“哨兵动物抗体监测法”技术在我国动物疫病净化中应用的可行性探讨

田志军

（中国农业科学院哈尔滨兽医研究所，黑龙江 哈尔滨 150069）

重要动物疫病净化对提高我国养殖水平，提高我国动物产品的国际竞争力意义重大。2012年国家出台了《国家中长期动物疫病防治规划（2012～2020年）》，规划提出有计划地控制、净化和消灭严重危害畜牧业生产和人民群众健康安全的动物疫病。动物疫病的净化一般分为三个阶段：第一阶段为免疫控制阶段（该阶段以通过免疫降低临床发病率、减少经济损失为主），第二阶段为免疫净化阶段（该阶段在有效控制疫病的发生后，采取逐步淘汰阳性感染动物，建立阴性种群，达到免疫无疫状态），第三阶段为净化根除阶段（该阶段以不免疫、抗体监测为主，最终达到在一定区域内根除该疫病）。我国现阶段主要动物疫病的防控还处于第一阶段，而在免疫状态下开展疫病净化工作的主要困难是缺乏成熟的抗体鉴别诊断技术，由于缺乏抗体鉴别诊断技术，无法通过抗体检测对疫病野毒感染状况进行监测，而只能通过活体采样进行病原学检测来判断疫病野毒感染状况，而活体采样（例如猪瘟病原学检测需要采集猪的扁桃体）检测方法操作困难、费时、费力，大部分养殖者不愿意采取这种方法净化疫病，且采取这种方式的疫病净化验收工作也难以操作，进而影响了养殖场开展疫病净化工作的积极性。我国现阶段使用的动物疫苗中只有猪伪狂犬病疫苗具有相配套的成熟抗体鉴别诊断技术，而猪伪狂犬病也是目前免疫净化工作开展较好的一个疫病，是我国动物疫病净化的一个范例。

因此我国在免疫状态下开展动物疫病净化工作的最主要技术瓶颈是缺乏相应成熟的抗体鉴别诊断技术，如何在现有技术条件下突破这个技术瓶颈来推动我国动物疫病净化工作的开展，作者现将“哨兵动物抗体监测法”技术的原理及其替代鉴别诊断技术在动物疫病免疫净化中应用的可行性作一探讨，供大家参考。

1 “哨兵动物抗体监测法”技术的原理

对生长群动物和后备种群动物设定一定比例的新生动物作为“哨兵动物”，这些动物不免疫某种疫病相应的疫苗，在母源抗体消失后的1～2个时间点对“哨兵动物”进行相应疫病的抗体监测，此时的抗体阳转即代表该养殖场存在相应疫病的野毒感染，可通过此方法替代抗体鉴别诊断技术在免疫状态下达到检测野毒感染目的，我们建议选择商品动物上市前1～2周左右、后备种群动物在配种前1～2周左右作为“哨兵动物”抗体的监测时间点，最大限度发挥“哨兵动物”的监测时间范围。以猪瘟为例：对育肥猪群和后备种猪群设定一定比例（5%～10%）新生仔猪作为“哨兵猪”，这些猪不免疫猪瘟弱毒疫苗，在母源抗体消失后的1～2个时间点（根据我们的研究一般情况下仔猪出生后8～12周，猪瘟母源抗体就基本消失了）对“哨兵猪”进行猪瘟抗体监测，此时的抗体阳转即代表猪场存在猪瘟野毒感染，选择商品猪出栏前1周左右、后备种猪配种前1周左右（即出生25周以后）作为“哨兵猪”猪瘟抗体的监测时间点，最大限度发挥“哨兵猪”的监测猪场猪瘟野毒感染的时间范围。

2 “哨兵动物抗体监测法”技术的可行性

“哨兵动物抗体监测法”技术的应用范围主要包括某种疫病经过多年免疫，发病率较低（如猪瘟、鸡新城疫等疫病），免疫的疫苗不存在水平传播能力或传播能力低（灭活疫苗：口蹄疫灭活疫苗、鸡新城疫灭活疫苗、禽流感灭活疫苗；弱毒疫苗：猪瘟活疫苗、猪伪狂犬病活疫苗等）以上这些疫病适用于“哨兵动物抗体监测法”技术开展疫病净化工作。以猪瘟为例：我国目前猪瘟免疫密度高（规模化猪场免疫接近100%）、发病率低，猪瘟弱毒疫苗几乎没有水平传播能力。因此猪场即使预留5%～10%的非免疫猪，猪群的总体免疫密度仍大于80%，“哨兵猪”群暴发猪瘟概率较低，哨兵猪前期受母源抗体保护，过了监测期继续使用的种猪可免疫猪瘟疫苗，因此猪场内对猪瘟易感的“哨兵猪”数量相对有限；另外猪场制定相应的预案，“哨兵猪”群如有猪瘟发生可紧急处置。基于以上原因“哨兵动物抗体监测法”技术的应用具有可行性。

