妇科就诊人群高危型HPV感染情况分析及与TCT相关性研究

姚国光 ，马 亮 ，丛 笑 ，马 莉 ，姜永玮 ，李 囡 ，杨 辉 ，杨春峰 ，曹永彤 ⋆

（1.赤峰宝山医院 检验科，内蒙古 024076；2.中日友好医院 检验科；3.妇产科，北京 100029）

宫颈癌是常见的妇科恶性肿瘤之一，2012年居全球女性最常见恶性肿瘤的第4位[1]。人乳头状瘤病毒（human papillomavirus，HPV）感染是致使患者出现癌前病变的重要因素之一，HPV存在高度的种属性，感染宿主后，病毒基因整合至宿主基因，造成宿主细胞增殖紊乱、分化功能丧失，引起宫颈病变，进而引起宫颈癌[2]。相关研究显示HPV感染长病程（＞10年）者发生宫颈癌概率约为50%[3]，而宫颈液基薄层细胞学检测（thinprep cytologic test，TCT）是目前早期筛查宫颈癌前病变的常用手段。TCT联合HPV检测可提高宫颈病变的检出率，对宫颈癌早期筛查诊断和早期治疗具有重要意义。

表1 各年龄段HPV阳性率及TCT阳性率比较 n（%）

1 资料与方法

1.1 临床资料

收集2017年1月～12月间6384例中日友好医院妇科门诊女性患者标本，同时进行HPV和TCT检查，患者年龄17～90岁，中位年龄34岁。

1.2 标本采集和检测方法

TCT标本采集前将研究对象宫颈分泌物擦干净，用特制的毛刷从受试对象宫颈顺时针旋转5圈后立即放入装有细胞保存液的小瓶中，TCT标本经离心后分离标本中的黏液、血液和炎性细胞，细胞经自然沉淀转移到涂有黏附剂的载玻片上，制成直径为20mm的超薄层细胞。

HPV标本采集方法与TCT相同，HPV DNA（包括 16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68、82）检测采用上海之江生物科技股份有限公司的HPV的基因分型检测试剂盒。

1.3 结果判读

HPV的4种混合液在FAM和VIC通道均无Ct值，则判定为阴性：Ct值≤38.0且扩增曲线呈典型的S型，判定为HPV阳性；Ct在38.0～40.0之间，需重复测定.若仍在38.0～40.0之间且扩增曲线呈典型S型，则判定为阳性，反之为阴性。任何一种HPV亚型阳性，即为HPV阳性：2种及以上亚型同时阳性，即为多重感染，多重感染重复计数。

对患者进行TCT检测后，其诊断标准采用伯塞斯达系统（TBS）分级系统：无上皮内病变或恶性病变（NILM），不典型鳞状细胞（ASC）包括ASC不能明确意义（ASC-US）和ASC不除外上皮内高度病变（ASC-H）、鳞状上皮内低度病变（LSIL）、鳞状上皮内高度病变（HSIL）、鳞状细胞癌（SCC）和腺癌（AC），结果以出现 ASC、LSIL、HSIL 为阳性。

1.4 统计学方法

应用SPSS19.0软件进行统计学分析，计数资料组间比较采用χ2检验。

2 结果

2.1 宫颈组织细胞学检查结果

6384例患者中无宫颈上皮内瘤变者5857例（91.74%）、不典型鳞状细胞 （ASC）者 273例（4.28%）、低度鳞状上皮细胞内病变 （low-grades quamous intraepithelial lesion，LSIL）170例（2.66%）、高度鳞状上皮内病变（high-grade squamous intraepithelial lesion，HSIL）84例（1.32%）。

2.2 HPV感染年龄分布及差异

表1示，6384例妇科就诊人群中HPV阳性1539例（单一或多重感染），总感染率为24.11%，15种HPV基因型均有检出。17～30岁年龄组感染率高于其它年龄组（均P＜0.01）。单一感染各年龄组间差异无统计学意义 （P＞0.05），多重感染中17～30岁年龄组阳性率（11.67%）显著高于其它年龄组（均P＜0.01）。HPV阳性标本中单一型感染占比 （74.14%）显著高于多重感染 （25.86%）（P＜0.01）。各年龄组间TCT检测结果阳性率差异无统计学意义（均 P＞0.05）。

2.3 单一感染、多重感染与TCT的相关性

表2示，多重感染组的TCT阳性率31.66%（126/398）显著高于单一感染组 （24.45%，P＜0.01）。

表2 单一感染与多重感染中TCT阳性数

2.4 HPV感染亚型分布

1545例HPV阳性标本中，单一亚型感染型别较高的依次分别是 52型 （19.28%）、16型（17.7%）、58型（16.83%），多重感染型别较高的 3种亚型与单一感染一致。

TCT阳性结果中，感染亚型最多的是16型（20.17%）、58型（13.56%）、52型（11.86%）； TCT阴性结果中感染亚型最多的是52型 （19.25%）、58型（15.21%）和 16型（13.53%）。

