宫颈细胞HPV E6/E7 mRNA检测在宫颈诊断价值中的分析

赵 琳 琳

(武汉大学基础医学院 武汉 430000)

宫颈癌是临床上常见的女性恶性肿瘤[1]，人乳头状瘤病毒(HPV)持续感染与宫颈病变密切相关[2]。HPV的致癌基因为E6/E7基因，它对宫颈癌的发生发展具有重要作用[3]。本研究检测分析宫颈病变患者的HPV E6/E7 mRNA，现将结果报告如下。

1 对象与方法

1.1 研究对象

选取2016年1月～2017年10月于我院妇产科就诊的120例患者，平均年龄(39.58±4.1)岁，排除妊娠妇女、伴有自身免疫性疾病以及既往接受过治疗的宫颈上皮内瘤变(CIN)及宫颈癌患者。所有对象均自愿行HPV DNA和HPV E6/E7 mRNA检测，以组织病理学检查结果为金标准。

1.2 方法

1.2.1HPV DNA检测

采取DNA提取、PCR扩增等步骤进行检测，清晰可见的蓝紫色圆点代表阳性。

1.2.2HPV E6/E7 mRNA检测

按照裂解细胞、杂交、信号放大等步骤进行检测，计算机软件自动读取HPV E6/E7 mRNA拷贝数量，大于0代表阳性。

1.2.3组织病理学检测

病理科医师阅片，诊断结果分为慢性宫颈炎、CIN I级、CIN II～III级、宫颈浸润癌，CIN II及以上的宫颈病变定义为高级别宫颈病变。

1.3 统计学分析

采用SPSS19.0软件进行统计，计数资料采用χ2分析，P<0.05代表差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 不同病变程度的HPV DNA及HPV E6/E7 mRNA阳性率

慢性宫颈炎、CIN I、CIN II～III、宫颈浸润癌的HPV E6/E7 mRNA、HPV DNA阳性率逐渐升高，差异均有统计学意义(P<0.05)。

2.2 高级别宫颈病变的诊断效能

HPV E6/E7 mRNA与HPV DNA检测高级别宫颈病变的灵敏度、阳性预测值、阴性预测值均无统计学差异(P>0.05)；两种方法的特异度比较，差异有统计学意义(P<0.05)。

表1 HPV DNA及HPV E6/E7 mRNA的阳性率

病理结果例数HPVE6/E7mRNAHPVDNA阳性例数比例(%)阳性例数比例(%)慢性宫颈炎3239．38721．88CINI17423．53s1058．82sCINII～III523669．23sb4076．92sb宫颈浸润癌1919100．00sbc1894．74sbc

注：a与慢性宫颈炎比较，P<0.05；b与CIN I比较，P<0.05；c与CIN II～III比较，P<0.05。

表2 高级别宫颈病变的诊断效能(%)

项目灵敏度特异度阳性预测值阴性预测值HPVE6/E7mRNA检测77．4685．7188．7172．41HPVDNA检测81．6965．3177．3371．11χ20．3905．5182．7231．560P0．5320．0190．0950．287

3 讨论

宫颈癌是临床上常见的女性恶性肿瘤，其发病率逐年上升，对我国女性的生命健康构成了严重威胁。宫颈上皮内瘤变是一组与宫颈浸润癌密切相关的癌前病变，相关研究已证实，HPV持续感染对宫颈癌前病变及宫颈癌的发生发展具有重要作用[2]。E6/E7基因是HPV的两条癌基因片段，E6可通过结合P53蛋白使之丧失抑癌活性，E7可通过影响细胞周期调控蛋白及Rb家族使细胞无限增殖，E6/E7基因通过干扰细胞周期及染色体的稳定导致宫颈细胞癌变[4]。因此，HPV E6/E7 mRNA的表达对预测宫颈癌变具有重要意义。国内外均有研究证实，HPV E6/E7 mRNA的表达与宫颈病变严重程度呈正相关[5]。本次研究结果显示，宫颈浸润癌、CIN II～III、CIN I的HPV E6/E7 mRNA、HPV DNA阳性率均高于慢性宫颈炎，且宫颈浸润癌高于CIN II～III，CIN II～III高于CIN I(P<0.05)，提示宫颈病变越重，HPV E6/E7 mRNA阳性率越高，与上述内容一致。

近年来，HPV DNA检测在临床上广泛应用，该方法属于病因学检测，具有较高的灵敏度，对宫颈癌的发现具有重要意义[6]。然而，大多数HPV感染均是暂时性的，部分可在两年内消退，HPV DNA检测虽有较高的灵敏度，但特异度相对低下，这使得HPV DNA检测发现了过多的无临床意义的感染，这不仅增加了患者的心理压力，也为其带来了一定的经济负担[7]。本次研究结果显示，HPV E6/E7 mRNA的特异度为85.71%，显著高于HPV DNA的特异度65.31%，说明HPV E6/E7 mRNA检测的准确性更高，有利于避免过度检查及过度治疗，从而减轻患者的心理压力及经济负担[8]。

综上所述，HPV E6/E7 mRNA与宫颈病变的严重程度密切相关，且HPV E6/E7 mRNA检测具有较高的特异度.更有利于发现真正的高危人群，对宫颈病变诊断具有重要价值。

参 考 文 献

1 蒙志平,黎勇明,杨玲,等.宫颈细胞HPVE6/E7mRNA检测在宫颈病变诊断中的价值研究.国际检验医学杂志,2016,37(21):2987～2989.

2 严雪梅,洪颖.宫颈细胞HPV E6/E7 mRNA检测在宫颈病变诊断中的价值.山东医药,2014,54(23):60～63.

3 郑智,吕杰强.高危HPV E6/E7 mRNA对宫颈病变诊断价值的研究.医学研究杂志,2015,44(8):125～128.

4 王振明.HPV E6/E7 mRNA检测对宫颈细胞学诊断为ASC-H的分流作用.中国医药指南,2014,12(21):70～71.

5 智艳芳,李肖甫,沈勇,等.人乳头瘤病毒癌基因E6/E7mRNA检测在宫颈病变中的临床意义.国际遗传学杂志,2014,37(1):6～12.

6 涂媛,陈琼,石海鹏,等.人乳头瘤病毒E6/E7 mRNA在宫颈疾病筛查中的临床价值.四川医学,2017,38(2):178～181.

7 Brown C A,Bogers J,Sahebali S,et al.Role of Protein Biomarkers in the Detection of High-grade Disease in Cervical Cancer Screening Programs.J Oncol,2012,2012:289315.

8 张永欣,张璐.人乳头瘤病毒E6/E7mRNA检测在宫颈癌筛查中的意义.中国妇幼健康研究,2016,27(7):816～818.