荧光PCR技术在从业人员伤寒痢疾快速筛查中的应用分析

吕志刚

（南京市高淳区疾病预防控制中心检验科 江苏 南京 211300）

从业人员进行伤寒痢疾检测是食品安全的重要保障，以往采用的传统检测模式比较费时，且检测结果准确性欠佳[1]。鉴于此，采用荧光PCR技术进行伤寒痢疾快速筛查，其筛查速度较快，灵活性及特异性较高，能够起到快速筛查的目的。

1.临床资料与方法

1.1 临床资料

选择2016年8月至2017年8月从业人员进行肛拭子采集，共采集粪便检测样本9000份。其中，男性粪便检测样本5233份，女性粪便检测样本3767份。从业人员最小年龄22周岁，最大年龄52周岁，中位年龄（38.1±10.6）周岁。9000份样本分别实施传统伤寒痢疾检测和荧光PCR技术检测，其中传统伤寒痢疾检测结果作为参照组，荧光PCR技术检测结果作为实验组。

1.2 方法

实验组与参照组均应用采样杆实施样本采集，将采样杆置于从业人员肛门内，插入深度在20至30mm之间，采用顺时针形式沿从业人员直肠壁旋转1至3圈后缓慢抽出。将采集样本头部折断后置于恒温培养箱之中，其温度保持在37℃，培养12小时[2]。取80ul样本置于离心管之中予以离心操作，离心转速为12000rpm，离心时间为5min。离心后标本去除上层液体，加入DNA提取液混合均匀，剂量为50ul。将标本置于加热箱之中加热，温度为100℃，加热时间为5分钟。参照组采用传统伤寒痢疾检测方式对沙门氏菌及志贺氏菌进行双色检测，依据《食品卫生微生物学沙门氏菌检验标准》和《食品卫生微生物学志贺氏菌检验标准》[3]。实验组采用荧光仪实施检测，参照《从业人员预防性健康检查沙门菌志贺菌检验方法》。上述2组均在检测中降低人员操作对标本结果准确性造成的干扰，消除主观因素导致的检测误差，检测结束后统计2组检测结果。

1.3 统计学分析

本研究9000份从业人员伤寒痢疾筛查样本数据对比采用SPSS19.0软件，实验组与参照组沙门氏菌及志贺氏菌筛查阳性结果情况行χ2检验，采用（n%）表示。上述数据对比差异性较高（P＜0.05），本研究结果有统计学意义。

2.结果

对比实验组与参照组从业人员伤寒痢疾筛查阳性结果（见表），两者差异明显（P＜0.05），实验组沙门氏菌（1.44‰）及志贺氏菌（1.67‰）检出率明显高于参照组（0.44‰、0.56‰）。

表 2组从业人员伤寒痢疾筛查阳性结果比较[n（‰）]

3.讨论

我国当前对食品卫生的要求较高，从业人员患有痢疾伤寒、肝炎、肺结核及皮肤病的疾病，在其治愈前不得从事相关工作，以保障消费者的身体健康，提升我国公共健康水平。因此，对从业人员进行健康筛查尤其重要，伤寒痢疾通过消化道传播的速度较快，传染性较强，加之该疾病临床症状不明显，极易被人忽视。鉴于此，需要对从业人员伤寒痢疾实施筛查，以提高对从业人员的管理，避免受到伤寒痢疾细菌感染的食品流入市场。以往多采用传统方式实施伤寒痢疾筛查，主要依据食品微生物学沙门氏菌及志贺氏菌检验标准实施，该种方式筛查速度较慢，一次伤寒痢疾筛查工作往往需要5至7天方可完成，难以保障筛查结果的实效性[4]。另外，传统检查方式灵敏度及特异性水平较低，无法准确检测从业人员沙门氏菌及志贺氏菌感染情况。传统检查方式在一定程度上限制了食品卫生从业人员管理效果，在这一背景下，更为快速、准确的检测技术亟待创新。

荧光PCR技术具有检测速度快、检测准确率高、人员成本低的优势，该项技术属于定量试验方式，采用荧光染料的特异性探针对PCR产物予以追踪，通过软件可对其产物加以分析。荧光PCR技术能够优化和简化现有伤寒痢疾检测的流程，从而提升检测速度，改变了以往检测中增菌及配液的流程，直接在其采样器中配备增菌液，检测人员可直接进行使用，有效避免了该环节人工操作对检测结果造成的影响，也能够避免样本受到外界的污染，降低主观因素及客观因素对荧光PCR技术检测结果准确性造成的影响[5]。另外，荧光PCR技术应用于从业人员痢疾伤寒检测之中，检验人员工作量得以降低，极大缩短了检测时间，从而提高从业人员伤寒痢疾筛查效率。

综上所述，采用荧光PCR技术实施从业人员伤寒痢疾快速筛查，其筛查结果准确性较高，筛查结果特异性及灵敏性高，检测速度较快。本研究结果证实，采用荧光PCR技术进行伤寒痢疾筛查的实验组，其沙门氏菌及志贺氏菌准确率均高于参照组，证实荧光PCR技术具有推广应用价值。