中药清痤方干预痤疮动物模型金黄地鼠皮脂腺斑的实验研究

2018-07-17 12:43李思琪俞若熙肖连宇姜厚望
新疆医科大学学报 2018年6期
关键词:皮脂腺痤疮低剂量

李思琪, 俞若熙, 肖连宇, 姜厚望, 王 琦

(北京中医药大学中医学院, 北京 100029)

痤疮是青春期常见的慢性毛囊皮脂腺炎症,常发生于人体面、胸、背等部位,属中医“肺风粉刺”,常变现为粉刺、丘疹、结节、脓疱等症状[1]。目前学者多认为病菌、微生物以及雄激素等对皮脂腺细胞产生刺激,使皮脂腺增生并分泌过多的皮脂使毛囊管角质化,最终导致了痤疮的形成[2]。清痤方是国医大师王琦在治疗痤疮中常用的经验方,前期对28例湿热体质的痤疮患者通过清痤方加减调体治疗痤疮进行观察,结果表明总有效率为85.71%,随访发现大部分患者预后良好[3-4]。本研究以金黄地鼠双侧背部皮脂腺斑为痤疮模型,研究中药清痤方治疗痤疮的效果,现报道如下。

1 材料与方法

1.1动物成年SPF级雄性金黄地鼠60只,体质量(120±10)g,由北京维通利华实验动物技术有限公司提供,动物许可证号SCXK(京)2012-0001。

1.2试药中医清痤方购自北京中医药大学国医堂中医门诊部;螺内酯片(杭州民生药业有限公司,批号T16E017)。

1.3仪器FA1004型电子天平(上海越平科学仪器有限公司),605A型电子游标卡尺(哈尔滨量具集团有限责任公司),NIKON ECLIPSE CI型正置光学显微镜(日本尼康),NIKON DS-U3型成像系统(日本尼康)。

2 方法

2.1动物的分组与给药将60只金黄地鼠随机分为5组,即空白组(生理盐水)、阳性对照组(螺内酯0.7 mg/mL)、清痤方低剂量组(清痤方1.14 g/mL)、清痤方中剂量组(清痤方2.28 g/mL)、清痤方高剂量组(清痤方4.56 g/mL),每组12只,给予全价营养颗粒饲料,自由饮水,室温(22±2)℃,湿度59%~65%,单笼饲养,适应性饲养1 w后,按照上述剂量给药,给药量为10 mL/kg, 每天灌胃给药1次,连续30 d。

2.2标本采集的方法适应性饲养1 w后,称量各组金黄地鼠体质量,用剃毛器将金黄地鼠双侧背部的毛剃除,使皮肤表面的皮脂腺斑露出,在强光下测量斑块的最大横径和最大纵径,拍照记录。给药30 d后采集标本,采集前禁食,自由饮水,称量体质量,再次测量皮脂腺斑的面积,进行拍照记录,切取1 cm×1 cm皮脂腺斑皮肤组织,置于10%甲醛溶液中进行固定。

2.3指标检测方法

2.3.1 皮脂腺斑面积的变化 以最大纵径×最大横径计算皮脂腺斑面积,分别计算实验前后金黄地鼠双侧皮脂腺斑的面积,进行观察比较。

2.3.2 皮脂腺斑组织结构的变化 将切取的金黄地鼠双侧皮脂腺斑皮肤组织用石蜡包埋、切片、HE染色,观察皮脂腺组织的厚度和松散程度。皮脂腺厚度计算:(+++)重叠腺叶数≥4叶;(++)重叠腺叶数2~3叶;(+)重叠腺叶数1叶;(-)重叠腺叶数为0。皮脂腺松散程度:密(1个视野中连续腺叶数≥3);松(1个视野中连续腺叶数约<3)。

3 结果

3.1给药前后金黄地鼠体质量的变化与给药前比较,给药后各组金黄地鼠体质量均增长,差异有统计学意义(P<0.05)。与空白组比较,给药后阳性对照组、清痤方低剂量组和中剂量组金黄地鼠体质量变化不大,差异无统计学意义(P>0.05)。与空白组及阳性对照组比较,给药后清痤方中、高剂量组金黄地鼠体质量增长程度较小,差异有统计学意义(P<0.05),见表1。

