精密加水5 mL、0.05%溴甲酚绿缓冲液2 mL,密塞,剧烈振摇3 min,静置分层,取三氯甲烷层备用。

1.2.1.2 西贝母碱标准曲线的绘制 取西贝母碱对照品适量,精密称定,加三氯甲烷配制成每1 mL含0.2 mg的西贝母碱对照品储备溶液。精密量取西贝母碱对照品储备溶液0.1、0.2、0.4、0.6、0.8 mL,置10 mL容量瓶中,三氯甲烷定容,再转移至分液漏斗中,加蒸馏水5 mL、0.05%溴甲酚绿缓冲液(取溴甲酚绿0.05 g,用0.2 mol/L氢氧化钠溶液6 mL使其溶解,加磷酸二氢钾1 g,加蒸馏水溶解并稀释至100 mL)2 mL,密塞,剧烈振摇3 min,静置分层,取三氯甲烷液层,按照(《中国药典》2015年版通则0401)紫外-可见分光光度法,在415 nm的波长处测定吸光度,以吸光度为纵坐标,浓度为横坐标,绘制标准曲线。

1.2.1.3 方法学考察 精密度实验:精密称定太白贝母(栽培)1.0000 g,按“1.2.1.1”制备供试品溶液,415 nm波长下测定吸光度值,重复测定6次,计算吸光度值的RSD。

重复性实验:取太白贝母(栽培)6份,每份精密称定1.0000 g,按“1.2.1.1”制备供试品溶液,415 nm波长下测定吸光度值,计算其含量的RSD。

稳定性实验:取太白贝母(栽培)按“1.2.1.1”制备供试品溶液,分别在0、1、2、4、6、8 h时间点,415 nm波长测定吸光度值,重复测定6次,计算吸光度值的RSD。

加样回收率实验:取太白贝母(栽培)5份,每份精密称定1.0000 g,每份加入0.288 mg西贝母碱,按“1.2.1.1”制备供试品溶液,415 nm下测定吸光度值,计算回收率。

1.2.1.4 样品测定 取供试品于波长415 nm处测定吸光度,计算生物碱浓度。根据以下公式计算生物碱含量。生物碱含量(%)=生物碱浓度×体积×稀释倍数/样本质量×100=生物碱浓度×10 mL/1 g×10×100。

1.2.2 不同品种贝母提取物镇咳抗炎作用

1.2.2.1 受试药物制备 分别精密称定各贝母样品粗粉20.0000 g,照“1.2.1.1供试品溶液制备”项下提取,合并2次滤液及洗涤液,60 ℃减压浓缩得浸膏,加0.2%的CMC-Na(羧甲基纤维素钠)溶液溶解并定容至100 mL容量瓶,即得浓度为20 g生药/100 mL的溶液。将贝母临床用量的12倍确定为小鼠给药剂量,即2 g生药/kg。

表1 不同品种贝母生物碱含量Table 1 The alkaloid contents of varieties of Beimu

1.2.2.2 不同贝母提取物对浓氨水致小鼠咳嗽模型的作用 按参考文献[10]方法进行。昆明种小鼠90只,雌雄各半,随机将其分为8组(模型组、右美沙芬组、太白贝母(野生)组、太白贝母(栽培)组、松贝组、青贝组、炉贝组、平贝母组),标记,适应性喂养2 d。其后模型组给予10 mL/kg剂量的0.2% CMC-Na溶液,右美沙芬组给予9 mg/kg的氢溴酸右美沙芬溶液,其余6组贝母提取物组给予2 g生药/kg的相应贝母生物碱粗提物,均为等体积给药,给药体积为10 mL/kg。各组均灌胃3 d,每天1次,在第3 d给药1 h后,将小鼠放入多功能诱咳引喘仪中,给予20%氨水喷雾10 s,观察和记录小鼠咳嗽潜伏期(开始喷雾氨水至发生咳嗽的时间)和2 min内咳嗽次数(以腹部收缩,口部张开为指标记一次咳嗽),计算咳嗽抑制率,咳嗽抑制率(%)=(模型组平均咳嗽次数-用药组平均咳嗽次数)/模型组平均咳嗽次数×100。

表2 不同贝母提取物对浓氨水致小鼠咳嗽模型的作用Table 2 Effects of the total alkaloids of varieties of Beimu on the ammonia-stimulated mouse cough model(±s)

