慢性荨麻疹患者血清IL-17 IL-23 TGF-β水平检测分析*

何沅莉，单 葵，曹雨微，陈 伟（重庆医科大学附属第一医院皮肤科，重庆400016）

慢性荨麻疹（CU）是皮肤科常见的变态反应性疾病，因反复发作伴剧烈瘙痒，常严重影响患者正常工作和生活。其发病机制至今尚未完全阐明，可能与免疫功能异常相关。有研究表明，辅助性T细胞（Th17）与部分自身免疫疾病有关[1]。本研究拟通过检测与Th17细胞相关的细胞因子[白细胞介素-17（IL-17）、IL-23、转化生长因子 β（TGF-β）]水平，探讨 Th17细胞在 CU 中的诊断作用，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 资料

1.1.1 一般资料 选取2015年7月至2016年11月重庆医科大学附属第一医院皮肤科收治的72例CU患者作为观察组，其中男35例，女37例；年龄19～57岁，平均（39.16±10.27）岁。另选取健康体检者20例作为对照组，其中男 10例，女 10例；年龄 25～53岁，平均（38.43±9.87）岁。两组研究对象性别、年龄等一般资料比较，差异均无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。纳入标准：（1）风团反复发作6周以上，且每周至少2次或2 d症状发作。（2）排除其他物理性荨麻疹。（3）无严重系统性疾病，并在4周内未使用过糖皮质激素及其他免疫抑制剂，7 d内未使用过抗组胺药物治疗。

1.1.2 试剂与仪器 IL-17酶联免疫吸附试验（ELISA）试剂盒、IL-23 ELISA试剂盒、TGF-β ELISA试剂盒均选购自依科赛生物科技（大仓）有限公司，采用Spectra-Max plus384酶标检测。

1.2 方法 采集研究对象肘静脉约5 mL置于肝素钠抗凝管中，留取标本30 min内分离血浆，1 500 r/min离心8 min，用移液枪将血清移至EP管中，将EP管编号，置于-20℃冰箱保存备用，按照试剂盒说明书，采用双抗体夹心ELISA测定血清中IL-17、IL-23、TGF-β水平，严格按照试剂盒的操作标准进行。

1.3 统计学处理 应用SPSS20.0统计软件进行数据分析，计量资料以表示，采用t检验；计数资料以构成比表示，采用χ2检验。相关分析变量满足正态分布时采用Pearson直线相关分析。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 两组血清样本中 IL-17、IL-23、TGF-β水平比较 观察组患者血清 IL-17、IL-23、TGF-β水平均明显高于对照组，差异均有统计学意义（P＜0.01）。见表1。

表1 两组血清样本中 IL-17、IL-23、TGF-β 水平比较（±s）

表1 两组血清样本中 IL-17、IL-23、TGF-β 水平比较（±s）

注：-表示无此项

组别 IL-17（pg/mL）观察组对照组IL-23（pg/mL）23.85±19.76 9.66±2.49 5.605 0.000 n 72 20 tP--3.32±1.27 1.89±0.74 6.232 0.000 TGF-β（ng/mL）39.95±17.90 25.55±12.77 3.362 0.001

2.2 观察组患者IL-17、IL-23、TGF-β三者间相关性分析 观察组患者IL-17、IL-23、TGF-β三者间无明显相关性（P＞0.05）。见表 2。

表2 观察组患者IL-17、IL-23、TGF-β三者间相关性分析

3 讨 论

CU主要表现为反复发作的风团和（或）血管性水肿，常伴明显瘙痒，病程超过6周。CU可见于任何年龄，多发于20～40岁青年人，超过1/2的CU患者伴中度以上瘙痒，1/5患者可伴血管性水肿，严重影响患者的生活质量[2]。CU病因复杂，可能病因为急性与慢性感染，食物、药物过敏及自身免疫异常等。有研究发现，CU患者血清中不仅存在甲状腺自身抗体，同时存在抗高亲和力血清免疫球蛋白E（IgE）受体自身抗体和功能性IgE抗体[3-4]，越来越多学者认为，CU为自身免疫性疾病。而KRYCZEK等[5]发现，Th1和Th17细胞可协同作用于人类自身免疫性疾病。本研究拟通过检测与Th17细胞密切相关的IL-17、IL-23、TGF-β水平，探讨Th17细胞在CU的诊断作用。

