奶牛魏氏梭菌病的诊断和防治

曹民川 王进峰 周丽梅 唐振兴（陕西省铜川市动物疫病预防控制中心 727000）

奶牛魏氏梭菌病是一种急性传染病，是由于感染魏氏梭菌而引起。该病发病率较低，但死亡率较高，往往呈急性发病。发病年龄上，成年奶牛多发，而犊牛基本不会发生。病牛临床主要特征是突然发病、死亡以及实质器官和消化道出血。笔者通过一些临床病例和治疗经验，总结出奶牛魏氏梭菌病的诊断方法和防治措施，供广大养殖户参考借鉴。

奶牛魏氏梭菌病又称为猝死症，是一种急性传染病，发病率较低，但死亡率高。引起该病的原因较多，但一般认为是由牛A型魏氏梭菌（又称产气荚膜杆菌）引起。临床上以病牛突然死亡以及消化道和实质器官出血为特征。大小奶牛都可能发病，但以犊牛、孕牛和高产牛多发病，死亡率70%～100%。一年四季均可发病，但以春秋两季为主。2012年4月9日，铜川市耀州区五台畜牧养殖公司奶牛场2010年从澳大利亚引进的200头奶牛有24头奶牛突然发病并死亡11头，经省、市、区动物疫病预防控制中心专家现场调查、临床剖检及实验室检测，确诊为奶牛魏氏梭菌病(猝死症)。

1 发病机理

魏氏梭菌是该病的病原，病原菌在土壤中普遍存在，也可在污水中存在。在正常情况下，机体内的细菌处于缓慢增殖的状态，且产生的毒素较少。由于机体肠道不断地进行蠕动，能够将肠内容物及时排出到体外，从而避免该病菌及其所产生的毒素大量在肠道内积聚。但是当外界环境噪音较大或者突然更换饲料，尤其是从饲喂干草更换为饲喂大量的谷类饲料或者富有蛋白质的饲料以及青绿多汁饲料时，瘤胃里含有的正常能够分解纤维素的菌群一时无法适应，导致机体抵抗力降低，减少运动，肠道过于松懈，缓慢蠕动，造成饲料发酵产生大量的酸，从而引起正常的酸碱度失衡。此时，大量的没有经过消化的淀粉颗粒饲料通过真胃进入小肠，造成病菌快速繁殖，同时产生大量的毒素，增强肠道的通透性，从而导致大量的毒素进入到血液，造成全身毒血症，导致发病，严重时甚至引起休克而发生死亡。

2 临床症状

2.1 最急性型 无任何前驱症状，几分钟或1～2h突然死亡。有的奶牛头天晚上正常，第2天死在牛舍内。病牛死后腹部膨大，舌头脱出口外，口腔流出带有红色泡沫的液体，肛门外翻。共11头。

2.2 急性型 体温增高或正常，呼吸迫促，结膜发绀，口鼻流出白色或红色泡沫，全身肌肉震颤，行走不稳，狂叫倒地，四肢划动，最后死亡。共3头。

2.3 亚急性型 呈阵发性不安。发作时两耳竖立，两眼圆睁，表现出高度精神紧张，以后转为安静，如此周期性反复发作，最终死亡。共2头。

急性型和亚急性型除上述症状外，有的发生腹泻，排出多量黑红色、含黏液的恶臭粪便，有时排粪呈喷射状，病畜频频努责，里急后重。

3 病理剖检

病死奶牛剖检后，心脏扩张，心房及心室外膜有出血点；胸腹腔和心包积液；呼吸道呈现出血性病变，肝脏肿大，呈紫黑色，表面有出血斑；肺气肿、水肿、有出血症状；邹胃黏膜出血，邹胃内容物为酸臭的黄色液体；胆囊肿大；脾肿大，有出血点；小肠黏膜充血、出血，肠壁外观呈暗红色；下颌淋巴结、肠系膜淋巴结肿大、充血。

4 实验室诊断

4.1 涂片染色镜检（1）样品：病死牛组织触片；（2）试验试剂和仪器：美兰染色剂、蒸馏水、显微镜、染色缸、酒精灯。（3）试验步骤：按美兰染色剂说明书进行。1600倍光学显微镜下(油镜)镜检。（4）注意事项：血液中存在魏氏梭菌较少，涂片时推片很重要，用平载玻片，用火柴棒点少量血液至载玻片上。形态观察，在无菌条件下取病牛肠内容物、黏膜刮取物以及肝脏、脾脏组织进行涂片，经过革兰氏染色使用显微镜检查，结果看到一种革兰氏阳性粗大杆菌，存在夹馍，呈单个或者呈双排列，部分形成芽孢，位于菌体的一端。