3 “哨兵动物抗体监测法”技术在净化中的应用

3.1 指导养殖场根据野毒的流行状况制定免疫程序

通过“哨兵动物抗体监测法”技术定期监测养殖场某种疫病野毒的流行状况，根据野毒流行状况将养殖场分为野毒流行场、野毒低流行场和野毒不流行场，不同状况采取不同的免疫程序，使疫苗的免疫强度与野毒的流行强度一致。由于缺乏疫病野毒流行状况的监测技术，目前我国大部分养殖场对某种疫病免疫程序的制定并不是根据疫病野毒在养殖场流行状况来制定的，许多养殖场存在过度免疫的现状，表现为疫苗免疫种类过多、免疫次数过频，浪费了许多人力和物力。“哨兵动物抗体监测法”技术可以指导养殖场根据野毒的流行状况制定针对性的免疫程序，将大大节省养殖场的疫苗使用量，达到“减针减负”目的。另外通过对野毒在养殖场流行强度的监测来评价疫苗的免疫效果，当疫病得到有效控制一段时间后，指导养殖场由免疫控制阶段向免疫净化阶段转变。

3.2 指导制定以“野毒抗体监测为主，病原学检测为辅”为主导的疫病净化验收标准，推动疫病净化工作的开展

科学、合理的制定疫病净化验收标准对推动疫病净化工作的开展十分重要，如果一个疫病净化标准以“病原学检测、高合格率免疫抗体指标为主”，那么该疫病净化方案的实施及净化验收的可操作性就比较差，进而影响养殖场开展净化工作和净化验收的积极性。而“哨兵动物抗体监测法”技术由于有效解决了养殖场监测野毒感染的难题，使疫病净化标准制定得以向“野毒抗体监测为主、制定合理的免疫抗体合格指标”为主导的指标转变，这种净化指标可操作性强、省时、省力、净化结果易于判定，养殖场易于接受，随着“哨兵动物抗体监测法”技术的完善和推广将极大促进和推动养殖场疫病净化的积极性。

以猪瘟为例，现有猪瘟免疫净化标准：（1）生产母猪、后备种猪抽检，猪瘟病毒抗体阳性率90%以上（由于猪瘟疫苗免疫抗体与强毒抗体之间存在较大差异，猪瘟弱毒疫苗（C株）诱导抗体能力弱，在没有猪瘟野毒感染情况下，猪场要获得猪瘟疫苗抗体的高合格率（≥90%）只有经过频繁、大剂量多次免疫才能获得；而在一个没有猪瘟野毒感染的猪场，通过高强度免疫来获得免疫抗体的高合格率是不可取的，我们净化猪瘟的目的是少打疫苗，做到“减针减负”目的，因此需要制定合理的猪瘟免疫抗体合格指标）；（2）种公猪、生产母猪和后备种猪抽检，猪瘟病原学检测均为阴性；（3）连续2年以上无临床病例。

而应用“哨兵动物抗体监测法”技术后猪瘟免疫净化标准可以定义为：（1）连续2年以上“哨兵猪”血清抗体监测阴性，无临床病例或疑似猪瘟病例病原学检测阴性；（2）生产母猪、后备种猪抽检，猪瘟病毒抗体阳性率（合理的指标）。该猪瘟净化验收标准将使猪瘟净化方案的可操作性增强，净化成本降低，将极大提高猪场净化猪瘟的积极性。

“哨兵动物抗体监测法”技术的创新应用是我们近几年在疫病净化实践中发现问题后经过研究、总结后提出的，并在一定范围内进行了实践，该技术尚有许多不足和待完善之处，还未经过大范围应用和检验。动物疫病净化工作已是未来我国兽医工作的重点，我们希望“哨兵动物抗体监测法”技术能够对从事动物疫病净化的兽医工作者和管理者提供一些有益的帮助，在疫病净化中不断改进和完善该技术。