TGF-β是单核-巨噬细胞分泌的具有多种生物活动的多肽调节因子，在机体免疫防御中有重要作用。初始CD4+T细胞接受抗原刺激后，在血清中TGF-β单独存在的条件下被诱导分化为Treg细胞，在TGF-β和IL-6共同存在的条件下被诱导分化为Th17细胞[6]。目前，国内外对TGF-β与CU的关系鲜有报道。TAVAKOL等[7]观察到TGF-β基因的遗传变异与CU的发病有关，而CU患者基因型倾向于高产TGF-β。本研究发现，CU患者血清中TGF-β水平明显高于对照组，从侧面证实了的 TAVAKOL 等[7]的研究结果。ALASANDAGUTTI等[8]、KASPERSKA-ZAJAC等[9]观察到CU患者血清中IL-6及IL-6受体水平明显升高。可推测TGF-β通过诱导初始CD4+T细胞分化为Th17细胞参与了CU的发生。

IL-23是巨噬细胞及树突状细胞分泌的细胞因子，是Th17细胞产生过程中的关键性细胞因子，对其存活及功能维持起至关重要作用，而对Treg细胞则具有抑制作用[10-12]。有研究显示，一些自身免疫性疾病的发病与IL-23的升高有关，如银屑病、皮肌炎、炎症性肠病等[13-15]。IL-23主要通过维持Th17细胞功能及诱导IL-17的产生，从而促进炎性反应的发生[16-17]。IL-17由Th17细胞分泌，可以通过NF-кB通路刺激上皮细胞、内皮细胞等产生前列腺素E2、IL-6、IL-8等细胞因子和趋化因子，直接或间接引起变态反应。同时，IL-17可以与肿瘤坏死因子α、干扰素γ等产生协同作用以放大炎性反应，诱导自身免疫性疾病和慢性过敏性疾病的发生[18]。在健康人的血清中可以检测到低水平的IL-17、IL-23，而在一些变态反应性疾病中却显著增加，如变应性鼻炎[19]、特应性皮炎[20]等，其外周血中Th17细胞IL-17水平均高于健康对照组，且与疾病的严重程度存在相关性。而ATWA等[21]也发现，CU患者血清中IL-17、IL-23水平高于对照组，且与疾病严重程度成正比，与本研究结果相符。

综上所述，Th17 细胞通过 IL-17、IL-23、TGF-β 3 种细胞因子参与了CU的发病过程，动态监测CU患者用药前后3种因子及Th17细胞的变化，也许将来可以此作为靶点为CU的治疗提供新的方向或将其用作判断CU的预后。本研究也存在一些缺陷，如未对观察组进行病情程度分级并分析其是否与3种因子存在相关性，两组人数差距大，大多数患者既往用药不详，不能彻底排除药物对IL-17、IL-23、TGF-β的影响等，有待今后扩大样本进一步深入研究。

[1]丁洁，游晶，刘怀鄂，等.IL-17、Foxp3+Treg和 IL-17+Foxp3+T细胞在自身免疫性疾病中的作用[J].现代免疫学，2016，36（6）：496-499.

[2]罗婕，宋志强，钟华，等.535例慢性荨麻疹临床流行病学特征分析[J].第三军医大学学报，2011，33（22）：2421-2424.

[3]GREAVES MW.Chronic idiopathic urticariab[J].Curr Opin Allergy Clin Immunol，2003，3（5）：363-368.

[4]MIESCHER SM，HORN MP，PACHLOPNIK JM，et al.Natural anti-Fcepsilon RIalpha autoantibodies isolated from healthy donors and chronic idiopathic urticaria patients reveal a restricted repertoire and autoreactivity on human basophils[J].Hum Antibodies，2001，10（3/4）：119-126.

