动物检疫中荧光定量PCR技术应用

李琳琳

（山东省潍坊市昌乐县畜牧兽医局 242600）

荧光定量PCR技术可以通过在PCR整体反应体系增加荧光基团，应用荧光独有的信号积累实施监测整个PCR的进程情况，最后可以通过标准化的曲线进行对相关未知的板块进行定量分析。不仅可以实现PCR从定量监测到定性的飞跃，还可以根据常规的PCR相对比，具备比较有差异性的灵活性更加强、无任何污染、自动性灵敏度较高、反应多重性等优点。目前现阶段已经广泛应用基因表达研究等很多核心领域。

1 动物检疫中荧光定量PCR技术的应用

我国实时荧光定量PCR技术是根据上世纪90年代所面世的，短短的经历了几年的时间，已经被逐渐的广泛应用在各大生物学的领域当中。Taq Man、Lightcycler、Amplisensor和分子信标荧光探针也是目前我国用于荧光定量PCR检测的重要来源[1]。

1.1 应用炭疽杆菌的检测

炭疽杆菌的检测是一种面对重要性的人畜共患病的原理，具备很高的致病性效果，并且还是重要的生物领域战剂基础之一，因此，打造一种简单性快速的炭疽杆菌的检测方法是非常有必要的操作。我国的相关科学调查表明，炭疽杆菌的检测编码存在热毒素的PXO1质梨上的基因以及编码荚膜的PXO2质粒为基础的靶，打造了一种简单化并且便捷的定量检测形式。该检测方法的灵敏度需要达到103拷贝体系，还能够区分出炭疽杆菌的检测与其他炭疽杆菌的检测情况[2]，方便快捷并且准确的对炭疽杆菌进行定量监测分析。

1.2 大肠杆菌的定量检测情况

大肠杆菌通常都是人类腹泻或者是出血性肠炎及溶血性尿毒症所导致的重要发病原因，也是我国现阶段比较流行性的疾病。通过相关的科学调查研究表明，我国流行病学对其他的感染技能比较低，因此，对低剂量的大肠杆菌的检测就比较极为重要。由于以往我国传统的医学分离培养检测技术存在着检测灵敏度比较低的情况，并且大肠杆菌的血清学鉴定情况也不太稳定，可能会出现一些遗漏的情况[3]。根据大肠杆菌O157∶H7 rfb E基因作为合适的待检测靶基因，根据复合性的荧光定量原理进行分析检测，建立一个检测大肠杆菌 O157∶H7 rfb E基因的重要方法。该情况检测的灵敏度可以比以往传统的检测灵敏度高达一倍之多，定量检测的漏洞也会随之减少一大半。能够快速并且方便准确的对大肠杆菌O157∶H7 rfb E进行定量分析，也算是为大肠杆菌定量检测情况提供了良好的新型解决办法。

1.3 单独的李斯特菌检测情况

单独的李斯特菌被WHO誉为4种主要的食物源性疾病致病菌基础之一，目前现阶段该菌已经被国家质检总局列为进出口食品必须检查的菌或者是监控病原菌。此外，其他方法的检测情况消耗的时间都比较长，检定员也需要的多并且步骤也是相当的复杂，不利于对该菌进行快速诊断。通过该菌的重要毒素基因的ly A基因作为靶序列设计一对引物，打造了快速检测单独李斯特菌的检测方法，在单独李斯特菌的检测当中具备很重要的位置价值。与此同时，由于疯牛病或者是绵羊痒病也已经被国家证实同人的克雅氏病存在着直接性的关联，FQ-PCR技术还可以采用动物源饲料或者是食品日常用品成分的定量实时检测功能。

2 总结

根据目前的FQ-PCR在动物检疫中的使用主要是根据病原体检测的情况下。今后随着我国的FQ-PCR技术在不断的完善创新，可以将FQ-PCR与生物当中所产生的芯片等在应用其他的信息技术进行相结合应用，日后将会大大的提升该技术自身在动物检疫相关领域的应用以及推广。