潮州地区糖尿病与葡萄糖—6—磷酸脱氢酶缺乏症的相关性研究

朱钰钰　林芬　吴教仁　黄泽伟　陈伟立

【摘要】 目的 研究潮州地區糖尿病与葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（G6PD）缺乏症的相关性。方法 在

全自动生化分析仪上应用速率法定量检测潮州地区1166例糖尿病患者的G6PD活性， 应用膜反向斑点杂交法检测常见的6个G6PD基因突变位点， 应用DNA测序技术分析未知突变样本。另取潮州地区4221例健康体检者作为研究对象， 记录G6PD缺乏症发生情况。结果 在1166例糖尿病患者中检出G6PD缺乏症41例， 男15例， 女26例。G6PD缺乏症在潮州地区糖尿病人群的发生率为3.52%， 其中男性发生率为2.53%， 女性发生率为4.53%。在41例G6PD缺乏症患者中检出9种基因突变的类型， 分别是c.1376G>T、c.1388G>A 、c.1024C>T 、c.392G>T 、c.95A>G、c.871G>A、 c.517T>C、c.1376G

>T/ⅣSX1193T>C/c.1311C>T和c.1311C>T/ⅣSX1193T>C。潮州地区健康体检人群G6PD缺乏症的发生率（3.36%）与糖尿病人群（3.52%）比较， 差异无统计学意义（P>0.05）， 而且女性的发生率都高于男性。

结论 潮州地区糖尿病患者G6PD缺乏症的发生率与本地区健康体检人群G6PD缺乏症的发生率很接近， 显示两者之间无明显的相关性。

【关键词】 糖尿病；葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症；相关性

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2017.23.004

Study on correlation between diabetes and glucose - 6 - phosphate dehydrogenase deficiency in Chaozhou area ZHU Yu-yu， LIN Fen， WU Jiao-ren， et al. Department of Clinical Laboratory， Nanfang Medical University Affiliated Chaozhou Central Hospital， Chaozhou 521021， China

【Abstract】 Objective To study the correlation between diabetes and glucose - 6 - phosphate dehydrogenase （G6PD） deficiency in Chaozhou area. Methods Quantitative detection of G6PD activity in 1166 diabetic patients in Chaozhou area was performed on the automatic biochemical analyzer. 6 common G6PD mutation sites were detected by membrane reverse dot blotting. Unknown mutant samples were analyzed by DNA sequencing technology. There were another 4221 healthy physical examination persons in Chaozhou District as study subjects， and the occurrence of G6PD deficiency was recorded. Results Among 1166 diabetic patients， there were 41 G6PD deficiency cases， including 15 male cases and 26 female cases. Incidence of G6PD deficiency was 3.52% in diabetic population of Chaozhou area， with incidence of male as 2.53%， and incidence of female as 4.53%. There were 9 mutations in 41 G6PD deficiency cases， respectively as c.1376G>T， c.1388G>A， c.1024C>T， c.392G>T， c.95A>G， c.871G>A， c.517T>C， c.1376G>T/ⅣSX1193T>C/ c.1311C>T and c.1311C>T/ⅣSX1193T>C. Physical examination population had no statistically significant difference in incidence of G6PD deficiency （3.36%） comparing with diabetic population （3.52%） in Chaozhou area （P>0.05）， and the female had higher incidence than male. Conclusion The incidence of G6PD deficiency in diabetes patients in Chaozhou area is close to the incidence of G6PD deficiency in the local physical examination population， indicating no significant correlation between the two.

【Key words】 Diabetes； Glucose - 6 - phosphate dehydrogenase deficiency； Correlation

糖尿病是以高血糖为特征的慢性代谢性疾病， 近年来在广东省的患病率成倍增长， 是危害严重的疾病之一。G6PD缺乏症是一种最常见的遗传性溶血性红细胞酶缺陷病， 在我国呈南高北低的分布特点， 广东省是G6PD缺乏症的高发区。国外研究认为G6PD缺乏症是糖尿病发病的危险因素[1]， 国内对两者的相关性研究较少， 在广东省粤东地区则尚未见报道。因此， 作者通过生化及分子生物学的手段研究广东省潮州地区糖尿病患者G6PD缺乏症的发生率及基因突变类型， 探讨糖尿病与G6PD缺乏症之间的相关性。

1 资料与方法

1. 1 一般资料 选取经本院确诊， 符合世界卫生组织（WHO）诊断标准的潮州地区糖尿病患者1166例， 其中男592例， 女574例， 年龄20～85岁， 经户籍调查98%为讲潮州方言的潮籍人， 相互之间无血缘关系。另取潮州地区4211例健康体检者， 将其G6PD缺乏症发生情况作为对照[2]。

