干眼治疗中角膜树突细胞的观察研究

干眼治疗中角膜树突细胞的观察研究

徐良丁亚莉

目的观察干眼治疗中角膜树突细胞密度的变化。方法收集2015年5月至2016年5月我院诊治的45例干眼患者的共聚焦显微镜检查及复查结果，分析其治疗前后角膜树突细胞的密度变化。结果轻度患者16例，占35.6%，中度患者23例，占51.1%，重度患者6例，占13.3%。入组患者经上述治疗，症状及体征均有所改善。对每级患者治疗前后的细胞密度均采用配对样本t检验，治疗后角膜树突细胞密度明显少于治疗前，P<0.05,差异有统计学意义。结论我们利用共聚焦显微镜技术，通过在干眼治疗及随访期间对树突细胞密度进行监测，可以对抗炎时机的选择及抗炎治疗的效果做到精确的评估，也为干眼的抗炎治疗提供了客观依据。

角膜树突细胞；干眼；共聚焦显微镜

干眼在世界范围内都是一种极为常见的眼表疾病，尤其近年来随着社会信息化的发展,特别是在与视频终端经常接触的人群中,其患病率增高尤其明显。炎症反应在干眼的发病过程中扮演着重要角色，抗炎治疗也是干眼治疗的关键环节。随着活体共聚焦显微镜的出现，将我们对于干眼的观察从宏观引向了微观，可以更加精确的观察到干眼患者眼表组织的细微病理变化，特别是炎症细胞质和量的变化，使我们更加准确客观的治疗干眼成为可能。现总结我院于2015年5月至2016年5月收治的45例干眼患者的共焦显微镜检查及复查结果，分析其治疗前后角膜树突细胞的密度变化，报告如下。

资料与方法

一、一般资料

我们选取2015年5月至2016年5月收治的45例双眼新发干眼患者(排除干燥综合征、类风湿性关节炎等全身免疫疾病)，治疗前后均行共聚焦显微镜检查。干眼的诊断及分级采用2013年干眼临床诊疗专家共识[1]：(1)有干燥感、异物感、疲劳感、烧灼感、不适感、视力波动等主观症状之一和BUT≤5 s或Schirmer I试验≤5 mm/5 min可诊断干眼；(2)有上述主观症状之一和5 s

二、检查方法

采用德国海德堡激光共聚焦显微镜HRT-Ⅱ型(角膜模式)对患者进行检查。放大倍数为800倍，扫描深度为1500 μm，检查时,于患者结膜囊内滴1滴盐酸奥布卡因滴眼液(10 g/L)，表麻后选取矢状轴扫描，对扫描后的角膜图片，采用Image J软件进行处理，测定树突细胞密度。

三、分析方法

本组45例患者(90只眼)治疗前均行共聚焦显微镜检查，根据干眼严重程度分级，轻度患者给予人工泪液点眼(0.3%玻璃酸钠滴眼液，每天4～6次)，并嘱患者改变不良生活方式。中、重患者加用低浓度糖皮质激素点眼(0.02%氟米龙滴眼液，初始频率为每天3次，好转后逐渐减量)。在治疗2周后复查共聚焦显微镜，观察角膜树突细胞，采用Image J图像处理软件对角膜树突细胞密度进行量化处理(随机选取5幅图像，统计每幅图像的树突细胞数量，取平均值，每幅图像面积为0.16 mm2)。采用配对样本t检验，分析其治疗前后密度变化有无统计学意义。

结 果

根据干眼程度分级，轻度患者(图1)16例，占35.6%，中度患者23例，占51.1%，重度患者(图2)6例，占13.3%。入组患者经上述治疗，症状及体征均有所改善。对每级患者治疗前后的细胞密度均采用配对样本t检验，治疗后角膜树突细胞密度(图3)明显少于治疗前，P<0.05,差异有统计学意义。见表1。

图1 轻度干眼患者角膜内皮树突细胞数较少，且大部分处于未激活状态，呈短棒状、椭圆形图2 重度干眼患者角膜内皮树突细胞数大量增加，且处于激活状态，呈伪足样突起的粗大细胞图3 经规范治疗后，树突细胞密度明显减少

