p27蛋白及cyclin B1在慢性胃病及胃癌患者胃粘膜中的表达及其临床意义

刘 润 高海燕 杨春燕

p27蛋白及cyclin B1在慢性胃病及胃癌患者胃粘膜中的表达及其临床意义

刘 润 高海燕 杨春燕

目的研究p27蛋白及cyclin B1在慢性胃病及胃癌患者胃粘膜组织中的表达水平，探讨p27蛋白及cyclin B1的表达与胃癌演变的关系。方法采用免疫组织化学SP法,检测慢性非萎缩性胃炎、慢性萎缩性胃炎、肠上皮化生、非典型增生及胃癌患者胃粘膜组织中p27与cyclin B1的表达水平，并进行临床分析。结果在慢性非萎缩性胃炎、慢性萎缩性胃炎、肠上皮化生、非典型增生、胃癌的演变过程中，p27蛋白表达水平呈现逐级降低的变化规律，cyclin B1表达水平呈现逐级升高的变化规律，两者的变化呈负相关。结论p27蛋白及cyclin B1在胃粘膜中的表达水平与慢性胃病、胃癌前病变、胃癌的发生发展有关，其在胃癌的演变过程中起着重要的作用。

cyclinB1；p27；慢性胃病；早期胃癌

细胞周期是1个经过严格调控、高度有序的过程，细胞的有丝分裂对肿瘤细胞扩增起着十分重要的调节作用。而有丝分裂的偏差往往会导致基因组的不稳定，进而导致肿瘤的发生[1]。p27蛋白是广谱的细胞周期蛋白依赖激酶抑制剂，它在体内能够负性调节细胞周期进程，其表达下降或缺失会使那些DNA受到损伤或DNA复制发生错误的细胞不断进入细胞周期，造成组织恶性增生，肿瘤形成。细胞周期蛋白cyclin B1具有调控人类细胞周期G2/M期检测点的功能，其异常表达是导致细胞周期破坏的主要原因之一[2]。

1 材料与方法

1.1 一般资料

收集我院2010年1月至2013年6月消化科门诊胃镜检查患者粘膜活检标本共计155例，其中慢性非萎缩性胃炎32例、慢性萎缩性胃炎25例、肠上皮化生30例、非典型增生32例、胃癌36例，所有患者检查前均未经过任何治疗，均无肿瘤家族史。

1.2 方法与试剂

采用HE染色明确患者分组，免疫组织化学SP法检测p27蛋白及cyclin B1在胃粘膜中的表达水平，p27多克隆抗体、cyclin B1多克隆抗体、S-P试剂盒及DAB显色剂均为北京中杉金桥生物技术有限公司产品。福州迈新生物有限公司产品。

1.3 结果判定

p27蛋白以细胞核出现黄色或棕黄色颗粒为阳性标准，cyclin B1以细胞核和细胞质出现棕黄色颗粒为阳性细胞,在每张切片随机检测5个视野(倍数×400)，计数200个细胞，计算阳性细胞所占的百分率，作为该项指标的阳性表达率。

1.4 统计学处理

2 结果

2.1 p27蛋白在慢性胃病、胃癌前病变及胃癌胃粘膜组织中的表达

p27蛋白阳性染色呈黄色或棕黄色颗粒，定位于细胞核，极个别病例中在细胞核周围紧邻细胞核胞质处也可见阳性着色；在胃癌组织浅表部位着色相对较强，而深部着色较弱。随着慢性非萎缩性胃炎、慢性萎缩性胃炎、肠上皮化生、非典型增生、胃癌的演变，p27蛋白表达水平呈现逐级降低，两两组间比较差异有显著性，见表1。

2.2 cyclin B1在慢性胃病、胃癌前病变及胃癌胃粘膜组织中的表达

cyclin B1阳性染色呈棕黄色颗粒，定位于细胞核和(或)细胞质；在胃癌组织的边缘区多余中央区，深层多于浅层。随着慢性非萎缩性胃炎、慢性萎缩性胃炎、肠上皮化生、非典型增生、胃癌的演变，cyclin B1表达水平呈现逐级升高，两两组间比较差异有显著性，见表1。

表1 慢性胃病及胃癌患者胃粘膜组织中p27及cyclinB1的表达情况

2.3 p27及cyclin B1蛋白在慢性胃病、胃癌前病变及胃癌胃粘膜组织中的表达相关性

慢性非萎缩性胃炎、慢性萎缩性胃炎、肠上皮化生、非典型增生、胃癌患者胃粘膜中，p27蛋白与cyclin B1蛋白表达水平无显著相关性(P>0.05)，各组织间胃粘膜中p27蛋白表达与cyclin B1蛋白表达呈负相关性(P≤0.05)。