1. 2 方法

1. 2. 1 标本采集 清晨空腹采集静脉血2 ml置EDTA-K2抗凝的真空管， 保存于4℃ 冰箱。

1. 2. 2 G6PD活性定量检测 应用速率法在日立全自动生化分析仪上检测G6PD活性， 应用HiCN法检测血液中血红蛋白浓度， 以G6PD<6.3 U/gHb判断为G6PD缺乏。

1. 2. 3 基因组DNA提取 采用深圳亚能生物科技有限公司的试剂盒提取DNA。

1. 2. 4 G6PD基因突变检测 采用膜反向斑点杂交法进行基因检测， 检测常见的6个G6PD基因突变位点：c.1376G>T、c.1388G>A 、c.1024C>T 、c.1004C>T 、c.871G>A、 c.95A>G。

1. 2. 5 DNA测序 部分膜反向斑点杂交法未能检测出基因突变类型的标本， 设计10对引物用于第2～13号外显子的扩增及基因测序。

1. 2. 6 鉴定基因突变类型 将测序序列用BLAST进行比对， 同时对测序图谱应用Chromas软件直接分析， 从而鉴定基因突变类型。

2 结果

2. 1 在1166例糖尿病患者中检出G6PD缺乏症41例， 男15例， 女26例。G6PD缺乏症在潮州地区糖尿病人群的发生率为3.52%， 其中男性发生率为2.53%（15/592）， 女性发生率为4.53%（26/574）。

2. 2 在41例G6PD缺乏症患者中检出9种基因突变的类型， 分别是c.1376G>T、c.1388G>A、c.1024C>T、c.392G>T、c.95A>G、c.871G>A、c.517T>C、c.1376G>T/ⅣSX1193T>C/ c.1311C>T和c.1311C>T/ⅣSX1193T>C。见表1。

2. 3 作者调查了近年来潮州地区健康体检人群G6PD缺乏症的发生情况， 与潮州籍糖尿病人群进行比较。潮州地区健康体检人群G6PD缺乏症的发生率（3.36%）与糖尿病人群（3.52%）比较， 差异无统计学意义（P>0.05）， 而且女性的发生率都高于男性。见表2。

3 讨论

国外研究认为糖尿病患者G6PD缺乏症的发生率高于正常人群[3]， 国内的报道却有争议， 韩家莲等[4]研究显示糖尿病与G6PD缺乏症无遗传关联性， 而阚丽娟等[5]的研究跟国外一致， 也显示糖尿病患者的G6PD缺乏发生率高于健康人群， 因此探索糖尿病与G6PD缺乏症之间的相关性具有重要的意义。作者从1166例潮州籍糖尿病患者中检出G6PD缺乏症41例， 发生率为3.52%， 与本地区体检人群G6PD缺乏症的发生率（3.36%）很接近， 显示两者之间无相关性。作者认为与国外文献的报道不一致[3， 6]， 可能是种族的差异导致的结果不一致。而国内的研究对象无种族差异， 但研究人群所在地域不同， G6PD缺乏症的发生率也相差甚远[7]， 地域的差异性也可能是导致结果不一致的因素。

通过检测， 糖尿病患者G6PD缺乏症中最常见的基因突变类型分别是c.1376G>T、c.1388G>A 、c.1024C>T和c.392G>T

（并列）， 也与潮州地区健康人群的基因突变类型基本一致[2]。

国内多数文献报道认为G6PD缺乏症的发生率男性高于女性， 而作者无论是在潮州地区调查的健康人群还是糖尿病人群， 均检测出女性明显高于男性。作者认为可能与检测方法有关， 以往部分女性杂合子用常规生化检测无法确认。本研究能通过定量检测G6PD活性， 较好确定截断值， 并通过分子生物学的手段检测基因突变的类型。作者检测出c.1376G>T/ⅣSX1193T>C/ c.1311C>T和c.1311C>T/ⅣSX1193T>C，

为女性杂合子复合突变类型。

临床研究表明糖尿病患者合并G6PD缺乏症时， 应用磺脲类等降糖药容易诱发急性溶血的发生[8-10]。因此， 对于已明确诊断的糖尿病患者， 有必要筛查是否合并G6PD缺乏症， 谨慎用药， 避免使用抗氧化药物， 警惕并发症的发生。

参考文献

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[10] 李健. 高龄2型糖尿病患者合并葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症急性溶血一例报道. 中国糖尿病杂志， 2015， 23（10）：944-945.

[收稿日期：2017-06-20]