2.5 TCT各组HPV感染率比较

根据TBS分组后，HPV在HSIL组阳性率为91.67%，LSIL组为 77.65% ，ASC组为 71.79%，NILM组为19.36%。ASC组、LSIL组、HSIL组与NILM组HPV感染率具有显著差异（均P<0.01）。HSIL组HPV感染率显著高于LSIL组和ASC组（均P＜0.01），ASC组HPV感染率显著高于NILM组（P＜0.01）。 HSIL 组中，HPV16型占 58.33%，显著高于本组其他HPV亚型。

3 讨论

研究表明，75%以上的性活跃女性在一生中会感染一种或者一种以上类型的HPV[4]，但是其中90%的感染患者在感染后1年左右能够通过自身的免疫系统将病毒清除，只有10%患者不能清除而成为持续感染者。由于宫颈癌早期一般发病较为隐匿，症状较不典型[5]，一旦发生，对患者的心理和生理均造成严重的影响，而持续的高危型人乳头瘤病毒（HPV）感染是宫颈癌的首要病因，95%～99.7%的宫颈癌患者可以检出HPV[6]。宫颈癌是目前仅有的少数几个可以早期发现、早期治疗、并可治愈的恶性肿瘤之一[7]。由于在宫颈癌发生前会有较长一段时间的癌前病变[8]，此期间只要采取有效的干预措施，就可降低宫颈癌的发生率，因此对HPV阳性患者及时进行干预可有效预防宫颈癌。

3.1 HPV感染与年龄的关系

本研究中发现高危型HPV的感染与年龄相关。17～30岁年龄组总感染率（29.83%）及多重感染率（11.67%）最高，可能与此年龄人群性活跃度高并缺少相应的保护措施以及免疫系统未被致敏而导致了感染原因有关，虽然感染率较高，但病毒则易被清除，此阶段感染大部分为暂时性[9]。其次是50～60岁组（24.97%），这与本组女性机体内雌激素水平减低和免疫功能减退、机体清除病毒能力下降以及就诊时宫颈已发生病变有关，≥60岁的女性感染率有所下降，与智艳芳等[10]研究报告的年龄段与HPV感染率呈“U”型曲线关系布略有不同，可能与人群分布引起偏差有关。

3.2 HPV亚型感染率

在HPV感染的各亚型中，单一感染与多重感染型别前 3 位均是 HPV52、HPV16、HPV58，与2015年本院统计结果 （单一型别感染率较高的3种依次为HPVl6、52、58；多重感染型别感染率较高的是HPVl6、58、和52型）[11]略有差别，说明HPV52亚型感染例数已经超过HPV16亚型成为单一感染和多重感染数量最多的亚型。这也与北京天坛医院史从宁等[12]、重庆地区徐薇等[13]研究结果一致。这也为本地区HPV流行现状、相关疫苗的研制提供了数据支持。在本研究中，单一感染明显高于多重感染，但是多重感染患者中TCT阳性率高于单一感染TCT阳性率，符合Harper等[14]的研究发现，说明多重感染相对于单一感染对于宫颈细胞学改变具有更大的作用，故多重HPV感染更应该引起临床重视。

3.3 HPV感染亚型与TCT病变级别的相关性

本研究中HSIL组HPV感染率91.67%，LSIL组77.65% ，ASC组71.79%，NILM组19.36%，说明HPV感染率随着TCT结果的严重程度升高而不断增加，与傅祝能等[15]研究类似。在2016年美国阴道镜和宫颈病理学会（ASCCP）新指南提出：对于宫颈细胞学无异常而HPV阳性的30岁以上的妇女，如其为HPV16、18感染者，应立即进行阴道镜检查；HPV16是发生高度上皮内瘤变（HSIL）风险最高的亚型[16]。而在本次研究HSIL组中，HPV16亚型感染率为58.33%，明显高于本组其他亚型感染率、也高于其他各组HPV16感染率；而在HPV总感染人次中HPV52亚型占17.15%，HPV16亚型占15.41%，HPV58亚型占14.74%，但感染不同型别疾病进展和预后不近相同，HPV16亚型的患者进一步进展为HSIL和宫颈癌的可能性较感染HPV52亚型高，检出HPV16感染后更应该积极治疗，对未感染HPV16女性应积极接种HPV16价疫苗，但有HPV58与HPV52型检出也不应忽视，与邱峰等[17]研究结果基本一致。本研究结果显示，HPV检测结果阴性而TCT细胞学结果阳性病例达122例（23.15%），其中ASC组77例，LISL组38例，HISL组7例，可能与HPV数量低于检测范围下限或存在其它不包含在本研究检测范围内的高危亚型有关，也可能与取材等原因有关。综上所述，本研究对HPV各种亚型感染情况分布及与TCT相关性进行了分析和汇总，为本地区HPV流行现状的分析研究、相关疫苗的研制开发及不同亚型HPV的预防治疗提供依据。

4 参考文献