魏氏梭菌油镜图片（1）

魏氏梭菌油镜图片（2）

4.2 分离培养 在无菌条件下取病牛肠内容物，置于80℃温水中进行15min水浴，接着以2000r/min的速度进行15min离心，取上清液分别接种到厌氧肉肝汤和麦康凯琼脂平皿，置于37℃温箱中进行20-24h培养，接着在绵羊鲜血琼脂平板和普通琼脂平板上进行划线接种，放在37℃温箱内进行分离培养。同时，取各器官在肉肝汤内接种，在厌氧条件下进行培养，再取培养物在绵羊鲜血琼脂平皿上接种进行培养，然后挑取单个菌落用于纯培养，并进行染色镜检。结果发现，麦康凯琼脂平皿上没有长出细菌，而厌氧肉肝汤经过18h会变成均匀的混悬液，并在液面上方接近液体测试管壁上附着有长度为2cm的石蜡。琼脂平板上长出较大的灰白色圆盘形菌落，表面湿润、光滑，部分存在放射状条纹，血琼脂平板上出现溶血环。细菌纯培养后观察形态，可发现呈革兰氏阳性粗大杆菌，少数形成芽孢。

4.3 魏氏梭菌牛乳发酵试验（1）样品：解剖病死牛取肠道组织。（2）试验试剂和仪器：恒温培养箱、无菌试管、蜡块(普通蜡烛即可)、全脂牛奶(鲜奶、全脂奶粉均可)、酒精灯。（3）试验步骤：①取1/3试管鲜乳，将蜡块放入试管，高压灭菌（也可用酒精灯加热融化），蜡块漂浮于乳汁上方，形成厌氧环境。②当试管温度降至40℃度左右，将组织块放入试管鲜乳中，试管口用棉塞塞住。③将处理好的试管置试管架上放入37℃恒温箱中培养8～10h(有些可5～6h便可看到暴烈现象)。（4）试验结果判定：含魏氏梭菌的组织在牛乳培养基中呈“暴烈发酵”，即接种培养8～10h后牛乳被酸凝，同时产生大量的气体，使凝块变多孔的海绵状，严重时被冲成数段甚至喷出试管外。

5 诊断结论

实验室通过涂片直接和分离培养染色镜检，都观察到了典型的魏氏梭菌杆菌；魏氏梭菌牛乳发酵实验，产生了强烈的“暴烈发酵”。结合临床症状和病理变化，笔者诊断发生在本市耀州区五台畜牧养殖公司奶牛场的16头奶牛死亡（11头猝死）为魏氏梭菌病。导致发病的主要原因，一是环境卫生差，管理粗放，生物安全意识淡薄；二是频繁更换青贮饲料，加之气候突变，增大了奶牛应激反应；三是奶牛疫病综合防控设施不全。

6 治疗

确定病因后，笔者对8头病牛实施了隔离治疗，主要是镇静、抗菌消炎和强心。同时，配合中药方“黄芩黄芪解毒汤”加减，加水煎煮后给病牛灌服，2次/d，连续3～5d。个别病牛心脏衰弱，则皮下注射25%的安钠咖；对严重脱水病牛，则静脉滴注由5%葡萄糖盐水，并配合使用氨地塞咪松、维生素B6、维生素C、苄青霉素，连续使用3d；对出现兴奋症状的病牛，则给其灌服水合氯醛溶液，必要时间隔4h重复1次。为避免继发感染，对病牛混合注射链霉素、氨苄青霉素、磺胺药，2次/d，连续使用3d。对病死牛进行无害化处理，且垫草、粪便等污物集中堆积进行发酵；用0.3%过氧乙酸对牛栏和器具进行消毒，用5%来苏尔浸泡、刷洗料槽、水槽等，同时对牛舍及周围环境进行彻底清扫，并用2%石灰水消毒。牛群稳定后，对所有牛实施了魏氏梭菌疫苗免疫。

7 预防措施

7.1 加强饲养管理 首先要根据奶牛生长、发育、生产、繁殖等不同阶段的饲养标准提供优质科学的全价配合饲料，严禁饲喂发霉、腐败、劣质饲料。同时要特别注意精粗饲料搭配，保证提供适量的青干草。可用pH试纸检验牛尿液，当牛尿液pH＜8.0时，就要考虑是否精料过多，粗料不够。如果没有其他原因，可在精料中加入1.5%～2.0%的小苏打粉进行应急调整，同时加喂青干草，直至将尿液pH调整并稳定在8.0～8.2之间。

7.2 注意卫生消毒 魏氏梭菌广泛存在于自然界，一般消毒药均可杀死本菌繁殖体，但芽孢抵抗力较强，95℃需两个0.5h才能杀死。为了有效杀灭魏氏梭菌，奶牛饲养场户要坚持各项卫生防疫制度，保持牛场清洁干燥，及时清扫粪便，定期进行彻底消毒，场地、用具、设施要经常用火碱、石灰水、漂白粉等消毒处理，病死牛及其分泌物、排泄物一律烧毁或深埋，做无害化处理。

7.3 进行疫苗接种 发生过本病或饲养环境不太好的奶牛饲养场户，可考虑进行魏氏梭菌疫苗免疫。免疫时间、剂量及方法要参照选用的魏氏梭菌疫苗说明书。