用血清药理学方法研究中药苦参的抗肿瘤作用

张宏梅，崔佰吉

（吉林医药学院，吉林 吉林 132013）

1 资料与方法

1.1 一般资料

实验动物为20只SD大鼠（成都达硕实验动物有限公司提供），体重220～250 g，雌雄各10只。实验药剂：噻唑蓝、台盼蓝以及蛋白酶K，均由北京索莱宝科技有限公司提供。小牛血清（赛默飞世尔科技有限公司）。细胞株：SPC-A1人肺癌细胞，中国医学科学院肿瘤研究所提供。检测仪器：EUROStar II荧光显微镜（欧蒙医学实验诊断有限公司）、流式细胞仪（贝克曼库尔特商贸有限公司）、PCR扩增仪和酶标仪（赛默飞世尔科技有限公司）以及高效液相色谱（HPLC）等。水煎中药苦参，煎剂浓度为3 mg/ml。

1.2 方法

选取10只SD大鼠（雄、雌各5只）作为给药组，灌服中药苦参煎剂（150 ml/kg）。2次/d。另外选取10只SD大鼠（雄、雌各5只）作为对照组，灌服生理盐水（150 ml/kg），2次/d。连续给药3天后，行腹主动脉采血，分离血清，获得含药血清和空白血清。其中含药血清需要接受有效成分和含量的鉴定，离心、取上清液，并进行等体积氯仿萃取，定容后进行高效液相色谱分析。在含药血清，中苦参碱和氧化苦参碱的浓度相对较高

将SPC-A1人肺癌细胞（5×104/mL）的加入96孔板（每孔含培养液100 μL），在培养箱（37℃，5%CO2）中进行孵育。24 h后分为两组，分别加入不同浓度的含药血清和空包血清。在此基础上，每孔加入生理盐水，用以调整每孔细胞总体积。24 h后加入浓度为2 mg/mL的噻唑蓝20 μL后，孵育4 h后去除上清液，使用酶标仪进行处理，测定吸光值，每个浓度平行测定3孔，计算平均吸光值，进而得到中药苦参对于SPC-A1人肺癌细胞的抑制率。

2 结 果

2.1 含药血清对于肿瘤细胞的生长抑制作用

给药组，测得活细胞数为（491.44±28.62）×103/mL，生长抑制率为（42.41±11.25）%。对照组，测得活细胞数为（992.18±114.26）×103/mL，对比差异显著（P＜0.05）。

2.2 不同浓度含药血清对于肿瘤细胞的生长抑制作用

对比2.5%、5%、10%、15%以及20%浓度的含药血清对于肿瘤细胞的生长抑制作用，见表1。

表1 不同浓度含药血清对于肿瘤细胞的生长抑制作用分析（±s）

表1 不同浓度含药血清对于肿瘤细胞的生长抑制作用分析（±s）

3含药血清浓度（%） 活细胞数（×10/ml） 生长抑制率（%）2.5 904.24±76.52 10.14±2.52 5 681.62±62.18 16.87±3.04 10 517.72±44.82 39.95±5.85 15 449.23±35.51 53.39±4.74 20 419.62±25.56 62.29±5.43 P＜0.05

2.3 含药血清和空白血清的肿瘤细胞周期分布分析（见表2）

表2 含药血清和空白血清的肿瘤细胞周期分布分析结果对照（±s）

表2 含药血清和空白血清的肿瘤细胞周期分布分析结果对照（±s）

组别 G0G1 S G2M给药组 62.28±6.15 28.44±1.96 1.85±0.34对照组 46.24±3.55 39.64±2.97 15.69±1.42 P＜0.05

3 讨 论

目前，中药苦参提取物及其复方制剂在临床疾病的治疗中有着较为广泛的应用，且获得了良好的疗效，其应用领域也在不断拓展，并在抗肿瘤治疗的研究中取得一定的进展。中药苦参的抗肿瘤作用并不十分明确，可能存在着一定的风险性，则需要通过含药血清试验研究来予以验证和判断。

综上所述，中药苦参有效成分在抗肿瘤治疗方面具有很高的应用价值，需要进一步开发和利用，这对于抗肿瘤治疗的发展有着十分重要的意义。

[1]夏艳阳,李 艳.中药苦参抗肿瘤作用研究进展[J].中医药临床杂志,2014,26(01):91-92.

[2]邵明坤,范 青.苦参碱抗肿瘤作用研究的新进展[J].实用药物与临床,2014,17(06):756-759.