利用酵母和芽孢杆菌培养海水轮虫的技术初探

■ 甘松永 黄锦雄 张敏 林佩玲 石和荣 （广东省海洋渔业试验中心）

利用酵母和芽孢杆菌培养海水轮虫的技术初探

■ 甘松永 黄锦雄 张敏 林佩玲 石和荣 （广东省海洋渔业试验中心）

褶皱臂尾轮虫属轮虫门，单卵巢纲，单巢目，游泳臂尾轮虫科，臂尾轮虫属。具有分布范围广，适应能力强，生长快，营养丰富，大小适中，适口性好的特点,是海水鱼苗培育前期的理想饵料。随着种苗培育密度不断提高，作为优质活饵料的海水轮虫的需求量也不断增大，能否持续生产海水轮虫，已成为种苗培育成败的关键因素。

轮虫的食性广泛，单胞藻，细菌，酵母，甚至豆浆，发酵鱼浆，有机碎屑，均可作为其培育的饵料。豆浆，发酵鱼浆，有机碎屑一般用作土池培育轮虫用，易受天气，水质等因子影响，生产不稳定。室内工厂化培育轮虫，常见用单胞藻方式进行培育，由于轮虫食量大，受单胞藻培养场地的限制，在进行大规模轮虫培育时很难做到足量供应。虽然采用特有的培育装置，以浓缩小球藻为饵料，培育的轮虫密度可达10,000个／mL以上，但这种轮虫培育的成本过高，且浓缩小球藻不易获得，不利于推广。

在实际生产中，要进行大规模高密度的轮虫培育，必然要有高浓度的饵料作为基础。多种饵料混合培育比单一饵料培育出的轮虫质量要好。利用轮虫食性广，滤食性的特点，本实验方法选取食用酵母与芽孢杆菌作为轮虫饵料进行高密度培养。

褶皱臂尾轮虫的成虫

1 材料与方法

1.1 材料

4个1 m3的长方形钢化桶； 2台医用制氧机；食用面包酵母和芽孢杆菌（芽孢杆菌≥25亿个细胞／g）；2台定量泵；4个100 L塑料桶；收集网和显微镜，计数及水质分析用的工具。

1.2 方法

1.2.1 接种前的准备

培养容器（塑料桶）和所有工具用1 mg／L有效氯浓度消毒，用淡水冲洗干净备用。

1.2.2 培养海水的处理

4个1 m3的长方形桶加入900L用1 mg／L消毒并曝气好的过滤海水。

1.2.3 饵料的准备

预先用1 mg／L的二氯异氰脲酸钠消毒并曝气好的过滤海水，计算好用量，在1个100 L塑料桶里加一个空气充气的气石,激活好芽孢杆菌。因面包酵母不耐盐，所以要用淡水在1个100 L塑料桶里加一个空气充气的气石来激活。芽孢杆菌激活后用150目筛绢网过滤，不要残渣。激活后的酵母和芽孢杆菌分装在另外2个100 L塑料桶，分别加一个气石充气保持均匀，使得酵母和芽孢杆菌不会因停放时间长而沉淀，以供定量泵自动投饵用。

1.3 接种

在1 m3长方形桶中接入冲洗干净，不含有害生物的轮虫，接种密度为800个/mL。

1.4 日常管理

1.4.1 充气

医用制氧机调节出气量在4L／min，每部制氧机分接2个气石，每个桶放一个气石在中间位置，平均每个桶的充氧量在2L／min。每个桶再接入2个空气充气的气石，保持微充气，使轮虫能均匀分布，不会在某一个地方密集。

1.4.2 培养条件控制

温度25～32℃，盐度15‰～25‰，溶解氧≦2 mg/L，非离子氨≦1 mg/L，pH 7～9。

1.5 投饵料

按100万个轮虫每天1 g酵母和1 g利生素的用量投饵。在刚接种给饵时，先人工加入1 d投饵量的10%，防止刚开始就出现饵料不足的情况，然后用定量泵少量多次自动给饵。在整个培养周期内，计算好投饵时的用水量，72h内不超过100 L，确保不会溢出培养桶。

1.6 观察与检查

在培养周期内，每天2次检测轮虫的生长情况和水质因子。计算轮虫密度，做好饵料供给。

1.7 收集虫体

采用一次性培养的方法。在收集轮虫时，注意小心操作，尤其在水位较高时，注意水压过大冲击网袋，造成轮虫死亡。收集完成后，冲洗好培养桶，加入消毒好的海水，接种轮虫，进行下一周期的培养。

表1 轮虫生长曲线

2 结果与讨论

2.1 结果

运用市场上所售的面包酵母和芽孢杆菌当饵料，通过医用制氧机制氧供给，加大水体含氧量，接种密度为800个／mL，经24h，36h，48h，72h培养，分别达到965个/mL，1,178个/mL，1,206个／mL，1,650个／mL（见表1）。

利用4个1 m3的长方形桶，采用一次性培养的方法，每天能收获9亿左右的轮虫供给石斑鱼育苗使用。

2.2 讨论与小结

在利用浓缩小球藻培养轮虫时，很多研究表明会产生大量泡沫，需要在培养水体中加入有吸附力的东西去除泡沫，防止泡沫溢出带走轮虫。利用浓缩小球藻培养轮虫，大量产生泡沫这个问题很难得到有效的解决。本研究表明控制好充气量，利用面包酵母和芽孢杆菌作饵料，不会像利用浓缩小球藻培育轮虫那样产生泡沫需加吸附的东西，轮虫的排泄物和少量多余的残饵，并不会漂浮在水体中，而是沉入桶底和吸附在桶壁，整个培养水体是干净无杂质的。

激活后的酵母和芽孢杆菌，保存时间不能过长，每天分2次激活为好。

利用酵母和芽孢杆菌培育轮虫和利用浓缩小球藻培育轮虫比较，具有很多优越性。来源广，生产酵母和芽孢杆菌的企业众多，在市场上能方便买到，而生产浓缩小球藻的厂家屈指可数；保存方便，酵母和芽孢杆菌能在常温下保存，浓缩小球藻需冷藏甚至冷冻条件下才能保存；保存时间长；成本低。

用酵母和芽孢杆菌作饵料培养的轮虫 ，在不经强化的情况下，经过育苗生产实际的检测，在鱼苗生长前期过程中，并没有出现营养不足现象。在后期，随着鱼苗生长，口径增大，对轮虫的需求减少，增加投喂枝角类，完全能正常生长。

本实验在培养轮虫时，关键的管理工作是防止感染原生动物,必须做到工具的彻底消毒和用水的安全，可以将危害降到最低。如果发现感染原生动物，有效而简单的方法就是在收集好轮虫后，在300目的网袋里用消毒处理好的海水反复小心冲洗，能将原生动物去除干净。（参考文献略）