比格犬深静脉穿刺置管模型的建立及应用*

赵志兵 孙百胜 任延玲 法云智 邱业峰

(1. 军事医学科学院实验动物中心，北京 100071)(2. 军事医学科学院附属307医院急诊科，北京 100071)

比格犬(Beagle dog)又称小猎兔犬，原产于英国。由于其性情温顺、生理指标稳定、测试结果重复性好、遗传性能稳定、反应均一等，在药理学、毒理学等多个领域广泛应用，被作为国际通用的标准化实验用犬。本研究旨在建立比格犬深静脉穿刺置管模型，并探讨该模型的应用范围。现报道如下

1 材料与方法

1.1 实验动物

成年比格犬，8只，雌雄不限，体质量(8.0±1.2)kg，平均体质量8.2 kg。北京军事医学科学院丰台实验动物中心提供，动物合格证编号：SCXK(京)2015-0005。

1.2 主要实验材料

(1)手术条件：动物用手术室、手术台、动物用呼吸麻醉机、动物用心电监护仪、喉镜、氧气瓶、气管导管(6.5F)。(2)手术材料：一次性使用深静脉穿刺包、无菌纱布、医用75%酒精、碘伏。(3)药品：丙泊酚注射液、异氟烷、肝素钠注射液。

1.3 实验方法

1.3.1术前准备：术前12 h禁食，2 h禁水，比格犬固定于保定架上，在前肢内侧备皮，给予丙泊酚注射液1.0 mL/kg体质量静脉推注进行麻醉诱导，取仰卧位于动物手术台，固定四肢，行经口气管插管并连接动物用呼吸麻醉机并且给予1.5%～3%异氟烷和氧气混合吸入麻醉[1-4]，连接动物用心电监护仪监测比格犬生命体征，前肢头静脉建立静脉通道，在右侧腹股沟或右侧颈部备皮，常规消毒铺单。

1.3.2股静脉穿刺置管术：右下肢伸直，呈外展外旋位，腹股沟中点搏动最明显处皮下为股动脉，在其内侧0.3～0.5 cm处为股静脉定位点，在腹股沟下方约2 cm处皮肤穿刺进针。穿刺时左手固定穿刺处皮肤，右手持穿刺针进行穿刺，进针时针体与皮肤呈15°～30°夹角，边进针边回抽，见有暗红色回血后左手固定穿刺针，右手导入导丝，待导丝导入后左手固定导丝，将穿刺针拔出，再用扩张器扩张皮肤及皮下组织，扩张完毕后顺导丝植入单腔或双腔深静脉导管，导管进入深度约10～12 cm，然后将导管妥善固定并用无菌辅料包扎。用肝素钠生理盐水封管。

1.3.3颈内静脉穿刺置管术：比格犬取仰卧，头低20°～30°或肩枕过伸位，头转向对侧。找出胸锁乳突肌的锁骨头、胸骨头和锁骨三者所形成的三角区，该区的顶部即为穿刺点。穿刺针由穿刺点刺入，针体与颈部皮肤呈15°夹角，针尖指向胸锁关节的后下方，边进针边回抽，见有暗红色回血后即表明已进入颈内静脉，左手固定穿刺针，右手导入导丝，待导丝导入后左手固定导丝，将穿刺针拔出，再用扩张器扩张皮肤及皮下组织，扩张完毕后顺导丝植入单腔或双腔深静脉导管，导管进入深度约8～10 cm，然后将导管妥善固定并用无菌辅料包扎。用肝素钠生理盐水封管。

1.3.4肝素钠生理盐水的配比：取1 mL含12 500 U的普通肝素钠注射液，加入到100 mL生理盐水中，配成浓度为125 U/mL的肝素钠生理盐水溶液[5]。

2 结果

所有比格犬均采取1.5%～3%异氟烷和氧气混合吸入麻醉，麻醉效果良好，未出现麻醉意外等情况，麻醉诱导和复苏均较快，平均苏醒时间为15 min。行深静脉穿刺置管术的8只比格犬手术前后生命体征稳定，导管植入顺利，穿刺部位无明显出血，导管回血正常，通畅性良好，导管末端固定牢靠。股静脉穿刺置管组4只比格犬平均手术时间约30 min，血管定位及穿刺操作较容易，术中出血量较少，术后对穿刺管的包扎和护理简单易行。颈内静脉穿刺置管组4只比格犬平均手术时间约60 min，主要因为比格犬头部固定及颈内静脉血管定位不如股静脉清晰，并且术后对穿刺管的包扎较困难。术后每天用肝素钠生理盐水冲管可保证长期维持管道通畅。根据需要可以选择单腔或双腔深静脉穿刺导管，术后留置的导管可以连接血液灌流机或血液透析机，还可以用于兽医对比格犬的输液、抢救输血等治疗过程。对本次参加实验的两组比格犬的监测指标见表1。

3 讨论

比格犬生物学特性可靠，遗传性稳定，来源清晰，个体差异小，性情温顺，易饲养，抗病能力强，适用于生物医学各学科的研究[6-9]。其血液循环系统发达，器官功能一致，实验结果稳定，重复性好，尤其适合药理、循环、生理、毒理、外科、眼科及肿瘤学病因和治疗等基础医学研究，是国际医学、生物学界公认的最标准的理想的实验用犬，世界卫生组织将其定为安全性评价研究的首选犬种，广泛应用于食品、 药品、农药、化妆品等安全性评价研究[10]。

深静脉穿刺留置导管术是临床重症监护中常用的操作技术，是危重、大手术及慢性消耗性疾病患者进行中心静脉压监测、输血、输液、血液透析及血液灌流最有效的途径之一。深静脉置管由于保留时间长、输液种类广泛、导管弹性好等优点[11]，目前已广泛应用于危重患者的救治、肠外静脉营养、血液标本的采集等，还扩展到血液灌流、血液透析、化疗、排除体腔积液等方面。但如果护理不当则会造成导管堵塞、血栓形成、导管相关性感染等严重并发症，所以在成功置管的同时还需要加强护理措施，例如精细操作、固定导管、重视封管、防止感染等[12]。我院实验动物中心在保障科研实验人员完成实验研究的过程中发现，有部分实验研究涉及到对比格犬的血液灌流和血液透析治疗并未发现比格犬深静脉穿刺置管模型的相关报道，为更好地配合我院相关研究人员做好相关的动物实验，我们探索建立比格犬深静脉穿刺置管模型，并探讨该模型的应用范围，填补了比格犬深静脉穿刺置管模型的空白，为今后开展相关实验研究提供技术支持和参考。为提高手术成功率，全程对比格犬行经口气管插管并连接动物用呼吸麻醉机，给予1.5%～3%异氟烷和氧气混合吸入麻醉，连接动物用心电监护仪监测比格犬生命体征，该麻醉方法效果良好，未出现麻醉意外等情况，麻醉诱导和复苏均较快，手术结束后停止给药，比格犬很快苏醒，约10 min即可站立。穿刺置管的方法参照对临床病人操作进行，由于比格犬和人的解剖有所差异，所以在置管准备阶段通过对比格犬解剖探明股静脉和颈内静脉血管的部位和走向，明显提高了穿刺置管的成功率。比格犬深静脉穿刺置管模型的建立，实现了血液灌流及血液净化等技术在实验动物身上的应用，为开展相关临床基础研究提供方便。该项技术也可应用于兽医对中毒犬行血液灌流或血液净化救治，对休克犬进行快速大量补液等。