表1 治疗前后干眼患者角膜树突细胞密度值

注：各组治疗前后比较，均P<0.05

讨 论

2013年干眼诊疗临床专家共识[2]中在中重度干眼的治疗方案里特别提出了抗炎治疗，足以说明炎症反应在干眼的发病及发展过程中所扮演的角色相当重要，而干眼的炎症改变反映在细胞水平主要变现为角膜树突细胞的活化和数量的增多[2]，这也是我们可以利用共聚焦显微镜能够定量分析的客观指标之一。角膜树突细胞是上皮来源的朗格汉斯细胞，它们的任务是诱导免疫细胞的聚集并激活T淋巴细胞来控制角膜的炎症反应。正常成人的角膜树突细胞一般位于角膜神经纤维附近,角膜中央区树突细胞的密度明显少于角膜周边区[3]。国外有研究报道[4]健康角膜中央区的树突细胞密度为(34.9±5.7)/mm2，而干燥综合征患者的角膜中央树突细胞密度为(127.9±23.7)/mm2，非干燥综合征相关性干眼患者角膜中央树突细胞密度为(89.8±10.8)/mm2，明显高于健康人。因此，有国外学者认为5]干眼的本质就是眼表局部的慢性炎症，而导致这种炎症改变的原因则是眼表的促炎反应和保护性免疫调节机制的失衡。

综上所述，抗炎治疗是干眼治疗中非常关键的环节，随着对干眼抗炎治疗研究的不断深入，如何能够更加合理、客观、精确的选择抗炎药物及抗炎时机，成为未来干眼治疗的发展趋势。我们利用共聚焦显微镜技术，通过在干眼治疗及随访期间对树突细胞密度进行监测，可以对抗炎时机的选择及抗炎治疗的效果做到精确的评估，也为干眼的抗炎治疗提供了客观依据。

[1] 中华医学会眼科学分会角膜病学组.干眼临床诊疗专家共识(2013).中华眼科杂志,2013,49:73-75.

[2] Hattori T,Chauhan SK,Lee H ,et al .Characterization of Langerin-expressing dendritic cell subsets in the normalcornea.Invest Ophthalmol Vis Sci,2011,52:4598-4604.

[3] Cruzat A，Witkin D，Baniasadi N，et al．Inflammation and the nervous system：the connection in the cornea in patients with infectious keratitis .Invest Ophthalmol Vis Sci，2011，52：5136-5143.

[4] Lin H，Li W，Dong N，et al．Changes in corneal epithelial layer inflammatory cells in aqueous tear-defcient dry eye．Invest Ophthalmol Vis Sci，2010，51：122-128.

[5] Stern ME， Schaumburg CS，Pflugfelder SC．Dry eye as a mucosal autoimmune disease．Int Rev Immunol，2013，32：19-41.

Researchonthecornealdendriticcellsinthetreatmentofdryeye

XuLiang,DingYali.

NanyangEyeHospital,Nanyang,Henan473000,China

ObjectiveObserve the density of corneal dendritic cells in the treatment of dry eye.MethodsTo collect the results of 56 cases of dry eye patients in our hospital from May 2015 to May 2016, and to review the changes of density of corneal dendritic cells before and after treatment.Results16 patients (35.6%) were mild dry eye, 23 patients (51.1%) moderate and 6 patients (13.3%)were severe. After the treatment, symptoms and signs improved in all patients. Cell density before and after each stage were compared using a paired t-test.After treatment, corneal dendritic cell density was significantly lower (P<0.05).ConclusionsWe used in vivo confocal microscopy during the treatment and follow-up to monitorthe density of dendritic cells.Confocal microscopy can give an accurate and objective assessment on the timing and effects of anti-inflammatory treatment.

Dendritic cell; Dry eye; Invivo confocal microscopy

[JClinOphthalmol,2017,25:426]

10.3969/j.issn.1006-8422.2017.05.013

473000 河南省南阳市眼科医院

徐良(Email:xuliangking@126.com)

[临床眼科杂志，2017，25：426]

(收稿：2017-03-18)