注：与模型组比较,*p<0.05,**p<0.01。与太白贝母(野生)组比较,#p<0.05,##p<0.01。与太白贝母(栽培)组比较,△p<0.05,△△p<0.01。与平贝母组比较,▲p<0.05,▲▲p<0.01。表3同。1.2.2.3 不同贝母提取物对二甲苯致小鼠耳廓肿胀模型的作用 按参考文献[10]方法进行。昆明种小鼠72只,雄性,随机将其分为8组并标记(模型组、地塞米松组、太白贝母(野生)组、太白贝母(栽培)组、松贝组、青贝组、炉贝组和平贝母组),适应性喂养2 d,其后模型组给予10 mL/kg剂量的0.2% CMC-Na溶液,阳性对照组给予1.2 mg/kg的醋酸地塞米松溶液,其余6组贝母提取物组给予2 g生药/kg的相应贝母提取物,均为等体积给药,给药体积为10 mL/kg。各组均灌胃3 d,在第3次给药1 h后,在每组小鼠右耳背腹两侧均匀涂布二甲苯各25 μL致炎,在1 h后颈椎脱臼处死,沿耳廓基线均匀剪下两耳,用直径为8 mm的打孔器打下左右两耳圆形组织块,分别称重。按照公式肿胀率(%)=(右耳重量-左耳重量)/左耳重量×100,并计算各用药组炎症抑制率,炎症抑制率(%)=(模型组平均肿胀度-用药组平均肿胀度)/模型组平均肿胀度×100。

1.3 数据统计与分析

2 结果与分析

2.1 不同品种贝母总生物碱含量测定结果

2.1.1 标准曲线的制备 按照1.2.2方法制作标准曲线,得到了R2值为0.9995的标准曲线,见图1。

图1 西贝母碱标准曲线Fig.1 The standard curve of imperialine

2.1.2 方法学考察结果 精密度实验结果显示,吸光度值RSD为2.14%,表明仪器的精密度良好。重复性实验结果显示,生物碱平均含量0.0576%,RSD为3.78%,表明本方法的重复性良好;稳定性实验结果显示,吸光度值RSD为3.25%,表明样品在8 h内稳定;加样回收率实验结果显示,西贝母碱的平均回收率为101.75%,RSD为4.29%。

2.1.3 不同品种贝母提取物生物碱含量测定结果 不同品种贝母样品中生物碱含量的测定结果,见表1，含量顺序为太白贝母(野生)>平贝母>青贝>松贝>炉贝>太白贝母(栽培)。

2.2 不同品种贝母总生物碱镇咳、抗炎作用研究

2.2.1 不同品种贝母总生物碱对浓氨水致小鼠咳嗽模型的作用 如表2所示,与模型组比较,右美沙芬组、松贝组和青贝组咳嗽潜伏期明显延长(p<0.05),其余组有延长的趋势,但无统计学意义(p>0.05);除太白贝母(野生)外的所有贝母组2 min咳嗽次数减少,差异有统计学意义(p<0.05或p<0.01),太白贝母(野生)组有2 min咳嗽次数减少趋势,但无统计学意义(p>0.05)。与太白贝母(野生)组比较,各组咳嗽潜伏期均无统计学差异(p>0.05);右美沙芬组、青贝组、炉贝组2 min咳嗽次数明显减少,有统计学意义(p<0.01);松贝组2 min咳嗽次数有减少趋势,无统计学意义(p>0.05)。与栽培太白贝母组比较,各组咳嗽潜伏期均无统计学差异(p>0.05);右美沙芬组、松贝组、青贝组、炉贝组2 min咳嗽次数明显减少(p<0.01)。与平贝母组比较,各组咳嗽潜伏期均无明显差异(p>0.05);右美沙芬组、松贝组、青贝组、炉贝组2 min咳嗽次数明显减少,有统计学意义(p<0.05)。太白贝母(野生)组、太白贝母(栽培)组、平贝母组三组两两比较,无明显差异(p>0.05)。

