HBeAg阳性与阴性乙型肝炎肝硬化患者乙肝病毒载量及肝功能指标的研究

张国顺，孟冬梅，方正亚，刘斌

（华北理工大学附属医院 消化内科，河北 唐山 063000）

肝硬化是一种常见的肝脏病变。我国肝硬化形成的病因以慢性乙型肝炎病毒（hepatitis B virus,HBV）感染最多见。研究报道[1]，全世界曾经感染过HBV的人大约有20亿，其中慢性乙肝感染者约为2.4亿人，每年大概有65万人死于HBV感染引起的肝硬化、原发性肝癌和肝衰竭[2]。近年来，乙肝e抗原（HBeAg）阴性的慢性乙型肝炎患者越来越多，且有文献报道HBeAg阴性慢性乙型肝炎进展为重型肝炎[3]、肝硬化[4]和肝癌的概率较高，已经在临床上引起重视。但对于乙型肝炎肝硬化方面的相关研究较少。乙型肝炎肝硬化是慢性乙型肝炎向肝癌进展的过渡期，在此阶段及时采取干预措施对于预防疾病进展至关重要，故本研究对比分析了HBeAg阳性和阴性乙型肝炎肝硬化患者乙肝病毒载量及肝功能指标的差异，以期为临床诊断及治疗提供指导意义。

1 资料与方法

1.1 一般资料

2015年2月-2016年2月在华北理工大学附属医院住院的乙型肝炎肝硬化患者共270例。其中男201例，女69例；年龄30～80岁，平均54.05岁。肝硬化诊断均符合中华医学会肝病学分会、中华医学会感染病学分会联合修订的《慢性乙型肝炎防治指南（2015年更新版）》中的诊断标准[5]。所有入选病例均为单纯的乙型肝炎肝硬化患者，排除合并有甲型、丙型、丁型、戊型等肝炎病毒感染以及合并有酒精性肝病、自身免疫性肝病等其他肝病的患者。HBeAg阳性乙型肝炎肝硬化患者124例，其中男92例，女32例；平均年龄（53.75±11.35）岁；HBeAg阴性肝硬化患者146例，其中男109例，女37例；平均年龄（54.49±10.76）岁。两组患者的性别构成比及年龄均差异无统计学意义（P＞0.05）（见表1），具有可比性。

1.2 检测方法

1.2.1 仪器与试剂 HBsAg定量检测系统为SYM-810时间辨荧光分析仪及试剂，由上海新波生物有限公司提供。HBV DNA检测系统包含实时荧光定量聚合酶链反应（quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR）仪、乙型肝炎病毒核酸定量检测试剂盒，由上海科华生物工程股份有限公司提供。

表1 一般资料比较

1.2.2 方法 采用灭菌的一次性真空带盖塑料管，抽取清晨空腹静脉血，并分离血清，用TRFIA方法对患者进行HBsAg、HBeAg定量检测。HBV DNA标本采集清晨空腹静脉血3～5 ml，离心分离血清分装于1.5 ml灭菌EP管，保存于-20℃冰箱备用，1周内完成qRT-PCR检测。

1.3 研究方法

采用回顾性分析方法，收集患者的一般资料及相关指标，以HBeAg定量1.0 COI为界限将肝硬化患者分为HBeAg阳性组和阴性组，分析两组之间年龄、性别、乙肝表面抗原（HBsAg）、HBV DNA、谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、总胆红素（TBIL）、白蛋白（ALB）的差异，然后按HBV DNA含量的多少分为低（＜103IU/ml）、中（103～105IU/ml）、高（＞105IU/ml）等3个等级滴度水平，统计HBeAg阳性和阴性肝硬化患者的不同HBV DNA滴度水平的构成比。HBV DNA的检测值＜1 000 IU/ml时无法检测，因此所有HBV DNA低于1 000 IU/ml的病例均记录为500；HBsAg＞2 500 IU/ml无法检测，所以所有的HBsAg定量值在2 500 IU/ml以上的病例被记录为2 500。

1.4 统计学方法

数据分析采用SPSS 17.0统计软件，计量资料满足正态分布的以均数±标准差（±s）表示，2个样本均数比较采用t检验，非正态分布以中位数和四分位数间距[M（P25～P75）]表示，两组间比较采用Mann-WhitneyU检验，计数资料以率表示，采用χ2检验。所有检验均为双侧检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 HBV定量及肝功能指标比较

HBeAg阳性组HBsAg、HBV DNA、ALT、AST含量与HBeAg阴性组比较，差异有统计学意义（P＜0.05），HBeAg阳性组高于HBeAg阴性组；两组间TBIL、ALB的比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。见表2。

