Oct4蛋白对前列腺癌雄激素剥夺治疗后进展速度的预测价值分析

薛 炜，邱建新，桑 楠，张志明

目前，临床对于前列腺癌的致病原因及具体发病机制尚未完全阐述清楚[1]，但有相关生物学研究显示，前列腺癌是指主要发生在前列腺的上皮性恶性肿瘤，根据其不同发病原因及疾病的不同进展情况可有多种病理表现类型，其中腺癌最常见[2-3]。而相关资料曾报道，目前我国大多数前列腺癌患者在其确诊时已失去最佳根治治疗时机，故雄激素剥夺治疗为该类患者首选的临床治疗方案[4]。但有研究发现，经雄激素剥夺治疗的前列腺癌患者往往有部分治疗后可进展为去势抵抗性前列腺癌，若不及时予以有效控制，当病情继续发展时可存在极差的预后效果[5-6]。故找寻影响前列腺癌病情发展和进展以及导致去势抵抗性前列腺癌出现的相关因素并及时予以干预是改善前列腺癌患者预后的关键措施。曾有文献表明，在不同预后的前列腺癌患者中其相关蛋白的表达存在一定的差异，但具体蛋白种类尚未明确[7-8]。本研究回顾性分析了前列腺癌108例的临床及随访资料，旨在探讨八聚体结合转录因子4(Oct4)蛋白对前列腺癌雄激素剥夺治疗后进展速度的预测价值。现报告如下。

1 资料与方法

1.1临床资料 选取2010年1月—2014年12月我院收治的前列腺癌108例，均为男性，年龄38～85(56.20±10.26)岁。纳入标准：①均符合2012年世界卫生组织(WHO)中前列腺癌明确诊断标准[9]；②均经相关临床及病理检查等确诊；③均经雄激素剥夺治疗且符合其治疗标准；④本研究经医院伦理委员会批准；⑤所有患者及家属均知情同意并签署知情同意书参与本研究。排除标准：①存在原发性肝肾功能障碍及其他系统严重疾病者；②除前列腺癌外存在其他恶性肿瘤者；③存在雄激素剥夺治疗的禁忌证者；④临床及随访资料不完整者。

1.2方法 采用回顾性分析法分析纳入本研究108例前列腺癌患者的临床及随访资料，根据资料结果可知所有前列腺癌患者在确诊后均采用雄激素剥夺治疗，且治疗结束后均进行了3年的随访，在治疗及随访过程中均记录年龄、病程、体质量指数等临床资料、疾病情况及治疗后进展为去势抵抗性前列腺癌状况，检测Oct4蛋白等相关临床指标水平。

1.3观察指标及检测方法 根据临床和随访资料记录患者年龄、病程、体质量指数、肿瘤分级、临床分期、淋巴结转移等疾病情况及前列腺特异性抗原(PSA)和Oct4蛋白水平，无进展生存期和去势抵抗性前列腺癌的发生情况，并比较Oct4蛋白不同表达及不同前列腺癌患者上述资料的差异。肿瘤分级通过Gleason评分标准[10]可将其分为低分化、中分化和高分化；临床分期采用2002年AJCC的TNM分期系统[11]进行评价。PSA检测方法：所有患者在检测当日清晨于空腹状态下抽取静脉血5 ml，以3000 r/min离心10 min后分离血清，并将其置于-70℃的环境中进行贮存以待检测，通过酶联免疫吸附法检测PSA水平。Oct4蛋白检测方法：前列腺癌穿刺石蜡标本连续4 μm厚切片，采用EnVision染色方法，分别检测癌组织中Nanog蛋白的表达情况，具体流程严格按说明书进行。已知阳性组织切片作为阳性对照，PBS代替一抗作阴性对照。结果判定标准：Oct4蛋白阳性着色表达于细胞核，呈黄色、棕黄色、褐色颗粒[12]。本研究采用光镜下对每一张切片每一个视野中的阳性着色细胞数、着色强度评分应用半定量方法进行评价。根据着色强度：0分为无色，1分为淡黄色，2分为棕黄色，3分为褐色、黑色；根据阳性细胞比例：阳性细胞数目所占比例<10%为1分、阳性细胞所占比例11%～50%为2分、阳性细胞数51%～75%为3分、阳性细胞数所占比例<75%为4分，两种积分相乘总分≤3分为阴性、>3分为阳性。无进展生存期定义标准：为所有患者从雄激素剥夺治疗开始至血清总PSA连续2次升高的时间[13]。去势抵抗性前列腺癌诊断标准：血清睾酮值达到去势水平(<50 μg/L或<17 nmol/L)；连续3次测得血清PSA值升高，较最低值升高≥50%[14]。

1.4统计学方法 采用SPSS 18.0软件进行统计分析，计数资料以率或构成比(%)表示，采用χ2检验，采用Log-rank检验和Cox比例风险回归模型分别对前列腺癌患者出现去势抵抗性前列腺癌进行单因素和多因素分析。α=0.05为检验水准。

2 结果

2.1前列腺癌患者临床及随访资料 108例前列腺癌患者经雄激素剥夺治疗后其中位无进展生存期为28个月(14～36个月)，其中Oct4蛋白阳性表达率为57.41%，血清PSA水平≥50 pg/ml比例为72.22%，而治疗后有35.19%的前列腺癌患者进展为去势抵抗性前列腺癌。见表1。

