D12S391基因座检出四等位基因1例

付 颖，黄 琼，张 帅，陈 俭，徐恩萍

（浙江大学司法鉴定中心，浙江 杭州 310029）

1 案例

1.1 简要案情

1例父子关系鉴定中采集被鉴定人的末梢血进行检测，发现被检父D12S391基因座STR分型为20，21，22，23，后单独采集被检父带毛囊的毛发样本进行验证。

1.2 DNA检验

采用Chelex-100法提取样本基因组DNA。采用Goldeneye®20A试剂盒［基点认知技术（北京）有限公司］对被鉴定人血样进行扩增，后用EX22试剂盒（无锡中德美联生物技术有限公司）对被检父毛发进行扩增。扩增体系及具体操作均按照各试剂盒说明书进行，扩增产物均在3130xl基因分析仪（美国AB公司）上进行电泳分离检测。

1.3 分型结果

被检父与孩子之间在不考虑D12S391基因座的情况下可以排除两者存在生物学遗传关系。

被检父血样和毛发的D12S391基因座STR分型一致，均为 20，21，22，23，且四个峰的峰高均衡（图1），其他基因座分型均为一个或两个峰。

图1 被检父D12S391基因座分型图谱

对被检父D12S391基因座进行了等位基因测序检测。结果证实了D12S391基因座存在四个重复序列：[AGAT]12[AGAC]8、[AGAT]13[AGAC]8、[AGAT]13[AGAC]9和[AGAT]13[AGAC]9[AGAT]。

2 讨 论

在正常情况下，STR基因座的分型图谱表现为一条带或者两条带，本案例中采用Goldeneye®20A试剂盒扩增时被检父D12S391基因座分型出现四条带，在更换EX22试剂盒扩增后该基因座分型仍检出四条带，且 STR 分型一致，均为 20，21，22，23。排除了实验室污染或电泳时泳道渗漏以及PCR扩增引起的非特异产物，同时证明不是引物设计的原因。等位基因测序结果进一步表明，血液与毛发样本没有污染，四个重复序列确实存在。

关于三带型等位基因的研究及案例已有很多文献[1-6]报道，其产生机制主要有5个方面：（1）父系或母系同源染色体在减数分裂时不分离而整体遗传给子代，即三体综合征；（2）同源染色体在减数分裂时出现不等价交换；（3）在受精卵发育阶段，染色体不分离，产生不同基因型细胞组成的嵌合体；（4）双胞胎在胚胎发育期间发生血液交换；（5）异基因骨髓或造血干细胞移植后形成的嵌合体，形成三或四等位基因[2]。BUTLER等[1-2]认为三带型的出现与染色体有关。但四等位基因的产生机制与三带型的产生机制是否一致需要进一步研究。

由于本案例中被检父与孩子之间排除亲子关系，被检父拒绝进一步检验，也无法获得被检父直系亲属的数据，故无法进一步研究D12S391基因座等位基因的遗传方式以及出现四等位基因的具体原因。

[1]BUTLER J M.法医DNA分型：STR遗传标记的生物学、方法学及遗传学[M].2版.侯一平，刘雅诚，译.北京：科学出版社，2007：98-99.

[2]韩莉莉，潘棱，沈晓丽，等.STR基因座中检出三带型等位基因三例及遗传分析[J].海南医学，2011，22（15）：1-3.

[3]贾雲舒，钱水，周凤蕾，等.D13S317基因座三等位基因遗传学分析[J].中国法医学杂志，2015，30（3）：312-313.

[4]宋晓丽，赵奇，刘晓云，等.D16S539基因座中检出三带型等位基因及遗传分析[J].暨南大学学报（自然科学与医学版），2015，36（2）：143-145.

[5]刘亚举，刘开会，高林波，等.STR基因座中检出三等位基因 1 例[J].法医学杂志，2008，24（5）：399-400.

[6]陈芳，陈俭，付颖，等.STR基因座中检出三带型等位基因 7 例[J].法医学杂志，2014，30（3）：215-216.