2.4 p27与cyclin B1蛋白表达与其他临床参数的关系

p27与cyclin B1蛋白表达水平均与患者年龄、性别、肿瘤部位及大小无关。

3 讨论

在肿瘤的发生、发展过程中，无论何种途径最终都会反应到细胞周期调控机制上来，细胞周期调控紊乱导致恶性肿瘤最终的发生。p27是细胞周期依赖激酶抑制剂家族中的一员，它在C-末端有一核定位信号，并在近氨基末端有一保守区，科作用于各种细胞周期蛋白，发挥其抑制活性，使细胞周期停滞，阻断细胞增殖，诱导细胞凋亡[3]。

Cyclin B1是细胞周期内蛋白的一种，具有调控人类细胞周期G2/M期检测点的功能，是驱动细胞周期时相转换关键的调控因素[4]，表达异常将导致细胞周期相应监测点功能的破坏，使肿瘤细胞周期阻滞或促凋亡功能丧失，是造成细胞失控生长、细胞恶性转化的关键原因[5]。

本研究中我们应用免疫组织化学法观察了p27和cyclin B1在胃粘膜癌变多阶段中的表达及相关性，探讨两者的变化与胃癌及慢性胃病临床病理特征的关系，发现在慢性非萎缩性胃炎、慢性萎缩性胃炎、肠上皮化生、不典型增生和胃癌中p27蛋白的表达水平逐渐降低；cyclin B的表达水平逐渐升高，这与其他学者发现其在食管癌、乳腺癌等恶性肿瘤中的表达结果相一致[6-7]。

研究发现，27蛋白在慢性胃病中呈高表达状态，cyclin B1呈低表达状态，随着慢性非萎缩性胃炎、慢性萎缩性胃炎、肠上皮化生、非典型增生、胃癌的疾病进展，p27是细胞周期负性调节蛋白，可通过竞争性地与cyclins或cyclin-CDK复合物结合，导致cyclins生物活性丧失，从而维持胃粘膜上皮细胞增殖与凋亡平衡，当p27蛋白的表达水平逐渐下降，导致此时其作为细胞周期依赖激酶抑制剂的活性减低，从而导致cyclin B1表达水平逐渐升高，两者存在负相关性，这与本研究结果相符合，当cyclinB1活性增加，就会出现G2/M检测点功能失灵，使胃粘膜上皮细胞出现G2/M时相转换，大量上皮细胞进入细胞周期下一阶段，出现无序失控生长，细胞出现恶性转化，最终导致胃癌的发生。

总之，p27蛋白及cyclin B1的异常表达与胃癌的发生发展有关，在胃粘膜癌变的过程中两者的表达均呈逐及变化的规律，表明了胃癌是一类渐进性细胞周期调控机制破坏的疾病，进一步研究两者对细胞周期的破坏机制，有望为预防胃癌的发生提供新的干预方式，为早期发现胃癌提供新的临床思路。

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[4] von Bergwelt-Baildon MS,Kondo E,Klein-González N,et al.The cyclins:a family of widely expressed tumor antigens?〔J〕.Expert Rev Vaccines,2011,10(3):389-395.

[5] Pommier Y,Kohn KW.Cell cycle and checkpoints in oncology;new therapeutic targets〔J〕.Med Sci(Paris)，2003,19(2):173-186.

[6] 刘馨莲,李淑蓉,孙 静,等.细胞周期蛋白在食管癌中的表达及意义〔J〕.中国实验诊断学，2012,16(7):1249-1252.

[7] 赵全良,高宇飞,李 芳,等.乳腺癌中Cyclin B1表达及临床病理意义〔J〕.内蒙古民族大学学报，2006,21(2):197-200.

ExpressionandClinicalSignificanceofp27ProteinandCyclinB1inGastricMucosainPatientswithChronicGastritisandGastricCancer

LIURun,GAOHaiyan,YANGChunyan.

TheFirstHospitalofShijiazhuang,Shijiazhuang,050010

ObjectiveTo study the expression of p27 proteins and cyclin B1 in gastric mucosa in patients with chronic gastritis and gastric carcinoma,and their correlations with pathogenesis of gastric carcinoma.MethodsImmunohistochemical SP method was used to investigate the expression levels of p27 and cyclin B1 in chronic non-atrophic gastritis,chronic atrophic gastritis,intestinal metaplasia,atypical hyperplasia and gastric carcinoma.ResultsFrom chronic non-atrophic gastritis to chronic atrophic gastritis,intestinal metaplasia,atypical hyperplasia and the final gastric carcinoma,the expression levels of p27 proteins decreased while cyclin B1 increased,showed a negative correlation.ConclusionThe expression levels of p27 proteins and cyclin B1 are related to chronic gastritis,gastric lesion and gastric carcinoma,both take significant roles in the development of gastric carcinoma.

CyclinB1;p27;Chronic gastritis;Early gastric carcinoma

(ThePracticalJournalofCancer,2017,32:1931～1933)

050010 石家庄市第一医院

10.3969/j.issn.1001-5930.2017.12.005

R735.2

A

1001-5930(2017)12-1931-03

2017-05-17

2017-10-20)

(编辑：吴小红)