对注射用甲磺酸罗哌卡因中光学异构体含量检测方法的研究

杨仕杰

（哈尔滨三联药业股份有限公司,黑龙江 哈尔滨 150025）

对注射用甲磺酸罗哌卡因中光学异构体含量检测方法的研究

杨仕杰

（哈尔滨三联药业股份有限公司,黑龙江 哈尔滨 150025）

目的：研究用HPLC法（高效液相色谱法）对注射用甲磺酸罗哌卡因中光学异构体含量进行检测的效果。方法：使用HPLC法对注射用甲磺酸罗哌卡因中光学异构体含量进行检测，检测时采用α-酸糖蛋白柱，将0.02mol/L的磷酸盐缓冲液-异丙醇（90：10）作为流动相，检测时的波长为210nm，柱温为30℃。结果：甲磺酸罗哌卡因光学异构体的进样量在2.118ng～21.18ng范围内，其进样浓度与色谱峰面积的线性关系良好，其平均回收率为99.28%，RSD为0.69%（n=9）。结论：用HPLC法对注射用甲磺酸罗哌卡因中光学异构体的含量进行检测具有灵敏度高的优点。

甲磺酸罗哌卡因；光学异构体；含量；HPLC；检测

甲磺酸罗哌卡因属于酰胺类局部麻醉药。此药具有升高神经动作电位的阈值和延缓神经冲动传导的作用，因此常用于外科手术麻醉[1]。在本次研究中，笔者根据国家药典委员会发布的相关标准[2]，使用HPLC法对注射用甲磺酸罗哌卡因中光学异构体的含量进行检测，现报告如下：

1 仪器与试剂

高效液相色谱仪；色谱柱：α-酸糖蛋白柱（4.6mm×300mm×5μm）；注射用甲磺酸罗哌卡因（批号为：160101、160102、160103，由我公司实验室自制）；甲磺酸罗哌卡因对照品(含量为99.5%，购自中检所）；甲磺酸罗哌卡因光学异构体对照品（购自中检所）。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

本次检测的条件为国家药典委员发布的注射用甲磺 酸罗哌卡因标准征求意见稿中规定的色谱条件。具体条件为色谱柱：α-酸糖蛋白柱；将0.02mol/L的磷酸盐缓冲液-异丙醇（90：10）作为流动相；检测的波长：210nm；柱温：30℃；流速：1.0ml/min；进样量：30μl。

2.2 供试品溶液的制备

精密称取适量的甲磺酸罗哌卡因样品，加入流动相溶解并稀释成每1ml中约含甲磺酸罗哌卡因0.1mg的溶液，将其作为供试品溶液。

2.3 对照溶液的制备

精密量取供试品溶液1ml，将其置于200ml的量瓶中，用流动相将其稀释至刻度，摇匀，将其作为对照品溶液。

2.4 混合对照品溶液的制备

取甲磺酸罗哌卡因光学异构体对照品与甲磺酸罗哌卡因对照品各适量，用流动相将其溶解并稀释制成每1ml中含0.05mg的混合对照品溶液。

2.5 进行系统适用性试验

精密量取混合对照品溶液20µl，将其注入色谱仪，记录其色谱图。结果显示，甲磺酸罗哌卡因光学异构体峰与甲磺酸罗哌卡因峰的分离度大于2.0，符合检测的要求。

2.6 进行专属性实验

按照处方量精密称取实验品中的辅料，按照供试品溶液的稀释方法将其配制成辅料空白溶液。精密量取辅料空白溶液20µl，将其注入色谱仪，并记录其色谱图。结果显示，辅料空白溶液在甲磺酸罗哌卡因光学异构体的出峰处无干扰。

2.7 进行溶液稳定性试验

取适量的供试品溶液，分别于0h、1h、2h、3h、4h、5h、6h、7h和8h对其进行进样处理，以验证其稳定性。结果显示，甲磺酸罗哌卡因峰面积的RSD在8h内为0.9%，甲磺酸罗哌卡因光学异构体峰面积的RSD在8h内为1.9%。这说明，甲磺酸罗哌卡因及其光学异构体溶液在8h内的稳定性良好。