3.2给药前后金黄地鼠皮脂腺斑面积的变化与空白组比较,给药后各组金黄地鼠皮脂腺斑面积均减小,差异有统计学意义(P<0.05);与阳性对照组比较,给药后清痤方高剂量组金黄地鼠皮脂腺斑面积减小,差异有统计学意义(P<0.01),见表2、图1。

表1 给药前后金黄地鼠体质量

注:与空白组比较,*P<0.05,**P<0.01; 与阳性对照组比较,#P<0.05,##P<0.01。

治疗前

治疗后

图1清痤方高剂量组同一只金黄地鼠治疗前、后比较

3.3给药后金黄地鼠皮脂腺斑组织学的变化给药后空白组金黄地鼠皮脂腺腺叶大且饱满,排列紧密重叠腺叶数多,呈多层分叶状分布,多为4层及以上。阳性对照组、清痤方低剂量组、清痤方中剂量组金黄地鼠皮脂腺结构稍有变化,大部分皮脂腺变薄,重叠腺叶数多为1~3层。清痤方高剂量组金黄地鼠皮脂腺结构变化明显,皮脂腺总体数量减少,腺体层数减少,分叶体积缩小,分布不均,排列疏松,见图2。与空白组相比较,清痤方高剂量组金黄地鼠皮脂腺厚度变小,差异有统计学意义(P<0.05),见表3。与空白组相比较,阳性对照组和清痤方高剂量组金黄地鼠皮脂腺松散度变小,差异有统计学意义(P<0.05),见表4。

表2 给药前后皮脂腺斑面积

注:与空白组比较,*P<0.05,**P<0.01; 与阳性对照组比较,#P<0.05,##P<0.01。清痤方高剂量组2只金黄地鼠因灌胃操作不当死亡。

A: 空白组

B: 阳性对照组

C: 清痤方低剂量组

D: 清痤方中剂量组

E: 清痤方低高剂量组

组别n++++++-空白组124530阳性对照组121551清痤方低剂量组120651清痤方中剂量组120471清痤方高剂量组100244

表4 清痤方对皮脂腺斑松散程度的影响

注: 与空白组比较,*P<0.05。

4 讨论

痤疮是一种常见的损美性疾病,影响了患者的个人及社会生活,增加了患者的焦虑情绪[5]。男性和女性痤疮的发病概率大致相同,但男性的病情更为严重[6]。中药清痤方将调节机体湿热放在首位,芦根清透肺热,冬瓜子清肺利湿,桃仁活血祛瘀,枇杷叶清胃热降肺气,白花蛇舌草清热解毒兼利湿,薏苡仁健脾渗湿,清热祛毒,从根源上去除产生湿热之源。薏苡仁中有类雌激素的成分,可以促进黄酮以及雌激素的生成[7]。丹参具有血祛瘀,凉血消痈的功效,去瘀生新而不伤正,其中的丹参酮[8-9]具有抗炎抑菌以及抑制雄性激素的作用,可起到抗痤疮丙酸杆菌、抗雄激素的效果。皮脂腺组织的分泌活动受到雄性激素的影响,皮脂具有润泽皮肤、毛发及杀菌作用,青春期分泌活跃。现代研究认为皮脂溢出增多是痤疮发病的重要原因,由于体内雄性激素作用于皮脂腺,使皮脂腺增生及过度分泌皮脂,同时毛囊皮脂腺导管中微生物分解皮脂成为有刺激性的脂肪酸,从而刺激毛囊上皮增生角化,导致皮脂排泄障而形成,致使出现痤疮等损害[10-11]。皮脂腺分泌过剩以及排泄不畅易导致细菌感染,出现炎症性丘疹、脓疱以及囊肿,部分患者甚至会出现继发增生性或萎缩性瘢痕以及色素沉着等,所以调控皮脂腺功能,对痤疮的防治具有重要意义。本研究认为湿热内蕴是湿热体质者出现痤疮的根本原因,要根治痤疮的复发必须强调治其内在体质,西医治疗痤疮存在较多的副作用,从体质进行干预为痤疮的治疗提供了新的思路。

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