p16INK4A、p53联合Ki-67对宫颈病变的检测价值

郭 静

（抚顺矿务局总医院，辽宁 抚顺 113008）

p16INK4A、p53联合Ki-67对宫颈病变的检测价值

郭 静

（抚顺矿务局总医院，辽宁 抚顺 113008）

目的探讨p16INK4A、p53联合Ki-67对宫颈病变的检测价值。方法取我院病理科2014年1月至2017年1月宫颈病变的患者，共计100例，取得病理组织蜡块，共100块。选择我院同期宫颈活检为慢性宫颈炎的患者为对照组，共100例。以病理结果为金标准，分析①研究组和对照组p16INK4A、p53及Ki-67阳性表达率。②不同病理组织p16INK4A、p53、Ki-67阳性表达率。结果①研究组和对照组p16INK4A、p53联合Ki-67阳性表达率比较有差异（P＜0.05）。②不同病理组织p16INK4A、p53、Ki-67阳性表达率存在差异。结论测定p16INK4A、p53、Ki-67的表达水平，有助于宫颈病变的检测。

p16INK4A；p53；Ki-67；ER

宫颈癌是最常见的妇科恶性肿瘤之一，发病率仅次于乳腺癌位于女性肿瘤的第二位[1]。全球超过85%宫颈癌发生在中低收入国家。我国人口基数大，每年新发约占全世界的1/3，随着女性初潮年龄的提前，性生活的紊乱，造成宫颈癌发病率呈年轻化趋势。宫颈癌的发病漫长，通过早发现、早诊断宫颈上皮内瘤病可以预防宫颈癌的发生。目前有研究显示宫颈病变的发生发展与细胞增殖关系密切。p16ink4a、p53和Ki-67是调节细胞周期的重要蛋白。因此本文拟取我院病理科2014年1月至2017年1月宫颈病变的患者，分析p16INK4A、p53、Ki-67在宫颈病变中的诊断价值。

1 资料与方法

1.1 病例选择：取我院病理科2014年1月至2017年1月宫颈病变的患者，共计100例，取得病理组织蜡块，共100块。选择同期我院同期宫颈活检为慢性宫颈炎的患者为对照组，共100例。病理组织蜡块诊断依照WHO（2014）女性生殖器官肿瘤分类标准[2]。所有患者均未接受过诊断宫颈病变的物理治疗、生物治疗、化疗治疗，无其他系统的恶性肿瘤。

1.2 方法

1.2.1 主要仪器：石蜡切片机、超净工作台、烤片机、冷藏冰箱、染色机及光学显微镜。

1.2.2 步骤：①制作组织切片，选择有代表性区域定位，并在相应的石蜡组织块上标记。②做空白蜡块，并打孔，从已标记的石蜡组织块上钻取组织直径2 mm，转移到空白蜡块的相应位置。③进行免疫组化，选择p16INK4A、p53、Ki-67单克隆抗体。④用TBS液代替一抗作阴性对照，采用乳腺癌组织作为阳性对照。

1.2.3 结果判定：宫颈组织切片中细胞核或细胞质出现棕黄色颗粒为p16ink4a阳性表达；宫颈组织切片中细胞核呈棕黄色为p53，Ki-67阳性反应。

1.3 观察指标：以病理结果为金标准，分析研究组和对照组p16INK4A、p53及Ki-67阳性表达率；不同病理组织p16INK4A、p53、Ki-67阳性表达率。

1.4 统计学方法：用SPSS17.0软件，计数资料用（%）表示，χ2检验，P＜0.05为差异有意义。

2 结 果

2.1 研究组和对照组p16INK4A、p53及Ki-67阳性表达率对比：研究组和对照组p16INK4A、p53及Ki-67阳性表达率比较有差异（P＜0.05），见表1。

表1 研究组和对照组p16INK4A、p53及Ki-67阳性表达率对比

2.2 不同病理组织p16INK4A、p53、Ki-67阳性表达率：不同病理组织p16INK4A、p53、Ki-67阳性表达率表达情况不一，宫颈鳞癌组织中p16INK4A阳性率最高，与其余病变组织阳性率存在明显差异（P＜0.05）；宫颈鳞癌组织与CINⅢ组织的p53阳性率明显高于其余组织，存在明显差异（P＜0.05）；CINⅢ、CINⅡ、CINⅠ组织中Ki-67阳性率高于尖锐湿疣，存在明显差异（P＜0.05），见表2。

表2 不同病理组织p16INK4A、p53、Ki-67阳性表达率

3 讨 论

p16INK4A由INK4A编码的一种抑癌基因，定位于9p21，全长815 kB，编码相对分子质量为15.84 ku的蛋白质。p16INK4A是细胞周期G1-S期调控点的重要调控者。有研究指出[2]p16INK4A与细胞周期素D1竞争性地结合CDK4/CDK6，阻止细胞进入S期，导致肿瘤的形成。通过大量研究证实，肿瘤抑制基因P16ink4a在宫颈鳞癌中高表达，而在正常宫颈上皮低表达。可能与p16INK4A表达增高时，使E2F转录因子活化，减弱了pRb磷酸化有关。此外还有学者指出检测P16ink4a蛋白表达更优于HPV检测。本次研究中我们发现慢性宫颈炎患者中p16INK4A表达阳性率为0%，随着病理分级的增加，p16INK4A阳性率明显提高[3]。同样有研究显示p16INK4A可作为CIN分级、进展的生物学指标。宫颈癌中组织分化越低，p16INK4A表达越低。

p53蛋白定位于17号染色体短臂1区13带，由三个功能区组成：N端、C端、中间的 DNA序列结合区。p53是一种抑癌基因，野生型p53有修复DNA的作用。突变型p53有致癌的作用。目前众多研究显示p53的异常表达与宫颈癌有关[4]。同样本次研究发现宫颈鳞癌p53蛋白表达阳性率明显增高，且p53与EGFR、P16可能相互作用，有协同变化的趋势。

Ki-67存在于细胞周期中除G0期以外的所有阶段，是细胞周期进展和增殖期细胞的核抗原。对鉴别指出宫颈炎症改变和CIN有重要意义。本次研究发现CINI、CINⅡ、CINⅢ组织中Ki-67表达均为阳性。同样有学者指出CIN级别与Ki-67表达有明显相关性，发现Ki-67表达后，最重要观察的是其出现部位，宫颈上皮全层2/3以上出现Ki-67表达阳性时能够提高CIN诊断的特异性。

综上所述，本文认为测定p16INK4A、p53、Ki-67表达水平，有助于宫颈病变的检测。

[1] 孟静雯,洪颖,孟凡青,等.宫颈脱落细胞中端粒酶RNA基因和C-myc基因的表达及临床意义[J].江苏医药,2013,39(16):1900-1903.

[2] 张楚悦,吴丹,潘蕾,等.联合检测脱落细胞中p16INK4A、Brn3a和端粒酶等因子的表达对预测宫颈病变进展的价值[J].肿瘤, 2013,33(12):1101-110.

[3] 施浩帆,李真,谭骥.P16INK4A、Brn-3a、C-myc及端粒酶在宫颈癌中的诊断价值研究[J].临床肿瘤学杂志,2015,20(6):506-511.

[4] 冯仙明,庞燕,梁锦辉.宫颈病变组织中P53、Ki-67、CD34的表达及临床意义[J].肿瘤药学,2015,5(6):449-453.

R711.74 文献标识码：B 文章编号：1671-8194（2017）23-0059-02