2.2.2 不同贝母总生物碱对二甲苯致小鼠耳廓肿胀模型的作用 如表3,与模型组比较,地塞米松组、平贝母组和松贝组耳廓炎症肿胀率明显减轻,差异有统计学意义(p<0.05或<0.01),太白贝母(栽培)组、青贝组、炉贝组耳廓炎症肿胀率有降低趋势,但无统计学意义(p>0.05);与野生太白贝母组比较,地塞米松组、松贝组、青贝组、炉贝组耳廓炎症肿胀率明显减轻,有统计学意义(p<0.05或p<0.01);与太白贝母(栽培)组比较,平贝母组、地塞米松组耳廓炎症肿胀率明显减轻(p<0.05),太白贝母(野生)组耳廓炎症肿胀率明显增高(p<0.01)。与平贝母组比较,模型组、太白贝母(野生)组、太白贝母(栽培)组、松贝组、青贝组、炉贝组耳廓炎症肿胀率明显增高(p<0.01)。

表3 不同贝母总生物碱对二甲苯致小鼠耳廓肿胀模型的作用Table 3 Effects of the total alkaloids of varieties of Beimu on the xylene-induced mouse ear edema model(±s)

2.2.3 药效学聚类分析结果 将各品种贝母镇咳、抗炎结果导入SPSS 13.0软件,采用中间数(Median clustering)平方欧式距离(Squared Euclidean distance)进行聚类,结果显示,不同品种贝母样品聚为两类,其中,松贝、青贝、炉贝和太白贝母(栽培)先聚为一小类后,再与太白贝母(野生)聚为一类,而平贝母单独聚为一类。

图2 不同贝母生物碱镇咳抑制率和抗炎抑制率聚类分析 Fig.2 Cluster-analysis on the cough and swelling inhibition ratesof the total alkaloids of varieties of Beimu

3 讨论

本研究按参考文献[6]和《中国药典》[1]方法,采用碱性溶剂(氨水)浸润,混合溶剂提取的方法对不同品种贝母总生物碱进行提取,并采用紫外分光光度法进行了含量测定,结果显示:不同品种的贝母提取物生物碱含量各贝母提取物总生物碱含量依次为太白贝母(野生)、平贝母、青贝、松贝、炉贝、太白贝母(栽培)。均符合《中华人民共和国药典》2015年版川贝母的质量控制标准。含生物碱最高的为太白贝母(野生),最低的为太白贝母(栽培)。

既往研究表明,传统川贝母、太白贝母、平贝母具有抗炎、镇咳等作用[9-12]。李萍等比较了传统川贝母与平贝母生物碱镇咳作用。沈力等研究了太白贝母与暗紫贝母镇咳活性,但未对比生物碱镇咳活性[13]。尚无报道对传统川贝母、太白贝母、平贝母生物碱多种药理作用进行综合比较研究。本研究镇咳作用药理实验表明,平贝母、青贝、松贝、炉贝、太白贝母(栽培)总生物碱可明显减少氨水刺激法建立小鼠咳嗽模型咳嗽次数,松贝、青贝总生物碱可延长咳嗽潜伏期。与太白贝母(栽培)、平贝母比较,松贝、青贝、炉贝总生物碱减少氨水刺激法建立小鼠咳嗽模型咳嗽次数效果更佳。由此可见,相比传统川贝母,太白贝母、平贝母止咳效果更差。抗炎作用药理研究表明,平贝母、松贝总生物碱可明显减轻二甲苯致耳廓肿胀模型肿胀度;平贝母较松贝减轻二甲苯致耳廓肿胀模型肿胀度效果更佳。由此可见,相比松贝、青贝、炉贝,平贝母总生物碱抗炎效果更佳,太白贝母提取物抗炎效果不明显。抗炎作用结合生物碱含量分析,除太白贝母(野生)外,平贝母含量最高,抗炎效果亦最好。镇咳作用结合生物碱含量分析,太白贝母(野生)、平贝母生物碱含量最高,但镇咳效果较旧品种差。太白贝母(栽培)生物碱含量较旧品种低,其镇咳效果较旧品种差。有研究表明,太白贝母较平贝母与暗紫贝母、甘肃贝母生物碱种类更为接近[14]。进一步研究证实平贝母中含有平贝母碱甲、平贝母碱乙、平贝母碱苷、去氢贝母碱等,而在川贝母中未见报道[14-15]。而太白贝母生物碱成分与暗紫贝母总生物碱提取液主要色谱峰基本相似,有一定化学等效性[16]。结合本研究药效实验结果和物质基础测定,我们可以推断太白贝母栽培品生物碱组成应比平贝母更接近川贝母旧品种。但本研究仅对贝母总生物碱含量进行了测定,而其中具体生物碱的种类和含量不得而知。体外研究表明,平贝母主要成分去氢贝母碱可抑制HMC-1细胞介导的急性炎症反应[17]。而太白贝母和暗紫贝母、甘肃贝母中未发现去氢贝母碱[14]。川贝母和平贝母之间的抗炎药效差异是否由去氢贝母碱产生,值得进一步研究。同理,根据物质基础含量和药效研究结果,太白贝母野生品可能与太白贝母栽培品、川贝母旧品种物质基础差异较大。其原因应进一步研究。

