白细胞介素-1受体拮抗剂在NAFLD患者的变化和意义

王瀚 陈进 臧淑妃 施军平 杜卫东⋆

在欧美、日本等国家非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）是慢性肝病的首要病因，在我国仅次于病毒性肝炎，居第2位。NAFLD的发病率呈上升趋势，在发达国家发病率为20%～30%，非酒精性脂肪性肝炎（NASH）发病率10%～20%，肝硬化发病率2%～3%［1-2］。研究显示，NASH患者中以脂肪变及小叶内炎症表现较突出，而白介素-1受体拮抗剂（IL-1RA）具有抗炎作用［3-7］，能够减轻IL-1引起的一系列生理和病理反应，但与NAS积分及NAFLD病程进展的相关性尚不明确。本文探讨IL-1RA在NAFLD患者中的变化和意义。

1 临床资料

1.1 一般资料 2012年1月至 2016年12月杭州师范大学附属医院收治的NAFLD患者，经肝穿刺活检有NAS评分的患者51例，所有患者均符合世界胃肠病学组织（WGO）发布的非酒精性脂肪肝病和非酒精性脂肪性肝炎的全球指南。排除淤胆性肝病，无长期用药史，无长期饮酒病史，近期无胃肠道手术史及怀孕史。所有患者血清学检测甲、乙、丙、戊、巨细胞病毒、EB病毒指标为阴性，自身抗体检测阴性。另选择体检健康人群16例为正常对照组。

1.2 方法 记录饮酒史、药物使用史、家族遗传疾病史，测量身高（cm）、体质量（kg），计算体质指数（BMI）。（1）生理生化指标及血清IL-1RA水平检测：抽取受检者晨起空腹12h肘静脉血3～4 ml，3000 r/min，离心10min，分离血清置-80℃冰箱冻存。采用双抗夹心ELISA法测定血清IL-1RA水平。体检中心生化检测丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）、谷氨酰转肽酶（GGT）、总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白（LDL）、高密度脂蛋白（HDL）、尿酸（UA）、空腹血糖（GLU）、空腹胰岛素（INS），计算胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）。（2）肝脏穿刺病理检查：肝穿刺组织的获取由经验丰富的医师在B超引导下进行穿刺。活检组织取出后立即用10 %福尔马林固定。经HE染色后由两位经验丰富的病理学医师对组织进行半定量评分后按NAS积分进行分组。NAS积分（0～8分）：①肝细胞脂肪变：0分（＜5%）；1 分（5%～33%）；2 分（34%～66%）；3分（＞66%）。②小叶内炎症（20倍镜计数坏死灶）：0分（无）；1分（＜2个）；2分（2～4个）；3分（＞4 个）。③肝细胞气球样变：0分：无；1分：少见；2分：多见。NAS为半定量评分系统，将肝细胞脂肪变、小叶内炎症及肝细胞气球样变得分累加得到NAS 积分，＜5分为非NASH组，≥5分为NASH组。纤维化评分＜3分的为非进展期纤维化组，≥3分为进展期纤维化组。

1.3 统计学方法 采用SPSS24.0统计软件。计量资料以（x±s）表示，计数资料以百分比表示。两组间比较采用两独立样本t检验，多组间比较采用单因素方差分析。相关性分析采用Pearson相关性分析。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 三组一般资料比较 见表1。

2.2 非进展期肝纤维化组和进展期肝纤维化组临床特征及生化指标比较 见表2。

表2 两组临床特征及生化指标比较（x±s）

2.3 血清IL-1RA水平生化指标和NAS积分的相关性分析 见表3。血清IL-1RA与ALT、GGT、TG、LDL呈正相关（P＜0.01）。血清IL-1RA与NAS积分呈负相关（P＜0.01）

表3 血清IL-1RA水平与生化指标以及NAS的相关性

3 讨论

本资料显示，NAFLD患者的BMI、ALT、TG、GGT较正常对照组明显升高，HDL则明显降低。NAFLD患者中NASH患者的ALT、AST、GGT更高。血清IL-1RA水平与ALT、GGT、TG、LDL呈正相关，与NAS评分呈负相关，表明血清IL-1RA 水平与NAFLD 病程进展及病变严重程度有关，非NASH 组血清IL-1RA明显高于NASH 组，差异有统计学意义。

NASH的发病机制，目前认为是以脂肪酸沉积及氧应激炎症因子作用的“二次打击学说”［8］。TLR信号转导通路的激活是二次打击的重要信号通路。TLR信号转导通路的激活来源于细胞浆Toll/IL-1受体（TIR）的结构域，该结构域与TIR结构域包含的接头蛋白 MyD88发生相互作用。经过配体的刺激，通过两个分子死亡结构域的相互作用，MyD88将IL-1受体相关激酶-4（IRAK-4）吸引到TLRs。IRAK-1经磷酸化而激活并与TRAF6发生作用，从而激活 IKK复合体并导致MAP激酶（JNK，p38 MAPK）和NF-κB的激活［9-10］。

IL-1RA是细胞因子中唯一的一种天然拮抗剂［11］，是由单核巨噬细胞分泌的分子量为22-25KD的酸性糖蛋白。在结构上，IL-1RA与IL-1有同源性，能够竞争性地与IL-1受体结合且不激活靶细胞，能够消除或减轻IL-1 的生物活性从而影响机体的病理生理现象，能够在NAFLD 病程进展中炎症发生发展中发挥抗炎的作用。

Larsen CM［12］等研究显示，在2型糖尿病者中使用IL-1RA，能降低血糖，且减轻胰岛β细胞的炎症反应。Shen J［13］等的研究证明，在慢性胰腺炎小鼠体内重组的IL-1RA 能够抑制IL-1 的活性，减轻胰腺炎症及纤维化水平，表明在胰腺炎症中IL-1RA起显著抗炎作用。Petrasek J［14］等研究认为，在酒精性脂肪肝小鼠注射IL-1RA能够减轻肝脏脂肪变，减轻肝脏炎症。

综上所述，血清IL-1RA 水平与NAFLD 及NASH病程进展及程度密切相关，NAFLD患者血清白细胞介素-1受体拮抗剂浓度升高与NASH患者血清白细胞介素-1受体拮抗剂浓度相对不足，对TLR 信号转导通路的抑制不足，可能是NAFLD发展至NASH阶段的关键因素。可以认为抑炎因子IL-1RA在NAFLD早期出现升高，而后期持续分泌不足可能是NASH持续进展的重要原因。

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