表2 HBV定量及肝功能指标比较 M（P25～P75）

2.2 不同HBV DNA载量的构成比比较

HBeAg阳性组HBV DNA＜103IU/ml的患者占31.5%（39/124），HBV DNA 为 103～105IU/ml的患者占19.4%（24/124），均低于HBeAg阴性组的53.4%（78/146）和 26.7%（39/146）；HBeAg阳 性 组 HBV DNA＞105IU/ml的比例为 49.2%（61/124），高于 HBeAg阴性组的19.9%（29/146），两组间HBV DNA水平的构成比差异有统计学意义（P＜0.05）。见表3。

表3 不同HBV DNA载量的构成比 例（%）

3 讨论

肝硬化是我国目前常见的肝脏疾病，由各种不同类型的慢性肝脏病变发展而来。在我国大多为肝炎相关性肝硬化，尤其是乙肝肝硬化最常见。调查显示，肝硬化的病变进展与HBV的持续反复感染有较大的相关性[6]。一般认为反映HBV复制的最敏感的指标是HBV DNA水平升高和HBeAg持续阳性[7-8]，即HBeAg和HBV DNA含量的多少代表着HBV复制水平的高低和传染性的大小。故当慢性乙型肝炎患者血清中的HBeAg转阴、HBV DNA含量降低以及肝功能有所改善后，可以判定患者病情趋于好转。但事实上并不是所有出现HBeAg血清学转换的乙肝感染者的病情均好转，而是有些人可能发展为肝硬化和原发性肝癌。有研究显示[9-10]，HBeAg阴性的乙型肝炎患者比HBeAg阳性患者发生肝硬化的风险要高。故本研究探讨HBeAg阴性和阳性乙型肝炎肝硬化患者体内HBV载量及肝功能指标的差异，从而预测其病情严重程度及预后。

近年来，HBeAg阴性的慢性乙肝感染者逐渐增多，一些患者发生血清学转换后体内的HBV DNA仍在持续复制，肝组织损伤仍在加重。有研究显示[11]，HBeAg阳性肝硬化患者机体的炎症程度较重，但肝硬化的程度轻，肝储备功能较好，而HBeAg阴性肝硬化患者的肝脏病变程度则较重。在本研究中，HBeAg阳性组乙型肝炎肝硬化患者的HBsAg、HBV DNA、ALT、AST等检测指标均高于HBeAg阴性组的患者。ALT主要存在于肝脏细胞的胞浆中，在肝脏发生炎症时，肝细胞膜的通透性发生改变，ALT则会从肝细胞释放到血液中，从而在血清中检测到其升高，故本结果提示HBeAg阳性肝硬化患者机体的炎症反应明显，与赵蔚等[11]研究结果一致。HBsAg是肝细胞核内共价闭合环状DNA（cccDNA）转录翻译的产物，它的测定能够反映体内病毒复制的水平，而且它的变化贯穿整个慢乙肝病程。在慢性乙肝病情进展的不同阶段，随着病情程度的加重，HBsAg水平会逐渐降低[12]；同时，还有研究指出[13]，HBsAg定量水平随着慢性乙型肝炎向肝硬化、肝癌的进展而逐渐下降，并且和同一患者体内检出的HBV DNA的含量水平呈正相关，进一步证实了HBeAg阴性肝硬化患者病情程度较重。TBIL反映肝脏的代谢功能，ALB反映肝脏的合成功能，两组间这2个指标差异均无统计学意义，提示肝脏的合成和代谢功能与HBV的复制水平无相关性。

HBeAg的转阴往往伴随HBV DNA含量的下降，但HBV DNA水平与病情严重程度并不一致，随着肝脏病变程度的逐渐加重，血清HBV DNA的复制能力减弱，在HBV DNA持续阴性或保持低度复制的患者中，肝内仍可有HBV复制[14]，部分患者的肝组织损伤仍在进展。本研究结果显示，HBeAg阴性组HBV DNA呈低、中水平复制，HBeAg阳性组HBV DNA高度复制，与杨志勇等[15]的报道一致，这也证实HBV DNA复制水平与血清HBeAg呈正相关[16-18]。但HBeAg阴性组肝硬化患者HBV DNA为103～105IU/ml的比例高于HBeAg阳性组患者，且HBV DNA＞105IU/ml的比例占19.9%，说明HBeAg虽然转阴，但是HBV并没有停止复制，仍需积极抗病毒治疗。

综上所述，HBeAg阴性的乙肝肝硬化患者体内HBsAg、HBV DNA、ALT、AST的含量均低于HBeAg阳性患者，机体炎症反应较轻，但其体内病毒复制并未停止，肝脏病变仍在进展，肝硬化程度也逐渐加重，仍需积极抗病毒治疗，并注意监测体内乙肝病毒的含量。

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