贝母品种之间的镇咳作用差异和抗炎作用差异不一致。若要综合镇咳作用和抗炎作用,比较太白贝母、平贝母、松贝、青贝、炉贝提取物的药理作用,并进行分类,需借助一定数据分析手段。聚类分析是一种探索性的分类方法,可将数据按照自身规律进行分类,使数据分析结果更为客观[18]。如晁显玉等[19]以微量元素含量为指标,应用主成分分析法,结合SPSS软件对10种清热类中药中的微量元素进行聚类分析。蔡宇等[20]对具有耐药逆转作用的数种中药成分进行聚类分析。本研究以镇咳、抗炎抑制率为指标,对6种贝母生物碱粗提物药效进行聚类分析,结果显示,太白贝母与松贝、青贝、炉贝聚为一类,而与平贝母分离。单就生物碱镇咳、抗炎药效而言,太白贝母与旧品种更为相似。市售太白贝母多为栽培品。本研究表明,太白贝母(野生)抗炎作用不明显,有一定镇咳趋势;而太白贝母(栽培)镇咳作用明确,作用弱于旧品种,且有一定抗炎趋势。由此可见,《中国药典》将太白贝母特别是其栽培品作为川贝母的新基源有一定理论基础。而平贝母之所以与川贝母新旧品种药效差异较大,可能与其生物碱组成与川贝母不同有关。但考虑到平贝母生物碱抗炎效果较川贝母优,镇咳效果虽弱于旧品种,与太白贝母相当。建议将平贝母作为川贝母新来源候选品种进一步研究。可从物质基础(生物碱、皂苷的组成、含量等)、药效(镇咳、抗炎、祛痰、平喘等)等方面进行。

4 结论

综上,平贝母总生物碱含量较川贝母旧品种、太白贝母(栽培)含量高,与太白贝母(野生)含量接近;镇咳作用弱于川贝母旧品种,与新品种相当;抗炎作用优于新旧品种。其镇咳、抗炎综合效应与新旧川贝母有一定区别。原因可能是平贝母生物碱组成与川贝母新旧品种差异较大。但考虑到其抗炎效果明显,亦可作为候选新品种进一步研究。

[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典[S].北京:中国医药科技出版社,2015:36.

[2]张国燕,陈志,尚军.川贝母种源探讨[J].亚太传统医药,2016,12(21):34-37.

[3]国家药典委员会.中华人民共和国药典[S].北京:中国医药科技出版社,2005:27.

[4]国家药典委员会.中华人民共和国药典[S].北京:中国医药科技出版社,2010:34.

[5]游燕.贝母类药材的分类及其功效、化学成分、药理作用之比较[J].江苏中医药,2010,42(2):57-58.

[6]李萍,季晖,徐国钧,等.贝母类中药的镇咳祛痰作用研究[J].中国药科大学学报,1993,24(6):360-362.

[7]D Wang,S Wang,X Chen,et al.Antitussive,expectorant and anti-inflammatory activities of four alkaloids isolated from Bulbus of Fritillaria wabuensis[J].Journal of Ethnopharmacology,2012,139(1):189-193.

[8]王冲之,孙健,李萍.贝母类药材生物碱及生物碱苷含量测定方法学研究[J].中国药学杂志,2003,38(6):415-418.

[9]晏子俊,罗燕秋,李作燕,等.暗紫贝母及浙贝母镇咳作用的化学刺激引咳法比较[J].时珍国医国药,2012,23(10):2522-2525.

[10]马鹏,王丽,王娅民,等.太白贝母的止咳、祛痰和抗炎作用研究[J].中药药理与临床,2014,30(1):87-92.

[11]Huang LJ,Gao WY,Li X,et al.Investigation of the Anti-inflammatory and Synergistic Activities of Bulbus Fritillariae ussuriensis and Xuehua Pear using Acute Inflammatory Models[J]. Latin American Journal of Pharmacy,2010;29(6):955-961.