2.8 进行甲磺酸罗哌卡因及其光学异构体的线性试验

精密称取甲磺酸罗哌卡因及其光学异构体对照品适量，分别配制成每1ml含甲磺酸罗哌卡因及其光学异构体浓度为0.1μg、0.3μg、0.5μg、0.8μg、1.0μg的混合对照溶液。将所有混合对照溶液均进样为20μl，记录其谱图，然后以每个混合对照溶液的峰面积为纵坐标，其进样量为横坐标，进行线性回归试验。结果显示，甲磺酸罗哌卡因光学异构体的进样量在2.118ng～21.18ng的范围内，其进样浓度与色谱峰面积的线性关系良好。

2.9 进行检测限试验

对2.8中浓度最低的对照品溶液进行进一步的稀释，在信噪比为10：1时计算其检测限。结果显示，在将2.8中浓度最低的对照品溶液注入液相色谱仪后，其色谱峰的信噪比约为10：1，因此可以得出，甲磺酸罗哌卡因的检测限为2.164ng，甲磺酸罗哌卡因光学异构体的检测限为2.118ng。

2.10 进行回收率试验

取批号为160101的甲磺酸罗哌卡因样品9份，将它们分成3组。按照供试品溶液稀释的方法对其进行配制。在每1ml溶液中分别加入甲磺酸罗哌卡因光学异构体对照品0.15μg、0.25μg、0.35μg，并按照规定的方法将其分别配制对照溶液，然后量取以上溶液各20μl进行进样检测。结果显示，供试品溶液的平均回收率为99.28%，RSD为0.69%。这说明此检测方法的回收率较好。

2.11 进行精密度试验

取适量批号为160101的甲磺酸罗哌卡因样品，按照规定的配制方法将其配制成混合对照品溶液、对照溶液和供试品溶液。然后在不同的日期，由不同的人员用不同的仪器在规定的检测条件下对对照品溶液、对照溶液和供试品溶液进行进样检测。结果显示，甲磺酸罗哌卡因光学异构体的RSD为1.26%。这说明此检测方法的精密度良好。

2.12 进行重复性试验

取适量取批号为160101的甲磺酸罗哌卡因样品，按照规定的配制方法将其配制成混合对照品溶液、对照溶液和供试品溶液各6份，再按照规定的检测条对其进行进样检测。结果显示，甲磺酸罗哌卡因光学异构体的RSD为1.02%。这说明此检测方法的重复性良好。

2.13 进行耐用性试验

取适量批号为160101的甲磺酸罗哌卡因样品，按照规定的配制方法将其配制混合对照品溶液、对照溶液和供试品溶液，并将其流速分别调整为1.0ml/分、0.8ml/分、1.2ml/分，将其流动相的pH值调整为6.8，7.1，7.4，将其柱温调整为25℃、30℃、35℃。分别精密量取以上各溶液20μl进行进样检测。结果显示，上述溶液在检测条件发生轻微改变后，其光学异构体的峰分离度仍符合要求，对检测结果无明显影响。这说明此检测方法的耐用性较好[3]。

2.14 进行光学异构体检查

取适量批号为160101、160102和160103的甲磺酸罗哌卡因样品，按照规定的配制方法将其配制供试品溶液，并将其流速调整为1.2ml/分。在35℃的条件下按照标准程序对这三组供试品溶液进行光学异构体检查。检查的结果为，160101号样品光学异构体的含量为0.23%，160102号样品光学异构体的含量为0.26%，160103样品光学异构体的含量为0.28%。结果见表1。

表1 光学异构体的检查结果（%）

3 讨论

本次研究的结果显示，甲磺酸罗哌卡因光学异构体的进样量在2.118ng～21.18ng范围内，其进样浓度与色谱峰面积的线性关系良好，其平均回收率为99.28%，RSD为0.69%（n=9）。这说明，用HPLC法对注射用甲磺酸罗哌卡因中光学异构体的含量进行检测具有灵敏度高的优点。此方法值得推广使用。

[1] 武玉洁,程瑶,陈芳芳,等.一种盐酸罗哌卡因注射液及其制备方法[P].N104208020A.2014.

[2] 曹冬冬.HPLC法测定甲磺酸罗哌卡因R对映体的含量.福建分析测试[J]，2011,20（2）：40～41.

[3] 注射用甲磺酸罗哌卡因标准（征求意见稿）[R].国家药典委员会.2015.

TQ460.7

B

2095-7629-（2017）7-0118-03