[5]KRYCZEK I，BRUCE AT，GUDJONSSON JE，et al.Induction of IL-17+T cell trafficking and development by IFN-gamma：mechanism and pathological relevance in psoriasis[J].J Immunol，2008，181（7）：4733-4741.

[6]BETTELLI E，CARRIER Y，GAO W，et al.Reciprocal developmental pathways for the Generation of pathogenic effector TH17 and regulatory T cells[J].Nature，2006，441（790）：235-238.

[7]TAVAKOL M，MOVAHEDI M，AMIRZARGAR AA，et al.Association of interleukin 10 and transforming growth factor β gene polymorphisms with chronic idiopathic urticaria[J].Acta Dermatovenerol Croat，2014，22（4）：239-245.

[8]ALASANDAGUTTI ML，PONNANA M，SIVANGALA R，et al.Role of IFN-γ and IL-6 cytokines and their association in determining susceptibility to chronic idiopathic urticaria[J].GenetTestMol Biomarkers，2014，18（12）：804-809.

[9]KASPERSKA-ZAJAC A，GRZANKA A，DAMASIEWICZ-BODZEK A.IL-6 transsignaling in patients with chronic spontaneous urticaria[J].PLoS One，2015，10（12）：e0145751.

[10]ZHOU L，LOPES JE，CHONG MM，et al.TGF-beta-induced Foxp3 inhibits T（H）17 cell differentiation by antagonizing RORgammat function[J].Nature，2008，453（7192）：236-240.

[11]ICHIYAMA K，YOSHIDA H，WAKABAYASHI Y，et al.Foxp3 inhibits RORgammat-mediated IL-17A mRNA transcription through direct interaction with RORgammat[J].J Biol Chem，2008，283（25）：17003-17008.

[12]IZCUE A，HUE S，BUONOCORE S，et al.Interleukin-23 restrains regulatory T cell activity to drive T cell-dependent colitis[J].Immunity，2008，28（4）：559-570.

[13]BEYER BM，INGRAM R，RAMANATHAN L，et al.Crystal structures ofthepro-inflammatorycytokineinterleukin-23anditscomplexwithahighaffinity neutralizing antibody[J].J Mol Biol，2008，382（4）：942-955.

[14]BRENTANO F，OSPELT C，STANCZYK J，et al.Abundant expression of the interleukin（IL）23 subunit p19，but low levels of bioactive IL23 in the rheumatoid synovium：differential expression and Toll-like receptor-（TLR）dependent regulation of the IL23 subunits，p19 and p40，in rheumatoid arthritis[J].Ann Rheum Dis，2009，68（1）：143-150.

[15]SHEN H，XIA L，LU J，et al.Interleukin-17 and interleukin-23 in patients with polymyositis and dermatomyositis[J].Scand J Rheumatol，2011，40（3）：217-220.

[16]LANGRISH CL，CHEN Y，BLUMENSCHEIN WM，et al.IL-23 drives a pathogenic T cell population that induces autoimmune inflammation[J].J Exp Med，2005，201（2）：233-240.

[17]IWAKURA Y，ISHIGAME H.The IL-23/IL-17 axis in inflammation[J].J Clin Invest，2006，116（5）：1218-1222.

[18]宁静，白莉.慢性荨麻疹患者血清中IL-17和IL-33的表达及意义[J/CD].中华临床医师杂志：电子版，2016，10（4）：525-528.

[19]李良波，谭君武，彭洪，等.变应性鼻炎患者血清IL-17和IL-23的表达及临床意义[J].中国免疫学杂志，2015，31（2）：247-249.

[20]曾碧冰，陈明春，王鲁梅，等.特应性皮炎患者外周血白介素-17和白介素-23 水平的检测[J].中国热带医学，2014，14（6）：751-752.

[21]ATWAMA，EMARAAS，YOUSSEFN，etal.SerumconcentrationofIL-17，IL-23 and TNF-α among patients with chronic spontaneous urticaria：association with disease activity and autologous serum skin test[J].J Eur Acad Dermatol Venereol，2014，28（4）：469-474.