表1 108例前列腺癌患者临床及随访资料

注：PSA为前列腺特异性抗原，Oct4为11聚体结合转录因子4

2.2不同Oct4蛋白表达的前列腺癌患者临床资料比较 肿瘤低分化、出现淋巴结转移、PSA水平≥50 pg/ml及治疗后进展为去势抵抗性前列腺癌的前列腺癌患者其Oct4蛋白的阳性表达率较高，差异有统计学意义(P<0.05，P<0.01)。见表2。

2.3影响前列腺癌患者出现去势抵抗性前列腺癌的单因素分析 不同年龄、肿瘤分级、临床分期、淋巴结转移情况、PSA水平及Oct4蛋白表达的前列腺癌患者间其治疗后进展为去势抵抗性前列腺癌的发生率比较差异均有统计学意义(P<0.05)。见表3。

2.4影响前列腺癌患者出现去势抵抗性前列腺癌的多因素分析 经Cox比例风险回归模型分析显示，Oct4蛋白阳性表达为导致前列腺癌患者经雄激素剥夺治疗后进展为去势抵抗性前列腺癌的独立危险因素(P<0.05)。见表4。

3 讨论

近年来，随着人们生活习惯和生活环境的改变，我国癌症患者逐渐增多，相关数据报道，前列腺癌发病率在近年呈上升趋势[15]。有相关数据报道，前列腺癌是欧美国家男性中最常见的恶性肿瘤之一，其发病率在美国位居第一，而其病死率排名仅次于肺癌，已成为一个严重影响男性躯体健康和生活质量的公共卫生问题[16-18]。目前，临床对于前列腺癌首选有效治疗手段为手术切除治疗，但对于部分晚期前列腺癌患者来说，手术治疗已错失最佳时机，故雄激素剥夺治疗在目前被公认为是其首选有效治疗手段[19]。但随着治疗时间延长，有学者发现部分前列腺癌患者在经雄激素剥夺等内分泌治疗后进一步进展为去势抵抗性前列腺癌，严重影响前列腺癌患者的治疗效果及预后情况[20]，故找寻相关因素并降低去势抵抗性前列腺癌的发生是改善前列腺癌患者预后的关键。

本研究结果显示，在108例经雄激素剥夺治疗的前列腺癌患者中，Oct4蛋白阳性表达率为57.41%，血清PSA水平≥50 pg/ml的比例为72.22%，而治疗后有35.19%的前列腺癌患者进展为去势抵抗性前列腺癌，符合既往研究报道[21]。本研究结果还显示，肿瘤低分化、出现淋巴结转移、PSA水平>50 pg/ml及治疗后进展为去势抵抗性前列腺癌的前列腺癌患者Oct4蛋白阳性表达率均较高，提示Oct4蛋白与前列腺癌病情进展及去势抵抗性前列腺癌的发生均有一定的关系。结合以往临床研究可知，Oct4基因属于干细胞转录因子的一种，其联合Nanog和Sox2共同维持胚胎干细胞的自我更新和多向分化潜能[22]。

表2 不同Oct4蛋白表达的前列腺癌患者临床资料比较(例)

注：PSA为前列腺特异性抗原，Oct4为11聚体结合转录因子4

表3 影响前列腺癌患者出现去势抵抗性前列腺癌的单因素分析(例)

注：PSA为前列腺特异性抗原，Oct4为11聚体结合转录因子4

近年来，随着研究的不断深入，有研究结果显示，在前列腺等多种恶性肿瘤组织中其Oct4基因呈异常表达[23]，且有相关研究证实，较正常前列腺组织而言，前列腺癌组织中Oct4基因的表达显著升高，而在良性前列腺组织中其Oct4基因的表达类似于前列腺癌组织，由此可推断Oct4基因在前列腺癌的发生中起着至为关键的作用[24-25]，本研究结果也符合上述理论。本研究结果还显示，不同年龄、肿瘤分级、临床分期、淋巴结转移情况、PSA水平及Oct4蛋白表达的前列腺癌患者间其治疗后进展为去势抵抗性前列腺癌的发生率比较差异均有统计学意义，提示Oct4与去势抵抗性前列腺癌的发生也有着密切关系。相关文献曾证实，一定水平的Oct4基因对前列腺癌组织的消退具有一定的促进作用，但随着Oct4表达水平的升高，可导致经雄激素剥夺后肿瘤进一步生长，从而加大去势抵抗性前列腺癌发生的可能[26]，由此可见，Oct4基因蛋白的表达可在一定程度预测前列腺癌肿瘤生长及去势抵抗性前列腺癌的发生。本研究经Cox比例风险回归模型分析显示，Oct4蛋白阳性表达为导致前列腺癌患者经雄激素剥夺治疗后进展为去势抵抗性前列腺癌的独立危险因素，由此则进一步证实了Oct4基因蛋白与去势抵抗性前列腺癌的相关性。

表4 影响前列腺癌患者出现去势抵抗性前列腺癌的多因素分析

综上所述，Oct4蛋白过多表达为导致前列腺癌患者经雄激素剥夺治疗后进展为去势抵抗性前列腺癌的独立危险因素，可作为临床预测去势抵抗性前列腺癌发生的有效指标之一。但本研究所选样本含量过小及研究时间过短，对于Oct4蛋白表达是否受其他因素影响尚未明确，可加大样本含量和延长研究时间进一步深入研究。