[12]杜少芬.川贝母、平贝母有效性的比较[J].中药新药与临床药理,1996(2):45-46.

[13]沈力,马羚,刘书显,等.太白贝母与暗紫贝母镇咳祛痰药理作用比较研究[J].实用中医药杂志,2012,28(9):784-785.

[14]李萍,徐国钧.中药贝母类的资源利用研究[J]. 植物资源与环境,1993,2(3):12-17.

[15]张立富,孙健,温庆辉,等.平贝母和给药平贝母后大鼠尿液内化学成分LC-MS n分析[J]. 中国药物警戒,2014,11(4):204-209.

[16]周浓,郭冬琴,沈力,等.太白贝母与暗紫贝母中4种生物碱的含量比较[J].食品科学,2014,35(12):133-136.

[17]Bina Lee,Eun-Young Kim,Jae-Hyun Kim,et al. Antiallergic effects of peiminine through the regulation of inflammatory mediators in HMC-1 cells[J].Immunopharmacology and Immunotoxicology,2015,37(4):351-358.

[18]李永健,方肇勤.聚类分析在中医药研究中的应用与思考[J].南京中医药大学学报:自然科学版,2001,17(3):182-185.

[19]晁显玉,曹红翠. 清热类中药微量元素的主成分分析和聚类分析研究[J].安徽农业科学,2010,38(5):2364-2365.

[20]蔡宇,蔡天革,余绍蕾.基于聚类分析对中药活性成分逆转HL60/HTM耐药性评价研究[J].中成药,2010,32(3):379-382.

Comparative study on the content determination and the anti-tussive and anti-inflammatory effects of the total alkaloids of Pingbeimu and Chuanbeimu

CHEN Hong-zhu1,ZHANG Shi-yang1,HUANG Ya-bin1,LI Sheng-mao2,CHEN Jin-feng1,AO Hui1,*

(1.Chengdu University of TCM,Chengdu 611137,China; 2.North Sichuan Medical College,Nanchong 637000,China)

Objectives:To compare the anti-tussive and anti-inflammatory effects of the total alkaloids of the new and old varieties of Pingbeimu and Chuanbeimu,and to explore the feasibility of Pingbeimu as a new candidate source of Chuanbeimu. Methods:The total alkaloids of varieties of Beimu were extracted by reflux,the alkaloid contents were determined by the UV spectrophotometry,the pharmacodynamic effects of the total alkaloids of varieties of Beimu on the ammonia-stimulated mouse cough model and the xylene-induced mouse ear edema model were compared. The cough and swelling inhibition rates of the total alkaloids were cluster-analyzed.Results:The line of the alkaloids contents went from wild Taibaibeimu,Pingbeimu and Qingbei to Songbei and then down to Lubei and finally to cultivated Taibaibeimu. The total alkaloids of the three old varieties and cultivated Taibaibeimu could significantly reduce the coughing number of the ammonia-stimulated mouse cough model and the old varieties possessed better effect than Pingbeimu and the new variety. The total alkaloids of Songbei and Qingbei could obviously prolong the coughing incubation period. The total alkaloids of Songbei and Pingbeimu could significantly reduce the xylene-induced mouse ear inflammation swelling degree and Pingbeimu had better anti-inflammatory effect. Cluster analysis showed that the cough and swelling inhibition rates of the old varieties were clustered into those of Taibaibeimu but separated from those of Pingbeimu,which showed that the total alkaloids of Pingbeimu were different from Chuanbeimu. Conclusion:The composition and the anti-tussive and anti-inflammatory effects of Pingbeimu were diffenent from that of Chuanbeimu,Pingbeimu,as a new candidate source of Chuanbeimu deserved further study.

Pingbeimu;Chuanbeimu;alkaloids;anti-tussive;anti-inflammatory

2017-01-13

陈泓竹(1994-)，女，学士，主要从事中药药效物质基础研究，E-mail：894468563@qq.com。

*通讯作者:敖慧(1980-)，女，博士，副教授，主要从事中药药食两用产品加工与应用研究，E-mail：aohui2005@126.com。

四川省科技支撑项目——中药种质资源库关键技术及示范(2014SZ0156)；中药资源四川省青年科技创新研究团队(2015500028)。

TS201.1

A

1002-0306(2017)15-0063-05

10.13386/j.issn1002-0306.2017.15.014